山楂、澤瀉、決明子與紅曲霉混合發(fā)酵制備降脂中藥的研究.pdf

1、人們的飲食結(jié)構(gòu)和飲食習(xí)慣隨生活水平提高發(fā)生了改變，過多高脂食物的攝入導(dǎo)致高脂血癥，進(jìn)一步引發(fā)心血管疾病。心腦血管病具有發(fā)病率高、致殘率高、死亡率高和復(fù)發(fā)率高等特征，是危害人類健康最主要的因素。目前臨床所使用的降脂藥物主要為通過微生物發(fā)酵與化學(xué)合成的他汀類藥物和一些傳統(tǒng)的中藥。具有降脂藥效的天然中藥種類繁多，但由于其活性部位、有效成分不清，作用機(jī)制不明，降脂中藥研發(fā)受到一定限制。因此將現(xiàn)代生物技術(shù)與傳統(tǒng)中醫(yī)藥相結(jié)合，研發(fā)新型的天然降脂產(chǎn)品

2、具有很好的應(yīng)用價值。
　　本論文從紅曲產(chǎn)品中分離純化得到一株產(chǎn)莫納可林K(Monacolin K)的紅曲霉菌株M2,通過形態(tài)學(xué)和18S rRNA分子鑒定，確定該紅曲菌株M2為Monascus Purpureus（紫色紅曲）。
　　本論文利用藥食兩用降脂中藥山楂、澤瀉和決明子為培養(yǎng)基組分，以紅曲菌株M2為菌種，對制備即含有傳統(tǒng)中藥降脂成分又含有他汀類降脂藥物的天然降脂中藥的固態(tài)發(fā)酵工藝進(jìn)行研究。通過單因子實驗和正交試驗優(yōu)化固態(tài)

3、發(fā)酵培養(yǎng)基，得到了適合中藥紅曲固態(tài)發(fā)酵的培養(yǎng)基配方為∶大米∶山楂∶澤瀉∶決明子6∶2∶1∶1,MgSO40.3％、KH2PO40.3％、NaNO30.4％、甘油3％，酵母膏3％，蛋白胨4％、培養(yǎng)基pH值4,優(yōu)化后的培養(yǎng)基Monacolin K產(chǎn)量為2.820 mg/g，較優(yōu)化前提高23.68％。對中藥紅曲固態(tài)發(fā)酵工藝條件進(jìn)行優(yōu)化，得到最佳固態(tài)發(fā)酵工藝為:500mL三角瓶裝100克培養(yǎng)基，滅菌后接種培養(yǎng)48 h種子液10mL，30℃培養(yǎng)2

4、天后打散培養(yǎng)基，第3天加入24％無菌水，5天后降溫至25℃繼續(xù)培養(yǎng)至18天，工藝優(yōu)化后，Monacolin K產(chǎn)量達(dá)到5.127mg/g，較培養(yǎng)基優(yōu)化前2.280 mg/g提高124.80％。
　　用薄層色譜(TLC)和高效液相色譜(HPLC)分析方法對中藥紅曲固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物有效成分進(jìn)行定性和定量分析。結(jié)果顯示:與大米紅曲相比較，所獲得的中藥紅曲發(fā)酵產(chǎn)物含有更多有效成分;與未發(fā)酵基質(zhì)相比較，中藥紅曲發(fā)酵產(chǎn)物中中藥的有效成分熊果酸、2

5、,3-乙酰澤瀉醇-B、大黃酚和大黃素甲醚等分別提高了232.7％、173.7％、767.6％和888.4％。
　　利用實驗所建立的高脂血癥SD大鼠動物模型，對所獲得的中藥紅曲發(fā)酵產(chǎn)物的降脂調(diào)脂藥效進(jìn)行評價。高脂血癥抑制試驗結(jié)果表明:相比于模型組，抑制組大鼠的TC、TG、LDL-C水平顯著降低(p＜0.01)，HDL-C水平顯著升高(p＜0.05);治療試驗結(jié)果顯示:大米紅曲對高脂血癥大鼠TC、LDL-C指標(biāo)有顯著降低作用(p＜0.

6、01)，對HDL-C以及TG水平均無顯著療效;中藥紅曲和陽性藥物能顯著降低(p＜0.01) TC、TG、LDL-C水平，顯著升高(p＜0.01) HDL-C水平。
　　本研究以實驗室篩選的產(chǎn)Monacolin K紅曲霉菌朱M2為菌種，以藥食兩用降脂中藥山楂、澤瀉和決明子等為培養(yǎng)基組分進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵，對發(fā)酵培養(yǎng)基和工藝進(jìn)行優(yōu)化后得到中藥紅曲，采用TLC和HPLC分析方法對其進(jìn)行有效成分分析，通過動物實驗對其進(jìn)行藥效評價，山楂、澤瀉和決