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1、本文以產(chǎn)PHAs極端嗜鹽桿菌(Halobacteriumsp)XMQ19為供試菌株,進(jìn)行了高密度發(fā)酵工藝的研究,包括:出發(fā)菌株的選育、培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的優(yōu)化、搖瓶發(fā)酵補料工藝和16L發(fā)酵灌補料工藝的探討。 采用尼羅藍(lán)對原始菌株進(jìn)行了篩選,獲得8#菌株作為出發(fā)菌株,經(jīng)搖瓶發(fā)酵,其生物量、PHA量和PHA生產(chǎn)力分別為12g/L、3.96g/L、0.055g/L/h。 通過培養(yǎng)基優(yōu)化和加倍試驗,獲得一個理想的培養(yǎng)基配方:淀粉4
2、%,氯化銨0.2%,酵母提取物為0.4%,硫酸鎂2%,氯化鉀0.2%,磷酸二鉀,0.00375%,氯化鈉16%,tracemetalsolution0.5ml/L,pH7.0。與原配方相比生物量和PHA量提高了19.6%和3.5%。 經(jīng)過優(yōu)化后的發(fā)酵條件為:種子在48小時接種,500ml搖瓶裝液量80ml,培養(yǎng)基初始pH在6.5-7.5,接種量在10%和消泡劑加入量不超過4mL/L。 進(jìn)行搖瓶補料工藝試驗,以淀粉1%,氯
3、化銨0.05%,YE0.05%,硫酸鎂2%,氯化鉀0.2%,磷酸二鉀,0.00375%,氯化鈉16%為初始培養(yǎng)基。淀粉補料開始時間為發(fā)酵20-70h,氯化銨補料開始時間為發(fā)酵5-40h,淀粉的補料速率為1ml/h,補氮速率為0.2ml/h。 通過間歇補料和指數(shù)流加補料的試驗,發(fā)現(xiàn)指數(shù)流加補料較適合該菌的發(fā)酵培養(yǎng)。其發(fā)酵生物量、PHA量、PHA百分含量、細(xì)胞比生長速率以及PHA生產(chǎn)力分別為44.8g/L,19.Sg/L,44%,0
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