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簡介:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文呼市地區(qū)奶牛乳腺炎金黃色葡萄球菌的分離鑒定及基因分型姓名烏蘭巴特爾申請學(xué)位級別碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師郝永清烏尼20070501STUDIESONIDENTIFICATIONANDGENETYPINGOFTHESTAPHYLOCOCCUSAUREUSONCOWMASTITISINHUHHOTAREAABSTRACTTHESTAPHYLOCOCCUSISAKINDOFMAINCONTAGIONC孤黼GERMWHICHC鈾瞰燃MILKCOWMASLITISEXPERIMENTTOSHOUTWITHSPECIALLYHUHHOTAREATHROUGHCMTANDBODYCELLEXAMINATION8SSURS。QCEOF223SAMPLESFROM77MASTITISCOWCARRIEDOUTTHEAUTHENTICATEOFSEPARATION觚呼喲出∞∞船,CUREEVALUATEANDTHEMEDICINESENSITIVITYEXPERIMENTALSOSTUDIEDTHEDISEASESTAPHYLOCOCCUTOCARRYONTAPDRANDOMTO63STUBSSEPARATEDTHECONTERAETINGTOXICSUBSTANCESEXPERIMENTSHOWS63KINDSTUBSISPATHOGENICITYSTAPHYLOCOCCUSTHEEXPERIMENTUSE9MAJORTYPE21KINDSOFMEDICINEWHICHISCLINICALTREATMENTONPATHOGENICSTAPHYLOCOCCUSPENICILLIILTHESULFASULFONAMIDEMEDICINEANDEEPHAZOLINETHEMEDICINEALLHAVEALREADYPRODUCEDDIFFERENTDEGREEDRUGRESISTANCE,BUTAMINOGLYCOSIDESAND1U6859AHAVEOBVIOUSLYBACTERIOSTASISEFFECTALTERRAPDFOUNDTHAT63STRAINSTAPHYLOCOCCUSHASMUTIBANDFIOMSEXPANDINGBETWEEN扣13MOLECULARWEIGHTISBETWEENTHE502200BPSUSESPSSI15ANALYZETHESTAPHYLOCOCCUSBAND,ACCORDINGTOGENETICDISTANCECLUSTERANALYSISTHERESULTSHOW12MAINLYGATHERTYPES,AND73%GENOTYPICHASSENETICRELATIONSHIPTHEREFORE,THISEXPERIMENTPASSESDRUGSENSAIVITYEXPERIMENT,ANDRAPDTECHNIQUE,STUDIEDHUHHOTAREASTAPHYLOCOCCUSDRUGRESISTANCEANDDIFFERENTGENETICGENE,ANDCOMPARISONWITHDOMESTICANDINTERNATIONALTHEGENOTYPEFOUNDATIONFORRESEARCHOFDRUGRESISTANCEGENEANDBETTERDNAVACCINEKEYWORDSMASTITISCOW,STAPHYLOCOCCUSSUSCEPTIBILITYTESTPATHOGENICITY;RAIDDIRECTEDBYPROFHAOYONGQINGEHDAPPLICANTFORILASTERDEGREEWUTANBATEERD瓠酣婦NNCROBIOLOGYAIIIMALSCIEMCEANDMEDICALCOLLEGE,MONGOLIAAGRICULMMUNIVERSITY,HUHHOT010018,CHINA
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簡介:分類號UDCLLIIII/11/11ULI/I1/11111IY3275108酗11ILKY埸ANGZH愀OUUNIVE蘭碩士學(xué)位論文全日制學(xué)術(shù)學(xué)位學(xué)號叢壘墨豎密級中國荷斯坦奶牛泌乳周期中乳腺脂質(zhì)代謝轉(zhuǎn)錄組分析張少卿申請學(xué)位級別論文提交曰期2Q12生逝旦論文答辯ET期學(xué)位授孚單位塑幽盤堂學(xué)位授予日期2Q縋生魚旦2Q旦答辯委員會主席至金至。鏨塑中國荷斯坦奶牛泌乳周期中乳腺脂質(zhì)代謝轉(zhuǎn)錄調(diào)控分析中國荷斯坦奶牛泌乳周期中乳腺脂質(zhì)代謝轉(zhuǎn)錄組分析摘要奶牛泌乳是一個動態(tài)過程,本研究在跟蹤測定中國荷斯坦奶牛一個完整泌乳周期中乳成分、乳脂肪酸水平的基礎(chǔ)上,在泌乳的特定6個時間段采集乳腺組織,運用轉(zhuǎn)錄組測序和生物信息學(xué)分析技術(shù)篩選差異表達(dá)基因,獲得與乳脂代謝相關(guān)的基因,結(jié)合脂肪酸變化趨勢和規(guī)律探索與脂肪酸代謝相關(guān)基因的表達(dá)模式,旨在進(jìn)一步發(fā)掘泌乳周期中乳脂相關(guān)基因及其調(diào)控機(jī)制。試驗在揚州大學(xué)實驗?zāi)翀鲞M(jìn)行,選擇體況相近、分娩時期相對集中、23胎健康的中國荷斯坦奶牛30頭,在奶牛泌乳的第3、15、45、75、105、135、165、195、225、255、285、315D,每頭每次采集乳樣100ML,立即進(jìn)行乳成分分析,余樣冷凍保存用于脂肪酸提取檢測,分析其脂肪酸的組成及其比例變化。