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1、浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文羥乙基淀粉130/0.4對(duì)膿毒血癥大鼠全身抗炎作用及相關(guān)機(jī)制研究姓名:謝俊然申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:黃衛(wèi)東20100401浙江大學(xué)博十學(xué)位論文 摘要N F .K B 獲自由從胞質(zhì)移入胞核內(nèi)從而促進(jìn)一系列炎癥介質(zhì)的表達(dá),包括多種細(xì)胞因子、粘附分子等,最終促進(jìn)膿毒血癥的發(fā)生。本實(shí)驗(yàn)欲應(yīng)用大鼠盲腸結(jié)扎穿孔模型( c e c a ll i g a t i o na n d p u n c t u r
2、e ,C L P ) 模擬膿毒血癥觀察第三代羥乙基淀粉制劑H E S l 3 0 /0 .4 的全身抗炎作用,并且試圖從是否影響T L R s /N F .r d 3 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路方面解釋H E S l 3 0 /0 .4 的可能抗炎機(jī)制。第一部分羥乙基淀粉( H E S l 3 0 /0 .4 ) 對(duì)膿毒血癥大鼠血漿細(xì)胞因子的影響以及T o u 樣受體4 /核因子.r , B 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在其中的作用研究膠體H E S l 3 0 /
3、0 .4 是羥乙基淀粉的第三代制劑,目前在臨床廣為使用,除了擴(kuò)容作用,前人研究提示H E S 可能還具備全身抗炎作用,但具體機(jī)制不清。本部分實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖怯^察H E S l 3 0 /0 .4 對(duì)膿毒血癥大鼠血漿細(xì)胞因子的影響以及探討L P S .T L R 4 - N F .r , _ 1 3 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在其中所起的作用。方法是應(yīng)用大鼠C L P 模型模擬膿毒血癥,C L P 3 h 后輸注不同劑量的H E S l 3 0 /0 .4
4、( 7 .5 m l /k g 、1 5 m l /k g 及3 0 m l /k g ) ,C L P 5 h 后收集大鼠血漿、外周血單核細(xì)胞標(biāo)本,采用鱟三肽偶氮顯色法測(cè)定血漿L P S 濃度;采用酶聯(lián)免疫吸附方法檢測(cè)大鼠血漿腫瘤壞死因子( t u m o r n e c r o s i sf a c t o r ,T N F ) .僅,白介素( i n t e r l e u k i n , I L ) .6 濃度;采用逆轉(zhuǎn)錄.聚合
5、酶鏈方法檢測(cè)外周血單核細(xì)胞T L R 4 m R N A 表達(dá);采用免疫蛋白印跡方法檢測(cè)外周血單核細(xì)胞T L R 4蛋白相對(duì)濃度;采用凝膠電遷移方法檢測(cè)外周血單核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子N F .1 ( B 活化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明C L P 大鼠輸注H E S l 3 0 /0 .4 后可以明顯降低血漿T N F .Q 、I L .6 水平,1 5 m l /k g 劑量組降低細(xì)胞因子水平最明顯;同時(shí),H E S l 3 0 /0 .4 可以顯著抑制C
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