ABCG2在肺癌中的表達及其對肺癌細胞生物學行為的影響.pdf

1、南方醫(yī)科大學博士學位論文ABCG2在肺癌中的表達及其對肺癌細胞生物學行為的影響姓名：牛海艷申請學位級別：博士專業(yè)：病理學與病理生理學指導教師：申洪20080415中文摘要胞。目前認為A B C G 2 就是S P 細胞的表型標志，是潛在的干細胞標志物。因此，A B C G 2 既是一個新的耐藥基因，又和S P 細胞、腫瘤干細胞密切相關，研究其在肺癌中的表達，分析其與臨床病理特征的關系，揭示其對肺癌細胞基本生物學特性的影響，有助于深入研究

2、A B C G 2 與肺癌的關系，可能會為肺癌的發(fā)生和防治提供新策略。方法1 ．A B C G 2 在肺癌中表達的定量研究( 1 ) 應用免疫組化( S P 法) 觀察了8 6 例肺癌( 鱗癌4 2 例、腺癌3 1 例、大細胞癌5 例，小細胞癌8 例，其中伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者3 3 例) 和2 4 例癌周肺組織( 距腫物5 c m ) A B C G 2 蛋白的表達：( 2 ) 應用原位雜交觀察了8 6 例肺癌組織中( 鱗癌4 2 例、腺癌3

3、 1 例、大細胞癌5 例，小細胞癌8 例) A B C G 2 m R N A 的表達：( 3 ) 應用顯微圖像定量分析，測試靶細胞A B C G 2 蛋白及m R N A 表達的陽性單位( P U ) 值。2 ．A B C G 2 基因沉默對肺癌細胞體外生物學特性的影響( I ) 在倒置顯微鏡下觀察肺腺癌細胞G L C ．8 2 和A 5 4 9 的形態(tài)學特點；應用H E 細胞爬片和組織切片比較二者形態(tài)異同；應用免疫細胞化學、細胞原位

4、雜交、R T - 熒光定量P C R 、w e s t e r n —b l o t 和H o e c h s t 3 3 3 4 2 染色比較G L C ．8 2 和A 5 4 9 中A B C G 2 基因表達程度。( 2 ) 應用基因轉(zhuǎn)染方法，將含有不同片段的4 個干擾質(zhì)粒、一個陽性對照質(zhì)粒和一個陰性對照質(zhì)粒，通過脂質(zhì)體分別轉(zhuǎn)入G L C ．8 2 ，用G 4 1 8 反復篩選純化克隆。用R T - P C R 法鑒定陽性對照中G