同時選擇體況相近、分娩時間接近士3D的2胎奶牛3頭,微創(chuàng)采集分娩前7D及泌乳30、90、180、270、315D乳腺組織,液氮保存,用于提取RNA,進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析。主要結(jié)果如下1在奶牛整個泌乳過程中,乳脂肪、蛋白和非臘乳固體相對含量變化趨勢相近,其中脂肪含量,在3D時含量最多,并在195D含量出現(xiàn)最低,在泌乳中后期脂肪含量下降。沁乳早期3D和15D乳中蛋白質(zhì)含量極顯著大于其他NTF司段P005,本試驗乳糖含量在第7D時含量最小,至15D時保持相對穩(wěn)定,且其他泌乳各階段無明顯變化特征。通過乳脂中的4種主要的脂肪酸在整個泌乳周期變化趨勢進(jìn)行歸類,主要分為兩大類脂肪酸C140肉蔻酸、C160棕櫚酸脂肪酸與C180硬脂酸、C181油酸脂肪
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簡介:黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)碩士學(xué)位論文泌乳期牛乳腺上皮細(xì)胞增殖的研究姓名鄭煒申請學(xué)位級別碩士專業(yè)基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師孫斌20070401ABSTRACT28HEALTHYMILKCOWSWEREPICKEDOUTANDDIVIDEDINTO6GROUPSINTHERESEARCH,WITHEACHGROUPCORRESPONDINGTOPREGESTATION,8THDAY20THDAY120TH240THDAY300THDAYSCIENCEDELIVERYTHROUGHSURGERYMAMMARYTISSUENEXTTOROOTSEGMENTOFMEMMARYDUCTFROMFIGHTBACKSIDEMAMMARYWASACQUIRED,T|LENUMBEROFPROLIFERATIVEMAMMARYCELLSW私DETECTEDBYFLOWCYTOMCTLYANDMAMMARYTISSUEBYPCNASTAININGATTHESAMETIMECONCENTRATIONVARIATIONOFPROGESTINP,E2ANDPROLACTINPRLBYTICOAGULANTASSAYINTHEBLOODPLASMAMILKINGCURVEWASDRAWNBYSAS82SOFIWAMACCORDINGTOTHEMILKSECRETIONTHERESULTSSHOWNTHAT1LNTHEPEDODOFPREGESTATIONTHEAVERAGENUMBEROFMAMMARYGLANDACINUADECREASEDTO1247ANDTHEAVERAGEDIAMETERDECREASEDTO1703MON8THDAYSINCEDELIVERYTHENUMBERANDDIAMETEROFMAMMARYGLANDACINUSINCREASEDPROMINENTLYPO01∞20THDAYSINCEDELIVERYTHENUMBERANDDIAMETERREACHEDTOTHEMAXIMUMOF3453AND19658LUN,ANDTHERESULTOFFLOWCYTOMETRYASSAYWASIDENTICALOILTHEVARIATIONOFMAMMARYEPITHELIUM,WHICHSHOWEDTHEMINIMUMIS984%ILLⅡLCP甜ODOFPREGESTATIONTHEMAXIMUMWAS5015%ON20THDAYSINCEDELIVERYTHENITDECREASEDGREDUALLYUPTOTHEMINIMUMAFTERMILKING2THEPROLIFERATIONOFMAMMARYEPITHELIALCELLSWASDETECTEDBYPCNA,INTHEPERIODOFPREGESTATIONTHEMAMMARYTISSUEWASQUIESCENTANDTHEPCNAPOSITIVECELLSOFGLANDULAREPITHELIUMREACHEDTO3338%,ON8THDAYSINCEDELIVERYITWAS8755%ANDTHEMWASSIGNIFICANTDIFFERENCECOMPAREDWITHTHOSEINTHEPERIODOFPREGESTATIONP001KEEPINGSTEADYATTHEHIGHLEVELWHILEDECREASEDTO4921%300THDAYSINCEDELIVERY3MILKSECRETIONOFMOSTMILKCOWSREACHEDTOTHEMAXIMUMON20THDAYSINCEDELIVERYANDKEPTSTEADYUNTILLOOTHDAYTHUNDECREASEDGRADUAILYATTHELATESTAGEOFMILKSECRETION4THECONCENTRATIONOFHORMONESVARIED,E2ISHIGHLYCORRELATEDTOPTHEPRLCHROMAWASLOWINTHEPERIODOFPREGESTATIONUNDINCREASEDAFTERDELIVERYON20THDAYSINCEDELIVERYREACHEDTOTHEMAXIMUM,THENDECREASEDGRADUALLYATTHE300THDAYSINCEDELIVERYCONCLUSION1THROUGHTHEVARIATIONOFMAMMARYEPITHELIALCELLSPREANDPOSTDELIVERYITWASFOUNDTHATTHEPROLIFERATIONWASACTIVEPOSTDELIVERYMAMMARYEPITHELIALCELLSOFALVEOLARKEPTHIGHLEVER2DUDNGMILKSECRETION,THEPERCENTAGEOFPCNAPOSITIVECELLSINCREASESANDCELLPROLIFERATIONINDEXDECREASESREPEETIVELYUNDBOTHREACHTOTHEMAXIMUMON20THDAYPOSTPARTUM3THEPRLCHROMAANDMILKSECRETIONTAKEPOSITIVECORRELATION4RELATEDANALYSISOFGRAYSYSTEMSHOWNTHATCELLPROLIFERATIONINDEXWASTHEBIGGESTINFLUENCINGFACTORINALLTHETESTIONKZYWORDLSCOW;GALACTOPHORE;GIVINGMILK;CELLPROLIFERATION;HORMONE
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簡介:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文PTEN、VEGF在犬乳腺腫瘤中的表達(dá)及藥物治療犬乳腺癌動物模型的研究姓名邱昌偉申請學(xué)位級別博士專業(yè)臨床獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師林德貴20070501ABSTRACTMAMMARYBANDTUMORSARETHEMOSTCOMMONNEOPLASMSINFEMALEDOGSITHASBEENREPORTEDTHATTHETUNLORSUPPRESSORGENETHEPHOSPHATASEANDTENSIONHOMOLOGDELETEDP1園MANDTHEVASCULARENDOTHELIALGROWTHFACTORVEGFATEFREQUENTLYMUTATEDORDELETEDINNEOPLASMSINIMMAN塔,HOWEVERITWASREPORTEDVERYLITTLEINVETERINAFYCLINICINORDERTODETERMINEWHETHERCHANGESINEXPRESSIONLEVELOFTHEPTENANDVEGFAREASSOCIATEDWITHMALIGNANTTRANSFORMATIONINMAMMARYBANDTUMORSINDOGS’WEHAVEGSEARCHEDTHEIREXPRESSIONLEVELSIN50CANINEMAMMARYBANDTUMORSBYREALTIMEPOLYMERASECHAINREACTIONANDIMMUNOHISTOCHEMISTRYWEHADCULTUREDACANINEMAMMARYCELLLINENAMEDCMTL211ANDESTABLISHEDCANINEMAMMARYTUMORNUDEMOUSEMODELSBYINJECTMGTAMORCELLSTHEMAINCONTENTASFOLLOWS1THECANINEMAMMARYGLANDBLNLORWELECOLLECTEDFROMJULY2005TOAUGUST2006ATCHINAAGRICULTURALUNIVERSITYTEACHINGANIMALHOSPITALTHESAMPLESCONSISTEDOFFORMALINFIXEDPARAFNNWAXEMBEDDEDTISSUEFROM50TULNOL“3SECTIONSFROMEACHSAMPLEWERESTAINEDWITHHEMATOXYLINANDENSIN,ANDHISTOLOGICALDIAGNOSISWASCARRIEDACCORDINGTOTHEWORLDHEALTHORGANIZATIONCLASSIFICATIONWEDETECTEDPTENANDVEGFMRNAINDIFFERENTTUNLORTISSUESBYREALTIMEPCRTHERESULTSSHOWEDTHATPRRENEXPRESSIONVARIEDNOTOBVIOUSLYBETWEENNORMALMAMMARYTISSUESANDBENIGNMAMMARYTUNLOL瞎儼005PTENGENEEXPRESSIONINMALIGNANTTLNNORSVARIEDOBVIOUSLYCOMPAREDWITHNORMALMAMMARYTISSUESANDBENIGNMAMMARYTUMORSP005,BUTMALIGNANTTUMORSGENEEXPRESSIONLEVELSVARIEDOBVIOUSLYWITHNORMALANDBENIGNMAMMARYTUMOP3P鋤001VEGFMRNALEVELSOFALLSAMPLESANALYZEDWEREMEASTNEDINCANINEMAMMARYTUMORFROM6BITCHESWITHLYREPHNODEMETASTASISWHICHVARIEDSIGNIFICANTLYCOMPAREDTOOTHERCANINEMALIGNANTMAMMARYTMNORP如012THEEXPRESSIONOFPTENANDVEGFWEREDETECTEDBYIMMUNOHISTOCHEMICALSPMETHODINPARAFFINSECTIONANDANALYZEDTHEIRRELATIONSHIPBETWEENTHEPTENANDVEGFOFTHECLINICOPATHOLOGICAIFEATURESOFCANINEMAMMARYGLANDTUMORTHERESULTSSHOWEDTHATIMMUNOHISTOCHEMICALSTAINOFPTENPROTEINWASMAINLYFOUNDINTHECYTOPLASMSOMESAMPLEINTHECELLNUCLEARANDMAMBRANCEEXPRESSIONOFPTENWASNETRELATEDTOAGE、TUMORSIZEPO05,BUTCLOSELYCORRELATEDTOLYMPHNODEMETASTASISP0011MMUNOHISTOCHEMICALSTAINSSHOWSTHATVEGFPROTEINMAINLYEXISTSINTHETUMORCELLANDVASCULARAROUNDTHETUMOREXPRESSIONOFVEGFWASNOTRELATEDTOAGE,TUMORSIZE,BUTCLOSELYCORRELATEDWITHLYMPHNODEMELASTASISAADCLINICALSTAGEP0053ALTERNATIVELYCOLLECTINGACANINEMAMMARYCANCERSAMPLEHADPRIMARYCULTUREANDINITIALIDENTIFICATIONNAMEDCMTL211CANINEMAMMARYGLANDTUMORCMGTLCELLWASIMPLANTEDSUBCUTANEOUSLYTOTHEBACKOFNUDEMICEBYINJECTION110’/NIL04MLRESPECTIVELYTHETUNLORSPECIMENSWERETAKENOUTFORIMMUNOHISTOCHEMICALSTAININGTOOBSENCETHEEXPRESSIONOFVEGEALLLI
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簡介:分類號11111111IIIIIIIIIII學(xué)一U分類D號CY3274114薹ELI級二二M1二45二32祭慫U杰曼碩士學(xué)位論文硒對金黃色葡萄球菌誘導(dǎo)奶牛乳腺上皮細(xì)胞氧化損傷和細(xì)王盾乙杰指導(dǎo)教師姓名至主量』塾筮塹劌盤堂望蒸揚劌2至三QQ窆奎壟基鏨筮揚劌盤堂望蒸塹劌22三QQ坌申請學(xué)位級別亟學(xué)科專業(yè)名稱墮鏖??秣c論文提交口期2Q12生Q壘旦論文答辯日期2QZ生Q魚旦學(xué)位授予單位揚劌盤堂學(xué)位授予日期2QZ生Q魚旦答辯委員會主席堡壟鎏塾撞王胤杰硒對金黃色葡萄球菌誘導(dǎo)奶牛乳腺上皮細(xì)胞氧化損傷和細(xì)胞凋亡的影響研究I硒對金黃色葡萄球菌誘導(dǎo)奶牛乳腺上皮細(xì)胞氧化損傷和細(xì)胞凋亡的影響研究。中又于兩斐奶牛乳腺炎是產(chǎn)后重要的常見疾病之一,其主要以病原菌入侵乳腺組織,并通過宿主逃逸機(jī)制在乳腺組織生存下來,從而進(jìn)一步出現(xiàn)免疫細(xì)胞在乳腺內(nèi)聚積、活性氧自由基FROS蓄積和炎性因子釋放等病理學(xué)特征。該疾病每年對奶牛養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。硒SE是動物機(jī)體所必須的微量元素,其主要以硒蛋白的形式存在于機(jī)體內(nèi),發(fā)揮著抗氧化、抗炎、免疫調(diào)節(jié)和參與新陳代謝的生理功能。本實驗室的前期研究發(fā)現(xiàn)硒可以提高哺乳期大鼠的免疫能力,提高抗氧化酶活性,抑制炎癥反應(yīng),減輕炎癥反應(yīng)對機(jī)體造成的損傷。因此,本實驗通過體外研究硒的抗氧化作用以及硒對凋亡相關(guān)通路蛋白的影響,為防治乳腺炎提供理論依據(jù)。實驗用金黃色葡萄球菌按照MOII1的比例接種奶牛乳腺上皮細(xì)胞BMECS,作用0、1、2、4、6、8、10、12和24H,用CCK8法檢測金黃色葡萄球菌對奶牛乳腺上皮細(xì)胞活力的影響,用LDH檢測試劑盒觀察金黃色葡萄球菌對奶牛乳腺上皮細(xì)胞造成的損傷作用,用流式細(xì)胞術(shù)觀察金黃色葡萄球菌對奶牛乳腺上皮細(xì)胞ROS水平的影響。結(jié)果顯示接種金黃色葡萄球菌后,隨著時間的推移,奶牛乳腺上皮細(xì)胞活力顯著下降,感染6、8和10H后,活力僅為80%、783%和773%;但LDH的活性逐漸提高,并在6H后極顯著增3DPO01或P0001;流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示,從4H開始,奶牛乳腺上皮細(xì)胞內(nèi)ROS水平顯著提高P005,當(dāng)侵襲8H時,ROS水平達(dá)到峰值,8H以后ROS水平顯著下降∞0OS。所以,采用MOII1的比例接種金黃色葡萄球菌侵襲奶牛乳腺上皮細(xì)胞6、8、10H造成了細(xì)胞的氧化損傷,確定了氧化損傷模型的處理時間。為研究硒在細(xì)胞抗氧化反應(yīng)過程中對相關(guān)氧化因子的影響,在培養(yǎng)基中添加不同濃度的硒2、4和899,檢測硒對金黃色葡萄球菌誘導(dǎo)的奶牛乳腺上皮細(xì)胞SOD、CAT、GSHPX、COX2和INOSMRNA的表達(dá)影響,TAOC、SOD、CAT、GSHPX活性的影響和MDA含量影響。結(jié)果顯示,與對照組相比,金黃色葡萄球菌感染乳腺上皮細(xì)胞后,SOD、CAT和GSHPX的MRNA表達(dá)均無顯著變化。與金黃色葡萄球菌感染組,感染6H后,4、8TTM的硒能顯著或極顯著的上調(diào)SOD的MRNA表達(dá)函005或P0001,2、49M的硒能顯著或極顯著的上調(diào)CAT和GSHPX的MRNA表達(dá)⑦005或P0001;感染8H后,81TM的硒能極顯著的上調(diào)SOD和CAT的MRNA表達(dá),2、89M的硒能極顯著的上調(diào)GSHPX的MRNA表達(dá)∞O01或P0001。在感染后6、8和10H,與對照組相比,金黃色葡萄球菌極顯著提高COX2和INOS的MRNA表達(dá)⑦0001。金黃色葡萄球菌感染感染6H后,硒能極顯著抑制這一反應(yīng)∞O001;感染8H后,49M的硒能極顯著抑制COX一2的MRNA
