茶樹內(nèi)生真菌-菌核青霉對(duì)茶葉主要成分的影響及安全性初探.pdf

1、茶樹內(nèi)生真菌廣泛分布于健康的茶樹組織里，它們與茶樹之間存在著相互作用。研討茶樹內(nèi)生真菌代謝行為，對(duì)改善茶葉品質(zhì)，改變茶葉消費(fèi)模式，拓寬茶葉消費(fèi)人群，對(duì)茶產(chǎn)業(yè)的發(fā)展有起著積極的促進(jìn)作用。本實(shí)驗(yàn)主要的研究?jī)?nèi)容和研究結(jié)果如下：
　　茶樹內(nèi)生真菌的分離。本實(shí)驗(yàn)茶樹組織表面消毒的辦法如下：先用70％的酒精浸泡茶樹組織1min，而后再用3.5%的次氯酸鈉浸泡茶樹組織4min，再用70%的酒精浸泡茶樹組織30s，最后用無菌水漂洗茶樹組織3次，每

2、次3-5min。實(shí)驗(yàn)根據(jù)分離出的內(nèi)生真菌的菌落形態(tài)特征，初步確定一共分離出8種內(nèi)生真菌。
　　茶樹內(nèi)生真菌對(duì)茶葉主要成分的影響。本實(shí)驗(yàn)主要采用高效液相色譜法來分析茶湯內(nèi)8種成分（沒食子酸、沒食子兒茶素沒食子酸酯咖啡堿、咖啡堿、表沒食子兒茶素、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、表兒茶素、表兒茶素沒食子酸酯、兒茶素）。實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)有一種內(nèi)生真菌降解咖啡堿的能力很強(qiáng)，在第5天時(shí)，咖啡堿降解率為48%，而第10天時(shí)，咖啡堿降解率達(dá)到87.94%

3、。該實(shí)驗(yàn)組的內(nèi)生真菌在發(fā)酵第3天后，實(shí)驗(yàn)組茶湯渾濁度降低、澄清度比對(duì)照組明顯提高。該菌種在單寧酶鑒別培養(yǎng)基上能產(chǎn)生透明圈，說明該菌種能夠產(chǎn)生單寧酶，從而使茶湯中酯型兒茶素類物質(zhì)降解為非酯型兒茶素類物質(zhì)。
　　茶樹內(nèi)生真菌的鑒定。實(shí)驗(yàn)通過rDNA-ITS序列分析，初步確定了對(duì)咖啡堿具備很強(qiáng)的降解能力的茶樹內(nèi)生真菌為菌核青霉（Penicillium sclerotiorum）。
　　實(shí)驗(yàn)還對(duì)人工接種真菌液態(tài)發(fā)酵綠茶的安全性進(jìn)行了

4、評(píng)價(jià)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，小鼠在給藥7天內(nèi)，各實(shí)驗(yàn)組小鼠外觀行為、飲食狀況、糞便等方面無異樣，各實(shí)驗(yàn)組小鼠無死亡現(xiàn)象。通過統(tǒng)計(jì)學(xué)SAS軟件進(jìn)行分析，各實(shí)驗(yàn)組的腎臟、肝臟和脾臟實(shí)驗(yàn)數(shù)值以及血生化指標(biāo)與對(duì)照組比較均無顯著性差異，小鼠腎臟、肝臟和脾臟等器官外觀顏色、大小正常，未見明顯的水腫、萎縮等病變，說明小鼠在實(shí)驗(yàn)過程中未見明顯的中毒性病變。
　　通過內(nèi)生真菌菌核青霉的作用，能夠水解酯型兒茶素和降解咖啡堿，從而降低了茶湯的苦澀味，為開發(fā)低咖