RLKs抑制劑ON01910結(jié)構(gòu)類似物的設(shè)計(jì)、合成及初步抗腫瘤活性研究.pdf

1、Plks(Polo-likekinase)的異常表達(dá)與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有密切的聯(lián)系，研究已證實(shí)Plks在多種腫瘤細(xì)胞中均過量表達(dá)。Plks是一種在分裂細(xì)胞中表達(dá)的絲氨酸/蘇氨酸激酶，作用于有絲分裂過程，促進(jìn)細(xì)胞增殖，其含量在細(xì)胞周期M期達(dá)到峰值。鑒于在細(xì)胞增殖過程中的重要作用及其高度保守的結(jié)構(gòu)，Plks成為治療惡性腫瘤的重要靶標(biāo)分子，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了一系列的Plks抑制劑而且它們的抗腫瘤活性已在大量的體內(nèi)外活性研究中得以證實(shí)。其中，ON01

2、910作為一種有效的Plks抑制劑已經(jīng)進(jìn)入臨床三期研究階段，該化合物對(duì)多種腫瘤細(xì)胞（包括一些抗藥性的細(xì)胞株）的半數(shù)抑制濃度在納摩爾濃度范圍內(nèi)。ON01910的藥物代謝動(dòng)力學(xué)性質(zhì)表現(xiàn)為血漿蛋白結(jié)合率高，消除快，半衰期短，而且低劑量給藥時(shí)主要在肝臟中消除，高劑量給藥時(shí)則主要通過尿排泄。更有組織分布研究表明，肝中的藥物蓄積最多，其次是腎，不良反應(yīng)主要表現(xiàn)為輕微的血液毒性和肝損傷，并無嚴(yán)重的骨髓抑制、神經(jīng)病變或心臟毒性。
　　基于me-t

3、oo藥物研發(fā)的一般策略，本文對(duì)ON01910進(jìn)行專利研究并分析總結(jié)該類化合物的構(gòu)效關(guān)系，進(jìn)行局部結(jié)構(gòu)改造，以改變藥物的酸堿性、脂水分布系數(shù)、體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化的方向與延長作用時(shí)間。同時(shí)嘗試通過拆分或手性立體合成，將外消旋體類似物兩種構(gòu)型的異構(gòu)體分別進(jìn)行研究。另一方面引入羥肟酸基團(tuán)，使之以前藥形式給藥，改善ON01910在體內(nèi)的ADME過程，提高生物利用度，而且可發(fā)揮羥肟酸與金屬離子的螯合作用，作用于HDAC、APN、MMP等金屬蛋白酶，影響多

4、條信號(hào)通路而抑制腫瘤的發(fā)生發(fā)展。以4-甲氧基-3-硝基甲苯為起始原料，經(jīng)NBS溴代、巰基乙酸(TGA)親核取代、30％H2O2氧化、與2，4，6-三甲氧基苯甲醛縮合、硝基還原及溴乙酸甲酯(BAM)親核取代生成(E)2-（2-甲氧基-5-（（2，4，6-三甲氧基苯乙烯基磺?；┘谆┢S胺）乙酸甲酯(L6)，L6結(jié)構(gòu)中羧酸甲酯結(jié)構(gòu)被NaOH水解成羧酸(L7)或者與羥胺鉀反應(yīng)引入羥肟酸基團(tuán)(L8)，同時(shí)L7分別與氨基乙醇、賴氨酸、精氨酸、膽堿

5、、氫氧化鈣、氫氧化鎂、氫氧化鉀和氫氧化鈉生成對(duì)應(yīng)的鹽(L9～L16)，而且通過相似的制備方法，合成了具有亞磺酰基結(jié)構(gòu)的類似化合物，結(jié)構(gòu)經(jīng)ESI-MS及1H-NMR驗(yàn)證。
　　除對(duì)ON01910類似物進(jìn)行研究之外，本文在拼合原理的基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)合成了4個(gè)α-硫辛酸衍生物，其中化合物Ⅰ2、Ⅰ3由具有光學(xué)活性的硫辛酸制得，化合物Ⅱ則通過外消旋α-硫辛酸與抗癌輔助劑替拉扎明(TPZ)縮合制得，目標(biāo)化合物具有顯著的抑制腫瘤細(xì)胞增殖活性，為該類化

6、合物的設(shè)計(jì)與合成提供新思路。
　　本文最后對(duì)目標(biāo)化合物的抗腫瘤活性進(jìn)行了初步研究。首先，用熒光測定法驗(yàn)證了L8、L21及Ⅰ1、Ⅱ?qū)DAC酶具有中等抑制活性。同時(shí)，采用MTT法測定了目標(biāo)化合物對(duì)ES-2，K562，PC-3，MDA-MB-231、A549及U937細(xì)胞株的抑制增殖活性，結(jié)果表明這些化合物都具有較好的細(xì)胞毒活性，尤其是L7～8、L21～22，對(duì)被測定的三株細(xì)胞的IC50值均在1μmol·L-1以下。最后以PLC人肝癌