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簡介:9ILLLLIILLIIIIILLILLLY3280401分類號墨墨曼密級公2單位代碼Q三三三學(xué)號21壘12QQ魚洳≥J、嗜碩士學(xué)位論文⑧論文中文題目握生塾躔上座細(xì)胞戇氫酸哩蝗丞岱逝扭圭4丑宜論文英文題目THEMECHANISMOFLYSINEUPTAKE.ANDMETABOLISMINBOVINEMAMMARY,.EPITHELIALCELLS.作者姓名林秀娟指導(dǎo)教師劉紅云副教授專業(yè)名稱動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)研究方向奶牛泌乳生理所在學(xué)院動物科學(xué)學(xué)院提交日期二零一七年一月中國杭州I奶牛乳腺上皮細(xì)胞賴氨酸吸收及代謝機(jī)制研究⑧論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名論文評閱人L評閱人2評閱人3評閱人4評閱人5秭雹躪鉚仍答辯委員會主席湮叢真熬拯委員1湮噠真熬援委員2左維逸熬援委員3昱題明麴援委員.O王焦壟熬援委員5塞』紅云副熬援
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簡介:U分類D號C』J丫L13LL217LLLF4LLL掣掣型J埸H1大譬學(xué)號ML4530密級YANGZHOUUNIVERSITY碩士學(xué)位論文學(xué)術(shù)型硒抗肽聚糖誘導(dǎo)的奶牛乳腺上皮細(xì)胞炎癥損傷作用及其TLR2/NOD2信號通路的研究孫琚指導(dǎo)教師姓名奎壟墊絲撞塹劌盤堂,姿蒸揚劌,22QQ里至主雖』塹蕉揚劌盤堂婆蒸塹劌2至三QQ旦中請學(xué)位級別論文提交口期學(xué)位授予單位亟2QZ生壘旦揚州大學(xué)答辯委員會主席侯加法教授學(xué)科專業(yè)名稱一墮鏖簦匡堂論文答辯口期2QZ生魚旦學(xué)位授予日期2QZ生魚旦2017年6月硒抗肽聚糖誘導(dǎo)的奶牛乳腺上皮細(xì)胞炎癥損傷作用及其相關(guān)信號通路的研究硒抗肽聚糖誘導(dǎo)的奶牛乳腺上皮細(xì)胞炎癥損傷作用及其TLR2/NOD2信號通路的研究中文摘要一奶牛乳腺炎是奶牛產(chǎn)后重要疾病之一,會造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。乳腺炎不局限于細(xì)菌感染,其特征在于白細(xì)胞和血清蛋白從血液轉(zhuǎn)移到感染部位的運動。硒是哺乳動物飲食中的必需營養(yǎng)物質(zhì),具有一些抗炎性質(zhì)。硒以硒蛋白的形式存在于機(jī)體中,并主要通過其抗氧化作用參與到機(jī)體的免疫防御機(jī)制中。多項研究已證實,飼喂添加適量的硒的飼料,可以最大限度地降低動物群體中乳腺炎,白肌病以及呼吸系統(tǒng)方面的疾病的發(fā)病率。肽聚糖PGN是金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)上的主要成分,有研究表明金葡菌的肽聚糖可以刺激宿主細(xì)胞上相關(guān)病原識別受體,激活炎癥信號通路。因此,本論文從分子學(xué)的角度研究了硒的抗炎作用以及硒對相關(guān)炎癥信號通路的影響,為乳腺炎未來的防控發(fā)展提供了理論依據(jù)。金黃色葡萄球菌是臨床上奶牛乳腺炎最重要的致病菌之一,通過研究其一種致病因子來探索其致病機(jī)理以及機(jī)體對其反應(yīng)機(jī)制,這對奶牛乳腺炎的防治具有重要的現(xiàn)實意義。我們通過膠原酶完全消化法體外培養(yǎng)了一批奶牛乳腺上皮原代細(xì)胞,用PGN侵染細(xì)胞構(gòu)建了奶牛乳腺上皮細(xì)胞BMEC炎癥模型,檢測在PGN刺激下其細(xì)胞因子表達(dá)的變化。實驗結(jié)果表明,乳腺上皮細(xì)胞在匯合之前呈典型的島嶼狀集落生長,匯合之后的細(xì)胞形態(tài)具有典型的鋪路石樣、導(dǎo)管樣結(jié)構(gòu)的特點,一直培養(yǎng)下去會形成穹窿樣結(jié)構(gòu)。為了探索硒濃度對奶牛乳腺上皮細(xì)胞活性的影響,我們選擇不同濃度0、1、2、4、8、16、32和64KTM的硒處理奶牛乳腺上皮細(xì)胞12H后,利用MTT法對活細(xì)胞特有的反應(yīng)檢測細(xì)胞存活率。結(jié)果表明,在0~16LAM范圍內(nèi)的硒濃度對細(xì)胞活性影響不大,16GM以上隨著硒濃度的增加,乳腺上皮細(xì)胞的存活率逐漸下降,且在32GM和64GM的硒濃度時細(xì)胞活性與對照組相比出現(xiàn)極顯著下降P0001,這說明高濃度的硒對乳腺上皮細(xì)胞具有損傷作用。為研究硒在PGN誘導(dǎo)的BMECS的炎癥反應(yīng)中對TLR2和NOD2信號通路的影響。不同濃度的硒2、4和8GM添加在培養(yǎng)液中,檢測硒對TLR2、NOD2/NFRD3、MAPK信號
