低氧預(yù)處理對全腦缺血大鼠腦內(nèi)CPKC和CPKCA蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　低氧預(yù)處理的大鼠全腦缺血模型，觀察低氧預(yù)處理對后續(xù)更嚴(yán)重腦缺血的影響，從而進(jìn)一步指導(dǎo)臨床用藥。
　　方法：
　　30只Wistar雄性大鼠，體重在250-300克，隨機(jī)分為五組，分成正常對照組(n=6)和低氧處理組(n=6)，缺血再灌注組，缺血10min＋再灌注7天組(n=6)（觀察海馬神經(jīng)元）缺血20min＋再灌注1天組：(n=6)（觀察紋狀體大的無棘神經(jīng)元）；及低氧預(yù)處理＋缺血再灌注組(n=6)，低氧處

2、理組模型：密閉箱內(nèi)連續(xù)通入8％O2＋92％N2混合氣體1小時(shí)；全腦缺血模型的制備：10％水合氯醛（350mg/kg Wt）腹腔注射麻醉。頸部正中切口，分離兩側(cè)頸總動(dòng)脈約1cm，將缺血裝置套上頸總動(dòng)脈，避免血管受壓和血流受阻，簡易縫合切口。將大鼠固定于定位儀上，枕部橫切口，暴露第一頸椎板及橫突板上的翼小孔，用雙極電凝針電凝雙側(cè)翼小孔內(nèi)的椎動(dòng)脈，縫合切口后待動(dòng)物完全蘇醒，將其移至籠內(nèi)飼養(yǎng)，夜間禁食，此時(shí)動(dòng)物行為正常，沒有明顯的腦損傷。24h

3、后在大鼠完全清醒的狀態(tài)下，夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈10min或20min，造成短暫的全腦缺血。大鼠在缺血開始后30～60s內(nèi)昏迷，翻正反射消失，能自主呼吸，雙側(cè)瞳孔放大，痛覺反射消失，這些癥狀持續(xù)于整個(gè)缺血過程中，凡未出現(xiàn)以上癥狀或這些癥狀未能持續(xù)整個(gè)缺血過程中的大鼠棄用。缺血10min或20min后解除夾閉的缺血裝置，恢復(fù)腦血流，動(dòng)物即逐漸恢復(fù)知覺開始活動(dòng)，未見明顯障礙，凡缺血后有癲癇、偏癱、驚厥等癥狀的大鼠均棄用。24h后利用免疫組化的方法