大斯托克斯位移黃色熒光蛋白mAmetrine的結(jié)構(gòu)分析.pdf

1、斯托克斯位移大的熒光蛋白在多色雙光子成像方面，具有重要的應(yīng)用價(jià)值。斯托克斯位移指的是熒光物質(zhì)的最大發(fā)射波長(zhǎng)和最大激發(fā)波長(zhǎng)之差。該差值若大于100 nm，則認(rèn)為該熒光蛋白具有大斯托克斯位移的特性。部分熒光蛋白具有大斯托克斯位移的特性。mAmetrine是一個(gè)黃色熒光蛋白，其激發(fā)峰波長(zhǎng)λex=406 nm，發(fā)射峰波長(zhǎng)λem=526 nm，斯托克斯位移達(dá)120 nm。mAmetrine大斯托克斯位移的特性源自激發(fā)態(tài)質(zhì)子轉(zhuǎn)移(ESPT)和π-π

2、電子與發(fā)光團(tuán)之間的堆積相互作用。但是，其熒光發(fā)射的激發(fā)態(tài)質(zhì)子轉(zhuǎn)移具體路徑和機(jī)制尚未知。為了更好地理解mAmetrine的功能及ESPT或者其他途徑對(duì)大斯托克斯位移的作用，我們利用懸滴蒸汽擴(kuò)散法進(jìn)行mAmetrine蛋白結(jié)晶，然后通過(guò)蛋白結(jié)晶學(xué)方法確定其晶體結(jié)構(gòu)。其中涉及到一系列的步驟：基因克隆，表達(dá)，大量純化，結(jié)晶，衍射數(shù)據(jù)的采集、整合和提煉，原子位置的確定等等。我們得到的mAmetrine的三維結(jié)構(gòu)的晶體分辨率達(dá)2.1?，其結(jié)果可用于