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簡介:燃淵盔徒謄案笑學(xué)A●HUIAGRICUITURELUNIVERSITY專業(yè)碩士學(xué)位論文PDL1、GLUTL在犬乳腺腫瘤中的表達(dá)PDL1、GLUTLEXPRESSIONINCANINEMAMMARYTUMORS2017年5月』JJJJJ舢舢胂刪刪㈣刪刪Y3293773獨創(chuàng)性聲明~~?~本人聲明所呈交的論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名虛數(shù)迸~時間矽I7年期叩日關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。田≤}侖文不保密??诒菊撐谋C?,在址年解密后適用本授權(quán)。請在以上口內(nèi)劃“√”研究生簽名虛盈絲時間勿J1年歲月巧日第一導(dǎo)師簽名時間卅7年,月可日
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簡介:學(xué)校代碼10225學(xué)號S13166學(xué)位論文轉(zhuǎn)TEMPORINGFP融合基因的山羊乳腺上皮細(xì)胞株的篩選指導(dǎo)教師姓名申請學(xué)位級別論文提交日期授予學(xué)位單位張志崇安鐵洙教授碩士2013年4月東北林業(yè)大學(xué)東北林業(yè)大學(xué)學(xué)科專業(yè)發(fā)育生物學(xué)論文答辯日期2013年6月授予學(xué)位日期2013年6月答辯委員會主席論文評閱人春必張素大學(xué)摘要摘要抗菌肽ANTIMICROBIALPEPTIDESABP作為一種廣泛存在于生物界僅需2060個氨基酸組成的小分子活性肽,在抗細(xì)菌和真菌以及病原蟲、病毒或腫瘤細(xì)胞方面都有明顯的作用。為了建立大量獲取抗菌肽ANTIMICROBIALPEPTIDESABP的簡便有效方法,本研究采用分子生物學(xué)等方法,構(gòu)建了可以表達(dá)抗菌“LIEMPORIN與GFP融合蛋白的乳腺特異性表達(dá)載體,并將其轉(zhuǎn)染到奶山羊乳腺上皮細(xì)胞中后,通過G418藥物篩選出含有NEO抗性基因的轉(zhuǎn)TEMGFP基因陽性細(xì)胞,并篩選獲得基因組中整合有中國林蛙抗菌肽基因的奶山羊乳腺上皮細(xì)胞。本研究迸一步利用該細(xì)胞株通過體細(xì)胞核移植的方法獲得乳腺特異表達(dá)抗菌肽的轉(zhuǎn)基因山羊的相關(guān)研究提供了科學(xué)依據(jù)。研究結(jié)果與結(jié)論如下1、中國林蛙皮膚抗菌肽基因的克隆根據(jù)GENBANK中的中國林蛙皮膚抗菌肽基因MRNA序列EU624139設(shè)計引物CEAL和2CEA,以提取的中國林蛙皮膚總RNA為模板,進(jìn)行RTPCR擴(kuò)增出中國林蛙皮膚抗菌肽的CDNA。將TEMPORIN的PCR產(chǎn)物與PEASYT3載體連接,構(gòu)建出T3TEM2CEA克隆載體。2、乳腺特異表達(dá)載體的構(gòu)建以T3TEM2CEA為模板利用引物CEA3引入XBAL酶切位點,PCR擴(kuò)增后連入PEASYT3載體中構(gòu)建T3TEMCFA3。再利用酶切、連接等分子克隆手段,將GFP片段插入T3TEMCEA3載體后,構(gòu)建T3一TEMGFP載體。利用XHOI與SAIL將TEMGFP片段切下,與XHOI線性化的PBCL相連接,連接方向鑒定正確后,即成功構(gòu)建出含有抗菌肽以及3FP融合基因的PBCL乳腺特異表達(dá)載體。3、轉(zhuǎn)抗茵肽融合蛋白基因的山羊乳腺上皮細(xì)胞的篩選與培養(yǎng)采用陽離子脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染線性化的重組乳腺特異性表達(dá)載體到奶山羊乳腺上皮細(xì)胞中,利用G418篩選獲得具有NEO抗性基因的陽性細(xì)胞。4、對陽性細(xì)胞的鑒定將獲得的陽性細(xì)胞富集后提取細(xì)胞基因組,PCR結(jié)果表明目的基因已經(jīng)整合到細(xì)胞基因組中,并對陽性細(xì)胞株進(jìn)行相應(yīng)的細(xì)胞生物檢測,其中包括將篩選后的陽性細(xì)胞測定細(xì)胞生長曲線、經(jīng)過冷凍復(fù)蘇處理后的生長狀態(tài)及生長曲線測定、核型分析等,結(jié)果均顯示轉(zhuǎn)染后細(xì)胞狀態(tài)無異常。綜上所述,采用上述方法,成功獲得轉(zhuǎn)TEMGFP融合基因的奶山羊乳腺上皮細(xì)胞株。關(guān)鍵詞TEMPORIN1CEA;載體構(gòu)建;奶山羊;乳腺上皮細(xì)胞;轉(zhuǎn)基因細(xì)胞株
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簡介:浙江大學(xué)博士學(xué)位論文基于紙片保存奶樣的奶牛隱性乳腺炎診斷技術(shù)研究姓名吳舊生申請學(xué)位級別博士專業(yè)微生物學(xué)指導(dǎo)教師周繼勇胡松華20070601基于紙片保存奶樣的奶牛隱性乳腺炎診斷技術(shù)研究圖72紙片保存樣品中無乳鏈球菌PCR檢測的敏感性試驗圖73顯示不同保存條件對紙片保存奶樣中無乳鏈球菌檢出的影響9L9L圖74紙片保存奶樣無乳鏈球菌PCR檢測的ROC曲線93圖81SAISRL對紙片保存樣品PCR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果99圖82SAISR2對紙片保存樣品PCR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果100圖83PAGE顯示SAISR2對紙片保存樣品中金黃色葡萄球菌PER檢測結(jié)果100圖84PAGE顯示SAISR2紙片保存樣品中金葡菌PCR檢測結(jié)果及靈敏度試驗101圖85基于紙片保存奶樣金黃色葡萄球菌PCR檢測的ROC曲線103圖91SDSPAGE電泳分離紙片保存奶樣中的蛋白圉92HMT、SCC和SDPAGE電泳法對隱性乳腺炎診斷準(zhǔn)確性比較,110第LI頁共136頁
