葉酸偶聯(lián)的納米鉆石靶向制劑的合成及體外實(shí)驗(yàn).pdf

1、在過去的幾十年中，隨著癌癥發(fā)病率的升高，惡性腫瘤已成為威脅人類健康的第二大殺手。而目前臨床上廣泛使用的傳統(tǒng)抗癌藥物治療效果差，且毒副作用較大。因此，尋找一種高效低毒的靶向藥物體系來治療癌癥是一個(gè)亟待解決的世界性難題。納米鉆石(ND)，作為一種新型碳納米材料，因其尺寸小，比表面積大，易于修飾，吸附能力高及生物相容性好等特點(diǎn)，被廣泛用作藥物載體。
　　本論文以ND為基礎(chǔ)材料，甲氨蝶呤（MTX）和阿霉素（DOX）為模型藥物，葉酸(FA)

2、作為靶向配體，成功合成了納米鉆石-聚乙二醇-葉酸/縮水甘油-甲氨蝶呤（ND-PEG-FA/GLY-MTX）和納米鉆石-聚乙二醇-葉酸/阿霉素（ND-PEG-FA/DOX）兩種新型的靶向藥物輸送體系，并就它們與細(xì)胞的生物效應(yīng)進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。主要工作分為以下三個(gè)部分：
　　1.以ND為基礎(chǔ)材料，將聚乙二醇（NH2-PEG-NH2）、葉酸（FA）及縮水甘油（GLY）通過化學(xué)鍵逐步連接到納米鉆石表面制得ND-PEG-FA/GLY納米載體

3、，MTX通過酯鍵負(fù)載到納米載體表面，成功合成了一種新型的納米藥物體系ND-PEG-FA/GLY-MTX,通過紫外分光光度計(jì)測(cè)定 MTX在納米載體ND-PEG-FA/GLY的偶聯(lián)量為123μg/mg。利用傅里葉變換紅外光譜儀（FTIR）及透射電鏡(TEM)對(duì)目標(biāo)產(chǎn)物進(jìn)行了表征，結(jié)果表明目標(biāo)產(chǎn)物成功制得。由體外釋藥實(shí)驗(yàn)可知，ND-PEG-FA/GLY-MTX納米藥物體系能夠在正常組織中保持很好的穩(wěn)定性，在腫瘤環(huán)境中釋放大量游離MTX。

4、>　　2.通過激光共聚焦及流式細(xì)胞術(shù)探究了 ND-PEG-FA/GLY-MTX納米藥物體系與人乳腺癌細(xì)胞（MCF-7）和小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞（HT22）的生物效應(yīng)。由流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果可知，細(xì)胞攝取ND-PEG-FA/GLY-MTX納米顆粒具有能量和溫度依賴性，并以網(wǎng)格蛋白和小窩蛋白依賴的受體介導(dǎo)及葉酸受體介導(dǎo)的內(nèi)吞途徑進(jìn)入細(xì)胞，且其進(jìn)入細(xì)胞的量與細(xì)胞表面的受體表達(dá)量有關(guān)。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果還表明ND-PEG-GLY納米載體與 ND-PEG-FA

5、/GLY納米載體均有良好的生物相容性， ND-PEG-FA/GLY-MTX納米藥物的對(duì)癌細(xì)胞的殺傷力大于游離 MTX及ND-PEG-GLY-MTX納米藥物，且主要作用于細(xì)胞周期的G2期。激光共聚焦結(jié)果顯示，ND-PEG-FA/GLY-MTX納米藥物主要存在于細(xì)胞質(zhì)中,并且進(jìn)入細(xì)胞的量具有時(shí)間依賴性。
　　3.利用物理吸附作用將 DOX負(fù)載到 ND-PEG-FA納米載體表面制得ND-PEG-FA/DOX納米藥物，采用熒光光譜法測(cè)定了