美國(guó)紅梣fraxinuspennsylvanicamarch.抗菌肽活性物質(zhì)的篩選及研究

1、山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文美國(guó)紅梣（Fraxinus pennsylvanica March.）抗菌肽活性物質(zhì)的篩選及研究姓名：陳彤彤申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：植物學(xué)指導(dǎo)教師：樊守金20060520山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文美國(guó)紅棒( F r a x i n u s p e n n s y l v a n i c aM a r s h ．) 抗菌肽活性物質(zhì)的篩選及研究中文摘要植物在生長(zhǎng)過(guò)程中需要從富含微生物的環(huán)境中獲取全部營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，但它們卻很

2、少被微生物感染。這是因?yàn)橹参镌陂L(zhǎng)期進(jìn)化過(guò)程中形成了各自特有的抗菌途徑，例如，為了抵御病原微生物的感染，植物合成了多種具有抗菌作用的次生代謝產(chǎn)物或多肽?？咕? a n t i m i c r o b i a l p e p t i d e s ，A M P s ) 在植物防御反應(yīng)中扮演非常重要的角色。抗菌肽廣泛存在于植物、動(dòng)物和微生物體內(nèi)，人們最早于1 9 6 5 年從蜜蜂毒液中分離得到，現(xiàn)在已經(jīng)在微生物、昆蟲(chóng)、脊椎動(dòng)物以及植物中分離得

3、到了多種抗菌肽并對(duì)它們進(jìn)行了深入的研究。根據(jù)抗菌肽作用位點(diǎn)及抗菌機(jī)理的不同，可以分成三類。作用于微生物細(xì)胞壁的抗菌肽通過(guò)干擾葡聚糖、幾丁質(zhì)等微生物細(xì)胞壁組成物質(zhì)的正常合成來(lái)抑制微生物的生長(zhǎng)，如植物中發(fā)現(xiàn)的H e v e i n 類和K n o t t i n 類抗菌肽即屬此類。而作用于微生物質(zhì)膜的抗菌肽則通過(guò)生理?xiàng)l件下帶有正電荷且具有兩親性的特點(diǎn)與微生物細(xì)胞結(jié)合，并插入到質(zhì)膜中，在膜上形成穿膜孔洞使得細(xì)胞物質(zhì)外泄或激活離子通道使微生物細(xì)

4、胞離子比例失調(diào)，從而抑制微生物的生長(zhǎng)。此類抗菌肽數(shù)量眾多，如防衛(wèi)素類、M a g a i n i n s 、乳鏈菌肽等都是典型的作用于微生物質(zhì)膜的抗菌肽。第三類抗菌肽主要是通過(guò)啟動(dòng)脅迫相關(guān)基因、絮凝細(xì)胞內(nèi)含物、抑制某些細(xì)胞器的作用、抑制核酸合成或蛋白質(zhì)的合成來(lái)發(fā)揮抗菌活性的，如各種核糖體失活蛋白和蛋白酶抑制劑等。本文通過(guò)凝膠過(guò)濾層析和反相高效液相色譜相結(jié)合的方法對(duì)美國(guó)紅豐岑果實(shí)水浸提液中的抗菌肽進(jìn)行了分離純化，得到了分子量小于S e p

5、 h a d e xG 一1 5 凝膠排阻分子量15 0 0 D a 的小分子抗菌肽。通過(guò)L C ／E S I —M S 液質(zhì)聯(lián)用法對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行了初步分析，根據(jù)其正離子采集模式下的譜圖推測(cè)該物質(zhì)的分子量約為9 2 7 ．4 D a ，其氨基酸組成可能為L(zhǎng) y s ，A s p ，P r o ，G l y ，I l e ( L e u ) ，G l y ，G l u ，P r o ，B c Z 。確切的分子量及氨基酸序列有待于進(jìn)行進(jìn)一步的