異鉤藤堿對血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的:觀察異鉤藤堿對血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)誘導(dǎo)的大鼠血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)增殖的影響，并探討其機(jī)制。 方法:組織塊貼壁法培養(yǎng)SD大鼠胸主動脈VSMC，細(xì)胞計數(shù)和MTT比色法觀察異鉤藤堿(10<'-7>M、10<'-6>M、10<'-5>M)對AngⅡ(10<'-6>M)誘導(dǎo)的大鼠vsMc增殖的影響：化學(xué)法測定培養(yǎng)細(xì)胞上清液中一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合酶(NOS)活性：流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞增殖周期;Real-time R

2、T-PCR檢測VSMC中原癌基因c-fos、骨橋蛋白(OPN)、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)mRNA表達(dá)。 結(jié)果:在正常的VSMC中各藥物組與空白組無差異，且細(xì)胞存活率超過95％。Ang Ⅱ明顯升高細(xì)胞數(shù)量和吸光度值(p<0.05)，降低vsMc上清液中NO含量和NOS活性(p<0.01)，增加細(xì)胞周期中S期細(xì)胞比例，而G<,0>/G<,1>期細(xì)胞比例減少(p<0.01)；AngⅡ顯著增加c-fos、OPN和PCNA mRNA的表

3、達(dá)p<0.01)。異鉤藤堿(10<'-6>M、10<'-5>M)均明顯抑制AngⅡ誘導(dǎo)的VsMC的增殖，升高細(xì)胞上清液中NO含量，增強(qiáng)NOs活性，明顯減少細(xì)胞周期中s期細(xì)胞比例，增加G<,0>/G<,1>期細(xì)胞比例，并明顯下調(diào)AngⅡ誘導(dǎo)的c-fos、OPN和PCNA mRNA表達(dá)(P<0.01)。 結(jié)論:異鉤藤堿可抑制Ang Ⅱ誘導(dǎo)的VsMc增殖，其機(jī)制至少與增強(qiáng)細(xì)胞上清液中NOS活性并促進(jìn)NO合成和釋放，阻滯細(xì)胞周期中G<,