大氣細(xì)顆粒物pm2.5對體外血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響

1、廣東醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文大氣細(xì)顆粒物（PM2.5）對體外血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響姓名：敖當(dāng)申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：兒科學(xué)指導(dǎo)教師：譚建新20080501大氣細(xì)顆粒物( P M 2 ．5 ) 對體外血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響【目的】中文摘要采用不同濃度的P M 2 ．5 作用于培養(yǎng)的大鼠血管平滑肌細(xì)胞( V S M C ) ，測定P M 2 ．5 染毒后V S M C 中E - l 、N O 、i N O S 、增殖細(xì)胞核抗原( P C N

2、A ) 及血管細(xì)胞黏附分子．1 ( V C A M ．1 ) 水平變化，并觀察各組細(xì)胞形態(tài)改變及增殖情況，探討P M 2 ．5對V S M C 增值的影響。【方法】1 ．大鼠V S M C 體外培養(yǎng)，取第4 _ 8 代對數(shù)生長期的V S M C 用于實(shí)驗(yàn)研究。2 ． 應(yīng)用P M 2 ．5 空氣采樣儀，采集湛江市區(qū)P M 2 ．5 ，超聲震蕩洗脫顆粒物后冷凍真空干燥成千粉，一2 0 ℃保存?zhèn)溆谩? ．配制終濃度為1 0 ，2 0 ，5 0

3、 ，1 0 0 ，2 0 0 9 9 ／m L 的P M 2 ．5 溶液，將V S M C 分為對照組、1 0 、2 0 、5 0 、1 0 0 、2 0 0 9 9 ／m L 染毒組，實(shí)驗(yàn)組V S M C 染毒2 4 小時(shí)。4 ．M T T 法檢測P M 2 ．5 對體外培養(yǎng)的V S M C 增殖影響，倒置相差顯微鏡下觀察各組V S M C 形態(tài)變化。5 ．免疫組化法檢測不同濃度P M 2 ．5 對V S M C 中P C N A 、

4、V C A M ．1 表達(dá)的影響。6 ．硝酸還原酶法檢測不同濃度P M 2 ．5 染毒后V S M C 中N O 、i N O S 水平變化。7 ．放射免疫法( R I A ) 檢測不同濃度P M 2 ．5 染毒后V S M C 中E T - 1 水平變化。【結(jié)果】在1 0 ．2 0 0 9 9 ／m L 染毒濃度范圍內(nèi)，P M 2 ．5 對培養(yǎng)的V S M C 有如下影響：1 ．使V S M C 從收縮型向合成型轉(zhuǎn)化，細(xì)胞增殖活躍，隨

5、著染毒濃度增加，M 丌值從0 ．4 9 ±0 ．6 7 增加到0 ．7 2 4 - 0 ．2 5 ，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( 均P < 0 ．0 1 ) 。2 ．P M 2 ．5 抑制V S M C 的N O 分泌，隨著染毒濃度增加，V S M C 的N O 水平從( 4 3 ．5 3±3 ．4 6 ) um o l ／L 下降到( 2 9 ．2 8 + 2 ．2 8 ) l Im o l ／L ，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(