硝苯地平膠體金試紙條的研制.pdf

1、隨著改革開(kāi)放的不斷深入，國(guó)民經(jīng)濟(jì)高速增長(zhǎng)，我國(guó)食品藥品行業(yè)迎來(lái)了前所未有的快速發(fā)展。然而近幾年，一些商家通過(guò)在食品或者保健食品中加入藥物成分，從而使產(chǎn)品獲得本身不具備的功效，以此獲取暴利。本文針對(duì)食品藥品中非法添加硝苯地平的行為，研發(fā)可檢測(cè)硝苯地平的膠體金層析試紙條，為食藥監(jiān)管部門日常基層監(jiān)管工作提供幫助。
　　首先，采用活潑酯法制備硝苯地平人工抗原，通過(guò)紫外光譜法對(duì)人工抗原進(jìn)行初步鑒定，結(jié)果表明人工抗原偶聯(lián)成功。
　　其次

2、，通過(guò)動(dòng)物免疫試驗(yàn)制備硝苯地平單克隆抗體，建立ELISA法對(duì)單克隆抗體的效價(jià)和特異性進(jìn)行了測(cè)定，單克隆抗體腹水效價(jià)為l:5×l04～l:2×l05，抗體（J5F4）對(duì)硝苯地平的IC50為225.3ng/ml，同尼群地平、尼莫地平的交叉反應(yīng)率分別為9.57％和6.30%，得到的抗體特異性較好。
　　最后，通過(guò)制備純化金標(biāo)抗體、組裝試紙條，確定影響每個(gè)步驟的因素參數(shù)，獲得制備膠體金層析試紙條的最佳條件，制備的膠體金粒徑為20～40nm

3、，單抗的最佳標(biāo)記量為5.0μg/ml，單抗標(biāo)記最佳的pH為9.0，抗原的最佳包被量為7.0μl，二抗的最佳包被量為9.0μl，膠體金標(biāo)記抗體量為5.0μl，膠體金免疫層析試紙條的目測(cè)檢測(cè)限為1.0mg/L。
　　經(jīng)驗(yàn)證，所研發(fā)的硝苯地平試紙條的重復(fù)性、穩(wěn)定性、假陽(yáng)性及假陰性率也均符合要求。
　　本研究研發(fā)出硝苯地平膠體金免疫層析試紙條，并確定制備膠體金層析試紙條的最佳條件，為檢測(cè)硝苯地平提供了一種省時(shí)、高效、操作簡(jiǎn)單的檢測(cè)方