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文檔簡介
1、近年來,隨著轉基因食品的出現(xiàn),轉基因食品的安全問題成為公眾擔心的問題。轉基因食品特定堿基序列的檢測越來越重要。開發(fā)簡便、迅速、廉價、微型化的DNA傳感器成為了研究熱點。電化學DNA傳感器因其響應較快、選擇性好、靈敏度高、成本低等優(yōu)點,成為了生物學、醫(yī)學領域的新型課題。
本文以特定轉基因堿基序列為檢測對象,利用血紅素-還原氧化石墨烯(Hemin-rGO)納米復合物、金納米粒子(AuNPs)、多壁碳納米管(WMCNTs)及硫堇-金
2、納米粒子(THi-AuNPs)等納米材料修飾玻碳電極(GCE),構建了操作方便、靈敏度高、檢測限低的新型電化學DNA生物傳感器。對食品中轉基因成分進行分析。
本文研究內(nèi)容主要包含以下四個部分:
1.Hemin-rGO納米復合物的制備及表征
用氧化石墨及Hemin混合,然后加入還原劑水合肼及氨水,攪拌、油浴、離心清洗得到穩(wěn)定存在的Hemin-rGO納米復合物。用紫外-可見光光譜儀(UV-vis)和X射線光電子
3、能譜分析(XPS)表征其結構及表面形態(tài)。用AuNPs和Hemin-rGO納米復合物修飾GCE制備電化學傳感器,并用電化學方法表征其電化學性能。
2.基于Hemin-rGO納米復合物和AuNPs的玻碳電極超低檢測cDNA的無標記電化學基因傳感器
用AuNPs和Hemin-rGO納米復合物修飾GCE制備電化學傳感器。由HS-DNA與cDNA堿基互補配對成為雙鏈DNA,阻斷Hemin的氧化還原反應,使電流相應降低。在沒有任
4、何外部標簽下,構建一個簡單,靈敏和選擇性好的傳感平臺檢測cDNA。cDNA的濃度檢測范圍從1×10-18~1×10-13M,系數(shù)為0.998,檢出限達到1.41×10-19M。該方法對樣品施加和標準樣品的回收百分比進行了驗證。實驗表明該傳感器具有可靠性、高選擇性、再生性等優(yōu)點,是檢測DNA的理想平臺。
3.THi-AuNPs-DNA納米復合物的制備與表征
將THi固定到由氯金酸還原的AuNPs表面,生成THi-AuN
5、Ps納米復合材料。然后與經(jīng)活化的巰基標記DNA(S1)混合,成功制備了THi-AuNPs-S1納米復合材料。用紫外-可見光光譜儀對其結構及表面形態(tài)進行表征。并用電化學方法表征其電化學性能。
4.基于氨基化的WMCNTs、THi-AuNPs-DNA納米復合物及辣根過氧化物酶雙重信號放大檢測DNA技術
基于氨基化的WMCNTs、AuNPs、THi及辣根過氧化物酶修飾GCE制備電化學DNA傳感器。用辣根過氧化物酶催化過氧化
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