美國紅梣fraxinuspennsylvanicamarch.抗菌肽活性物質的篩選及研究

1、山東師范大學碩士學位論文美國紅梣（Fraxinus pennsylvanica March.）抗菌肽活性物質的篩選及研究姓名：陳彤彤申請學位級別：碩士專業(yè)：植物學指導教師：樊守金20060520山東師范大學碩士學位論文美國紅棒( F r a x i n u s p e n n s y l v a n i c aM a r s h ．) 抗菌肽活性物質的篩選及研究中文摘要植物在生長過程中需要從富含微生物的環(huán)境中獲取全部營養(yǎng)物質，但它們卻很

2、少被微生物感染。這是因為植物在長期進化過程中形成了各自特有的抗菌途徑，例如，為了抵御病原微生物的感染，植物合成了多種具有抗菌作用的次生代謝產物或多肽?？咕? a n t i m i c r o b i a l p e p t i d e s ，A M P s ) 在植物防御反應中扮演非常重要的角色?？咕膹V泛存在于植物、動物和微生物體內，人們最早于1 9 6 5 年從蜜蜂毒液中分離得到，現(xiàn)在已經在微生物、昆蟲、脊椎動物以及植物中分離得

3、到了多種抗菌肽并對它們進行了深入的研究。根據抗菌肽作用位點及抗菌機理的不同，可以分成三類。作用于微生物細胞壁的抗菌肽通過干擾葡聚糖、幾丁質等微生物細胞壁組成物質的正常合成來抑制微生物的生長，如植物中發(fā)現(xiàn)的H e v e i n 類和K n o t t i n 類抗菌肽即屬此類。而作用于微生物質膜的抗菌肽則通過生理條件下帶有正電荷且具有兩親性的特點與微生物細胞結合，并插入到質膜中，在膜上形成穿膜孔洞使得細胞物質外泄或激活離子通道使微生物細

4、胞離子比例失調，從而抑制微生物的生長。此類抗菌肽數(shù)量眾多，如防衛(wèi)素類、M a g a i n i n s 、乳鏈菌肽等都是典型的作用于微生物質膜的抗菌肽。第三類抗菌肽主要是通過啟動脅迫相關基因、絮凝細胞內含物、抑制某些細胞器的作用、抑制核酸合成或蛋白質的合成來發(fā)揮抗菌活性的，如各種核糖體失活蛋白和蛋白酶抑制劑等。本文通過凝膠過濾層析和反相高效液相色譜相結合的方法對美國紅豐岑果實水浸提液中的抗菌肽進行了分離純化，得到了分子量小于S e p

5、 h a d e xG 一1 5 凝膠排阻分子量15 0 0 D a 的小分子抗菌肽。通過L C ／E S I —M S 液質聯(lián)用法對該物質進行了初步分析，根據其正離子采集模式下的譜圖推測該物質的分子量約為9 2 7 ．4 D a ，其氨基酸組成可能為L y s ，A s p ，P r o ，G l y ，I l e ( L e u ) ，G l y ，G l u ，P r o ，B c Z 。確切的分子量及氨基酸序列有待于進行進一步的