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簡介:Y1132695E;』ⅡL镕日△L⑧西北農(nóng)林香茯大學(xué)2007屆攻讀碩士學(xué)位研究生學(xué)位畢業(yè)論文人溶菌酶乳腺生物反應(yīng)器的初步研究學(xué)科專業(yè)研究方向研究生指導(dǎo)教師完成時間蝤壓置匡芏弛塑廷艟王捏囂勤鹽韭鍾茲援三QQ土生盔臼P崮陜目楊陵P(guān)RIA嗄ARYSTUDIESONT既AND江AI,MAOIARYGLANDBIOREACTORFORHUMANIJYSOZYNⅡJHUMANLYSOZYMECNLYZHYDROLYZESTHEGLYCOSIDICBL,4LINKAGEBE協(xié)嘲MNACETYIMURAMICACIDANDNACETYLGLUEOSAMIUEOFTHEPEPFIDOGLYC{MPOLYMERINTHEBACTERIALCELLWALL.BECAUSEOFTHEDIRECTEXPOSUREOFPOLYPEPTIDOGLYCANONTHEOUTSIDEOFTHECELLWALL,HLYZCANDIRECTLYLYZEGRAMPOSITIVEBACTERIAANDINDIRECTLYLYZEGRAMNEGATIVEBACTERIAINTHEPRESENCEOFSIGAORCOMPLEMENTS.FURTHERMORE,HLYZHASMANYOTHERACTIVITIESSUCHASDIMINISHINGINFLAMMATION,DETNMESCCNEE,REPAIRINGPUTRESCENCETISSUES,IMPROVINGBLOODSUPPLYINLOCALTISSUES,REDUCINGPUSANDANTIVIRUS.SOITHASWIDEAPPLICATIONINMEDICINEANDFOODSTUFFINDUSTRY.TOPREVENT,TRENTDAIRYCOWMASTITISANDIMPROVEDAIRYCOWANTIDISEASE,THEEXPRESSIONOFHUMANLYSOZYMEINTHECOWMAMMARYGLANDISIMPROVEDBYTRANSGENICDAIRYOOW.DAIRYCOWMASTITISWILLBEDECREASED.INTHISRESEARCH,THE5’REGULATIONREGIONOFBOVINELBLACTOGLOBULINWASCLONEDBYPCR.WEUSEDTHECLONED5’REGULATIONREGIONOFBOVINEL3一LACTOGLOBULINASPROMOTERANDMODIFIEDHUMANLYSOZYMECDNAASTHETARGETGENETOCONSTRUCTMAMMARYGLANDSPECIFICEXPRESSIONALVECTORPBELOFHUMANLYSOZYMEGENE.INORDERTOSTUDYTHERATIONALITYOFEXPRESSIONVECTOR,THEVECTORWASWANSFECTEDINTOMAMMARYEPITHELIALCELLSCULTUREDINVITROBYMEANSOFELECTROPORATION.POSTIVECELLSWERESELECTEDANDPURIFIEDBYG418.SOTHECELLSCANBEUSEDASSOULPⅪSTOCREATETRANSGENICANIMALBYNUCLEARTRANSPLANTTECHNIQUES.THERESULTSOFRESEARCHAREFOLLOWING1THE5’REGULATIONREGIONOFBOVIUEPLAETOGLOBULINWASCLONEDBYPCR,INCLUDINGOFPARTIALUPSTREAMREGION,THEFIRSTEXONANDTHEFIRSTINTRONABOUT993BPIN5ANTRANSLATEDREGION.ARERPCRPRODUCTWASRECOVEREDANDPURIFIED,THEAIMFRAGMENTWASCLONEDATTSITEOFPMD18TVECTOR.ITWASCOMPAREDWITHBOSTAURUSBLGVARIANTBPRECURSORGENE,BOSTAURUSBLGGENEVARIANTBANDB.TAURUSBETALACTOGLOBULINGENE.THERESULTSOFSEQUENCEANALYSISINDICATEDTHEHOMOLOGYWCL“E99%,99%AND98%RESPECTIVELY.COMPUTERBIOSOFIWIREANALYSISDEMONSTRATEDTHATTHECLONEDFRAGMENTINCLUDEDSOMERESPONSEREGULATORYELEMENTSANDSITESBOUNDBYEXPRESSIONWHICHDIRECTFOREIGNGENESTOEXPRESSSPECIFICALLYINMAMMARYGLANDEPITHELIACELLSATAHIGHLEVEL.SOITCOULDBEUSEDTOCONSTRUCTMANHNARYGLANDSPECIFICEXPRESSIONVECTOR.
