雌激素對神經(jīng)元與膠質(zhì)細(xì)胞鐵代謝的影響.pdf

1、帕金森病（Parkinson’s disease，PD）是常見的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，以運(yùn)動不能、肌僵直、靜止性震顫及姿勢反射障礙為特征性表現(xiàn)，其病理學(xué)特征是中腦黑質(zhì)致密帶多巴胺能神經(jīng)元脫失。PD的發(fā)病機(jī)制目前仍不清楚，但黑質(zhì)鐵的特異性沉積被認(rèn)為是PD發(fā)病的重要因素。流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)婦女絕經(jīng)后骨骼等外周組織鐵水平明顯高于絕經(jīng)前，去卵巢大鼠骨骼、肝，脾等組織有鐵的沉積。因此，人們推測雌激素對機(jī)體的鐵代謝一定具有調(diào)節(jié)作用。另有研究顯示，女性P

2、D發(fā)病年齡比男性晚約2.1年，這種差異可能與女性的雌激素有關(guān)。腦鐵的代謝是獨立的機(jī)制，與整體鐵的水平?jīng)]有關(guān)系。目前對腦內(nèi)鐵代謝的調(diào)節(jié)機(jī)制尚屬起步階段，那么，雌激素對中腦黑質(zhì)鐵代謝有怎樣的影響？本實驗應(yīng)用不同濃度的雌二醇分別處理原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞和腹側(cè)中腦（ventral mesencephalon，VM）神經(jīng)元，應(yīng)用免疫印跡的方法觀察雌二醇對星形膠質(zhì)細(xì)胞和VM神經(jīng)元鐵代謝相關(guān)蛋白的影響，實驗結(jié)果如下：
　　1.10nmol/L

3、和100nmol/L的雌二醇分別加入到原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞中處理12h,可以觀察到10nmol/L處理的二價金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（divalent metal transport1，DMT1）蛋白表達(dá)明顯上升（P<0.05，n=7）。
　　2.10nmol/L和100nmol/L的雌二醇分別加入到原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞中處理12h,可以觀察到鐵轉(zhuǎn)出蛋白ferroportin1（FPN1）蛋白表達(dá)均明顯上升（P<0.05，n=7）。

4、
　　3.10nmol/L和100nmol/L的雌二醇分別加入到原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞中處理12h,可以觀察到鐵調(diào)節(jié)蛋白1（iron regulatory protein1，IRP1）蛋白表達(dá)與對照組相比無明顯變化(P>0.05，n=8)。
　　4.10nmol/L和100nmol/L的雌二醇分別加入到原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞中處理12h,可以觀察到100nmol/L處理組缺氧誘導(dǎo)因子1α（hypoxia-inducible

5、factor-1α，HIF-1α）蛋白表達(dá)與對照組相比明顯上升（P<0.05，n=7）。
　　5.10nmol/L和100nmol/L的雌二醇分別加入到原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞中處理12h,可以觀察到缺氧誘導(dǎo)因子2α（hypoxia-inducible factor-2α，HIF-2α）蛋白表達(dá)與對照組相比無明顯變化(P>0.05，n=5)。
　　6.10nmol/L和100nmol/L的雌二醇分別加入到原代培養(yǎng)的VM神經(jīng)元中

6、處理12h,可以觀察到10nmol/L處理組DMT1蛋白表達(dá)與對照組相比明顯下降（P<0.05, n=4）。
　　7.10nmol/L和100nmol/L的雌二醇分別加入到原代培養(yǎng)的VM神經(jīng)元中處理12h,可以觀察到100nmol/L處理的FPN1蛋白表達(dá)與對照組相比上升（P<0.05，n=5）。
　　8.10nmol/L和100nmol/L的雌二醇分別加入到原代培養(yǎng)的VM神經(jīng)元中處理12h,可以觀察到100nmo

7、l/L處理的IRP1蛋白表達(dá)與對照組相比明顯下降（P<0.05，n=6）。
　　9.10nmol/L和100nmol/L的雌二醇分別加入到原代培養(yǎng)的VM神經(jīng)元中處理12h,可以觀察到HIF-1α蛋白表達(dá)與對照組相比均無明顯變化(P>0.05，n=6)。
　　10.10nmol/L和100nmol/L的雌二醇分別加入到原代培養(yǎng)的VM神經(jīng)元中處理12h,可以觀察到HIF-2α蛋白表達(dá)與對照組相比均無明顯變化(P>0.05，n=6

8、)。
　　上述實驗表明，在原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞中，雌二醇是通過上調(diào)HIF-1α的表達(dá)，增加了HIF-1α和DMT1和FPN1 mRNA上的HRE的結(jié)合力度，進(jìn)而增加了DMT1和FPN1的蛋白水平；在原代培養(yǎng)的VM神經(jīng)元中，雌二醇不是通過HIFs調(diào)節(jié)鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)，而是通過下調(diào)IRP1的表達(dá)，進(jìn)而使DMT1表達(dá)降低而FPN1表達(dá)增加，防止神經(jīng)元鐵的聚集，發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。本實驗初步探討了雌激素對腦鐵代謝的影響及機(jī)制，通過實驗了解