PNIPAAm凝膠的改性及其生物相容性研究.pdf

1、為解決酶消化帶來的細(xì)胞損傷難題，及組織工程用水凝膠生物相容性差的缺點(diǎn)，本研究在保持聚N-異丙基丙烯酰胺(PNIPAAm)凝膠溫敏性的基礎(chǔ)上，分別采用具有良好生物相容性的甘草次酸(GA)衍生物和β-羥基丁酸-co-β-羥基戊酸共聚物(PHBV)作為第二組分，以制備兼具溫敏性和生物相容性的水凝膠，將其作為細(xì)胞培養(yǎng)的載體，并通過溫度變化實(shí)現(xiàn)細(xì)胞片層的可控脫附，研究主要取得了以下研究結(jié)果：
　　 1、首先將GA經(jīng)一系列反應(yīng)生成甘草次酸乙

2、烯基大單體AAc-GA，然后將AAc-GA與NIPAAm合成具有溫敏性的P(NIPAAm-co-AAc-GA)共聚凝膠。利用紅外光譜(FTIR)、元素分析等對(duì)單體、各中間產(chǎn)物及共聚凝膠的結(jié)構(gòu)和組成進(jìn)行了表征，結(jié)果表明各單體及凝膠已成功制備。利用稱重法研究了不同配比凝膠的LCST、退溶脹和再溶脹動(dòng)力學(xué)以及脈沖響應(yīng)性等性能，結(jié)果表明共聚凝膠在水和DMEM培養(yǎng)基中均具有良好的溫度敏感性。
　　 2、在共聚凝膠表面種植人體肝腫瘤細(xì)胞He

3、pG2細(xì)胞和小鼠成纖維細(xì)胞L929細(xì)胞，通過掃面電鏡(SEM)觀察了凝膠表面細(xì)胞生長(zhǎng)的形態(tài)，采用MTT法研究了凝膠表面細(xì)胞的生長(zhǎng)、脫附和轉(zhuǎn)載行為。結(jié)果表明GA的加入抑制了HepG2細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖，并促進(jìn)其凋亡；而對(duì)正常細(xì)胞L929細(xì)胞的生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用，GA的引入提高了凝膠對(duì)正常細(xì)胞的生物相容性；通過低溫脫附，實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞的無損傷脫附；將低溫脫附及酶消化法收集的細(xì)胞分別進(jìn)行了轉(zhuǎn)載實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明通過低溫脫附所得細(xì)胞活性高于酶消化所得細(xì)胞。

4、
　　 3、以無機(jī)納米粘土(Clay)為物理交聯(lián)劑，以PHBV和NIPAAm為單體，通過原位自由基聚合制備得到PNIPAAm/PHBV/Clay納米復(fù)合水凝膠(NCP)。凝膠的形態(tài)、溶脹和溫敏性能的研究表明，隨PHBV/NIPAAm的質(zhì)量比由10％增加至40％，凝膠溶脹率降低，內(nèi)部孔洞尺寸下降，但仍保持優(yōu)良的溫度敏感特性；HepG2細(xì)胞在NCP凝膠表面的增殖、形態(tài)、活性、脫附及轉(zhuǎn)載的研究表明，HepG2細(xì)胞在PHBV/NIPAA