氰戊菊酯殘留膠體金免疫層析試紙條的研制.pdf

1、本文利用膠體金標(biāo)記快速檢測技術(shù)，開展了氰戊菊酯農(nóng)藥殘留快速檢測方法研究。通過優(yōu)化各項試驗參數(shù)，以氰戊菊酯農(nóng)藥與包被在硝酸纖維素膜上的氰戊菊酯人工合成抗原競爭結(jié)合膠體金標(biāo)記的氰戊菊酯單克隆抗體，通過膠體金顯色條帶的顏色深淺來區(qū)分氰戊菊酯農(nóng)藥的殘留量，達(dá)到快速檢測樣品中氰戊菊酯殘留的目的，試驗建立氰戊菊酯殘留膠體金免疫層析技術(shù)，研發(fā)出膠體金免疫試紙條。
　　 采用檸檬酸三鈉還原法，制備出粒直徑為10nm的膠體金，以制備的膠體金作為標(biāo)

2、記物標(biāo)記氰戊菊酯單克隆抗體，試驗選擇出最佳標(biāo)記的pH值為6.0，最佳標(biāo)記量為1mL膠體金標(biāo)記氰戊菊酯單克隆抗體為22μ g。選用Millipore135的NC膜作為固相載體，將氰戊菊酯人工抗原包被在檢測線(T線)處，兔抗鼠IgG多克隆抗體包被在質(zhì)控線(C線)處。快速檢測試紙條100％抑制濃度為250ng/mL(檢測線為無色)。
　　 試驗研究了幾種氰戊菊酯的結(jié)構(gòu)類似物對試紙條快速檢測的干擾。試驗結(jié)果表明：氯氰菊酯、胺菊酯、聯(lián)苯菊

3、酯、溴氰菊酯、氯菊酯對所研制的試紙條都沒有交叉反應(yīng)。穩(wěn)定性試驗證明了所制備的試紙條在4攝氏度條件下2年內(nèi)可保持檢測結(jié)果的可靠性。
　　 以甲醇為提取溶解，對油菜、菜薹、小白菜、青椒等樣品進(jìn)行了添加回收試驗，并通過高效氣相色譜測定方法驗證了試紙條檢測方法的有效性。結(jié)果表明該方法的回收率為84％-98％，變異系數(shù)均小于10％，可用于實際樣品中氰戊菊酯殘留的快速檢測。
　　 該試紙條檢測方法無需特殊的檢測儀器、操作簡單、價格便