非平面特異性CDK4抑制劑的設(shè)計(jì)、合成及抗腫瘤活性研究.pdf

1、CDK是細(xì)胞分裂周期各個階段檢查點(diǎn)的重要組成部分，是健康細(xì)胞生長和增殖所需的。CDK4在細(xì)胞分裂周期的G0/G1期具有非常特殊的功能，CDK4抑制劑可以導(dǎo)致細(xì)胞周期的早期G1阻滯，從而防止不受控制的細(xì)胞生長。最近的研究表明Cdk4是介入癌癥治療的重要靶標(biāo)，因?yàn)镃dk4活性的失調(diào)可導(dǎo)致癌癥。Fascaplysin是一種五環(huán)季銨鹽，最初從斐濟(jì)海綿Fascaplysinopsis Bergquist sp中分離，具有廣泛的活性，它也是一種有潛

2、力的細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4（CDK4）抑制劑，可以引起正常和腫瘤細(xì)胞系的細(xì)胞周期停滯G1期。然而，F(xiàn)ascaplysin由于其本身毒性副作用，嚴(yán)重限制了其作為抗癌藥物的潛力。Fascaplysin在細(xì)胞水平顯示出特殊的毒性，進(jìn)一步的研究表明，fascaplysin的平面結(jié)構(gòu)可以嵌入雙鏈DNA分子，類似于DNA插入劑的屬性。
　　本研究的主要目標(biāo)是開發(fā)有潛力非平面具有CDK4特異性的fascaplysin類似物，不嵌入或不與DNA

3、相互作用，從而達(dá)到避免在細(xì)胞水平的細(xì)胞毒性。本課題通過斷鍵開環(huán)思路設(shè)計(jì)了兩類基于fascaplysin結(jié)構(gòu)非平面特異性CDK4抑制劑，采用經(jīng)典的Pictet-Spengler反應(yīng)，通過環(huán)合，酰化合成了四氫β-咔啉類目標(biāo)化合物，采用異氰酸酯法合成了吲哚類目標(biāo)化合物。隨后，通過1H-NMR、13C-NMR以及ESI-MS對20個化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證。為探索20目標(biāo)化合物的抗腫瘤活性，分別進(jìn)行了細(xì)胞增殖抑制實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞周期、凋亡實(shí)驗(yàn)。
　　

4、MTT法檢測腫瘤細(xì)胞增殖抑制，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示目標(biāo)化合物對腫瘤細(xì)胞增殖抑制活性最好為b5（5μM

5、。兩類化合物細(xì)胞抑制活性弱于對照品fascaplysin（0.2μM　　均呈現(xiàn)G1期阻滯。AnnexinV/PI雙染凋亡細(xì)胞檢測表明化合物a9、b3及b5對A-549均產(chǎn)生凋亡誘導(dǎo)，b5誘導(dǎo)能