星形膠質(zhì)細(xì)胞在帕金森病神經(jīng)元鐵代謝紊亂中的調(diào)節(jié)作用研究.pdf

1、分類號(hào)：Q42密級(jí)：1E密UDC610JlllJMIIIJlltlIdlIIMIJJlPlllIIIIJdllll學(xué)飛蜘必wF28144耳j”№44駕是大學(xué)博士學(xué)位論文星形膠質(zhì)細(xì)胞在帕金森病神經(jīng)元鐵代謝紊亂中的調(diào)節(jié)作用研究指導(dǎo)教師學(xué)科專業(yè)名稱論文提交日期論文答辯日期答辯委員會(huì)主席張皓云謝俊霞教授生理堂一20131007楊雄里院士出現(xiàn)明顯的衰減，且100州組減弱較101xM組明顯。再給予鐵離子螯合劑1mMDFO灌注后，10州、100州6O

2、HDA處理組細(xì)胞內(nèi)熒光增強(qiáng)均較對(duì)照組明顯。說(shuō)明6OHDA處理后星形膠質(zhì)細(xì)胞鐵轉(zhuǎn)運(yùn)效率增加。2原代培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞在10gM、100lxM6OHDA處理24h后，DMTIIRE蛋白表達(dá)升高，分別約為對(duì)照組的151倍及195倍，且10“M組與100洲組相比差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。鐵轉(zhuǎn)出蛋白FPNl蛋白表達(dá)也較對(duì)照組升高，升高幅度分別為40％、29％。免疫熒光雙重標(biāo)記技術(shù)檢測(cè)到6OHDA處理24h后星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)DMTIIRE表達(dá)增強(qiáng)，呈顆粒狀分布

3、于胞核、胞漿；FPNl表達(dá)同樣增強(qiáng)，主要分布在胞體及突起。與蛋白水平的變化一致，10gM、100gM6OHDA處理24h后，星形膠質(zhì)細(xì)胞中DMTIIREmRNA的表達(dá)升高，分別約為對(duì)照組的19倍及3倍，且10gM組與100gM組相比差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。FPNlmRNA的表達(dá)同樣升高，分別約為對(duì)照組的18倍及27倍，且10gM組與100lxM組間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3鐵調(diào)節(jié)蛋白1(ironregulatoryprotein1，IRPl)蛋白表

4、達(dá)隨6OHDA處理時(shí)間呈動(dòng)態(tài)改變，6OHDA處理12h可見(jiàn)IRPl表達(dá)顯著升高，10“M，100lxM6OHDA組分別為對(duì)照組的152及131倍。然而隨6OHDA作用時(shí)間延長(zhǎng)，24hIRPl表達(dá)反而低于正常水平，分別為對(duì)照組的69％、79％。但10洲組與100lxM組兩組間沒(méi)有顯著性差異。410gM、100uM6OHDA處理05h后，星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)核因子nB(nuclearfactorrBNFxB)p65亞基磷酸化增強(qiáng)，并出現(xiàn)明顯的核移

5、位。IvB抑制劑BAYll7082(5Ⅲ)預(yù)處理05h可有效抑制6OHDA誘導(dǎo)的NFvBp65亞基磷酸化。6OHDA處理24h仍可見(jiàn)細(xì)胞核內(nèi)磷酸化NFKBp65表達(dá)較對(duì)照組升高。5LLMBAYll7082預(yù)處理O5h后與10gM、100gM6OHDA共同孵育24h，可阻斷6OHDA誘導(dǎo)的星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)DMTIIRE蛋白表達(dá)升高，提示6OHDA誘導(dǎo)的DMTl上調(diào)與NFrd3p65磷酸化有關(guān)。510“M、100“M6OHDA處理后6h，星形

6、膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)BDNF、GDNFmRNA的表達(dá)迅速到達(dá)高峰，其中10gM6OHDA處理組BDNFmRNA在6h時(shí)為對(duì)照組的34倍，100pM組為對(duì)照組的24倍；12h時(shí)分別為對(duì)照組的19倍及16倍，24h與對(duì)照組差異無(wú)顯著性。GDNFmRNA在6OHDA處理6h時(shí)10gM組為對(duì)照組的33倍，100gM組為對(duì)照組的51倍；12h時(shí)分別為對(duì)照組的15倍及19倍，24h分別為對(duì)照組的18倍、21倍。這些結(jié)果提示，在6OHDA誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激狀態(tài)下星