電化學傳感檢測轉基因水稻“汕優(yōu)63”技術研究.pdf

1、由于近幾年出口大米轉基因污染事件的發(fā)生，急需開發(fā)針對轉基因“汕優(yōu)63”大米簡單、經濟、可靠的定量檢測方法。新興的電化學DNA生物傳感技術在最近幾年發(fā)展迅速。它致力于建立簡單、快速、易于自動化、便攜且成本低的檢測系統(tǒng)，在轉基因產品的檢測上具有很大發(fā)展?jié)摿?。轉入的基因序列可以通過固定于傳感元件表面的特異性捕獲探針進行檢測。
　　因此，本論文建立了一套運用電化學傳感技術檢測Bt63特異性序列的體系?；趤喖谆{的方波伏安響應被用于監(jiān)測探

2、針修飾及目標序列的雜交過程。實驗中優(yōu)化了亞甲基藍的孵育及雜交過程中影響電化學檢測結果的因素。結果表明，亞甲基藍的電化學還原峰值與DNA濃度的對數存在線性關系，線性范圍為1.0×10-10～1.0×10-5 M，檢測限為5.8×10-11M。
　　本實驗也用電化學傳感技術對轉基因水稻葉片粉末及幾種不同的大米樣品進行了檢測，驗證其在實際檢測中的應用性及是否可有效區(qū)分不同陽性比例的DNA。實驗結果表明，電化學傳感可有效應用于作物和不同陽

3、性摻比的樣品檢測，并且與PCR方法相比，檢測范圍更寬，靈敏度更高，因此具有很高的市場發(fā)展及應用前景。
　　為提高傳感器的檢測靈敏度，本實驗也開發(fā)了一種利用簡便有效的原位超聲方法制備石墨烯和納米金的復合物作為修飾材料的Bt63大米電化學傳感檢測平臺。通過紫外、透射電鏡、拉曼和循環(huán)伏安法表征可以看出氧化石墨烯被成功還原，平均粒徑為30 nm的納米金粒子均勻分布于還原氧化石墨烯表面。對實驗條件進行優(yōu)化后，亞甲基藍的還原峰與DNA濃度的對