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簡介:CLASSIFIEDINDEXCONFIDENTIALYES/NO110CODE10224NO130610437DISSERTATIONFORTHEMASTERDEGREEEFFECTOFGENEABCG2ONTRANSPORTOFAFLATOXINM1INDAIRYCAWMAMMARYEPITHELIALCELLSCANDIDATECHENDANSUPERVISORPROFLIQINGZHANGDEGREECATEGORYMASTEROFAGRICUTURECOLLEGECOLLEGEOFVETERINARYMEDICINEFIRSTLEVELDISCIPLINEVETERINARYMEDICINESECONDLEVELDISCIPLINEBASICVETERINARYMEDICINEHARBINJUNECHINA2016東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)碩士學(xué)位論文32奶牛血乳屏障體外的構(gòu)建與鑒定21321倒置顯微鏡下觀察奶牛乳腺上皮細(xì)胞21322掃描電鏡下觀察奶牛乳腺上皮細(xì)胞一21323免疫熒光染色檢測緊密連接蛋白ZO12233AFML對奶牛乳腺上皮細(xì)胞中轉(zhuǎn)運蛋白表達(dá)的影響22331AFML的劑量關(guān)系22332AFML的時間關(guān)系。23333AFML對ABCBL和ABCG2蛋白表達(dá)水平的影響23334AFML對B酪蛋白的蛋白表達(dá)水平的影響24335AFML對奶牛乳腺上皮細(xì)胞細(xì)胞增殖的影響2534ABCG2基因過表達(dá)的實驗結(jié)果26341去內(nèi)毒素質(zhì)粒的雙酶切法驗證26342最佳轉(zhuǎn)染時間的篩選27343ABCG2基因過表達(dá)轉(zhuǎn)染效率的檢測27344ABCG2基因過表達(dá)對奶牛乳腺上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)運AFML的影響28345ABCG2基因過表達(dá)對奶牛乳腺上皮細(xì)胞泌乳功能的影響31346ABCG2基因過表達(dá)對奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖作用的影響3135ABCG2基因抑制的實驗結(jié)果32351ABCG2SIRNA最佳干擾片段和最佳干擾時間。32352干擾效率的檢測33353ABCG2基因抑制對奶牛乳腺上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)運AFML的影響34354ABCG2基因抑制對奶牛乳腺上皮細(xì)胞泌乳功能的影響37355ABCG2基因抑制對奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖作用的影響374討論3941奶牛血乳屏障的建立與鑒定3942AFML對奶牛乳腺上皮細(xì)胞中轉(zhuǎn)運蛋白的影響4043ABCG2基因過表達(dá)與抑制對AFML在奶牛乳腺上皮細(xì)胞中轉(zhuǎn)運的影響405結(jié)論42至殳謝43參考文獻(xiàn)44附錄53攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文54Ⅱ
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簡介:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文葛根素對去卵巢小鼠乳腺及子宮發(fā)育的影響姓名烏英嘎申請學(xué)位級別碩士專業(yè)臨床獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師巴音吉日嘎拉20080501卵巢小鼠血清激素水平的影響基本一致,但葛根素對雌激素的主要靶器官一乳腺、子宮的作用不明顯葛根素具有一定的動物保健作用,催乳作用不顯著。本實驗為無副作用的純天然雌激素替代藥物或動物保健藥物的開發(fā)、應(yīng)用提供實驗依據(jù)。關(guān)鍵詞葛根素去卵巢;乳腺;子宮雌二醇;孕酮;生長激素催乳素
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簡介:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文奶牛乳腺炎主要病原菌快速診斷及金葡菌Α溶血素的原核表達(dá)姓名張善瑞申請學(xué)位級別碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師趙宏坤20070509關(guān)于學(xué)位論文原創(chuàng)性和使用授權(quán)的聲明本人所呈交的學(xué)位論文,是在導(dǎo)師指導(dǎo)下,獨立進(jìn)行科學(xué)研究所取得的成果。對在論文研究期間給予指導(dǎo)、幫助和做出重要貢獻(xiàn)的個人或集體,均在文中明確說明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。本人完全了解山東農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留和按要求向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文紙質(zhì)本和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)山東農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。論文作者簽名遴砩導(dǎo)師簽名;埠,膨嬸,L’『日期皿亞I
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