芒果(mangiferaindical.)生長素反應因子類基因miarf2在不定根誘導時的功能研究_第1頁
已閱讀1頁,還剩108頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、中山大學博士學位論文芒果(Mangifera indica L.)生長素反應因子類基因MiARF2在不定根誘導時的功能研究姓名:陳啟助申請學位級別:博士專業(yè):生物技術指導教師:黃學林20080605芒果( M a n g i f e r a i n d i c a L .) 生長素反應因子類基因M i A R F 2 在不定根誘導時的功能研究本文旨在進一步揭示M i A R F 2 基因在芒果子葉切段不定根形成時的有關功能,主要的研究結

2、果如下:本研究通過S o u t h e r n 雜交分析了其拷貝數(shù),發(fā)現(xiàn)M i A R F 2 基因在芒果基因組中是一個單拷貝基因。通過構建原核表達載體p E T - 3 2 a - M i A R F 2 ,將M i A R F 2 轉入大腸桿菌,研究了該基因的表達活性,得到了M i A R F 2 基因的可溶性融合蛋白。利用R T - P C R 技術初步分析了M i A R F 2 基因在芒果子葉切段第一種類型不定根形成過程中的

3、表達情況。結果顯示,在不定根的發(fā)端階段( 不定根誘導7 d 后) ,M i A R F 2 基因開始在近胚軸面表達,不定根誘導的生長分化階段( 誘導1 0 d 時)表達量增強。而在幼嫩的根尖及遠胚軸面,不定根誘導的各個時段都檢測不到M i A R F 2 基因的表達。同時利用實時定量P C R ( R e a l .T i m eP C R ) 技術進一步對M i A R F 2 基因在芒果子葉切段兩種類型不定根形成的各個階段的表達情況

4、進行了研究,結果表明,在芒果子葉切段第一種類型不定根發(fā)生過程中,M i A R F 2 基因只在近胚軸面表達,不定根誘導7 d 后( 不定根的發(fā)端階段) 其表達量開始增加;誘導1 0 d 時( 發(fā)育階段) 表達量達到頂峰,約為本底水平的7 倍;誘導1 3 d ( 不定根突破表皮) 時,M i A R F 2 基因的表達量回落到本底水平。在芒果子葉第二種類型不定根發(fā)生過程中,M 謝尺力基因在背面表達,其表達趨勢與第一種類型不定根發(fā)生時相似

5、。而在芒果子葉的兩種類型不定根發(fā)生過程中,M i A R F 2 基因在子葉遠胚軸面幾乎都不表達。由此可見,M i A R F 2 基因主要在不定根的根原基的發(fā)端及其發(fā)育階段中起作用。采用熒光原位雜交的方法研究了M i A R F 2 基因在芒果子葉切面生根時的組織學的表達特性。結果顯示,在誘導7 d 后M i A R F 2 基因只在芒果子葉近胚軸面的維管束部位表達,主要在分泌腔外層的上皮細胞和韌皮部薄壁細胞中表達。這與我們先前的組織

6、學切片觀察發(fā)現(xiàn)不定根起源于芒果子葉維管束韌皮部的薄壁細胞相吻合。為了通過觀察轉基因煙草的表型變化探討M i A R F 2 基因在不定根形成中的功能,本研究還構建了M i A R F 2 基因的植物表達載體,通過農(nóng)桿菌介導將其轉入煙草( N i c o t i a n at a b a c u m 刪X a n t h i ) 。對轉基因煙草植株不定根根長的表型分析發(fā)現(xiàn),在固體培養(yǎng)基和水培溶液中,轉p 3 5 S :M i A R F

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論