固態(tài)發(fā)酵產酶及DL-色氨酸的拆分.pdf

1、該論文對米曲氨基?；傅牟鸱种苽銵-色氨酸進行了優(yōu)化研究:包括固態(tài)發(fā)酵產米曲酶的優(yōu)化研究,米曲氨基?；傅姆蛛x純化及其酶學性質研究,以及氨基?；傅墓潭ɑ芯?對于固態(tài)發(fā)酵制備氨基?；?對制曲條件和固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基的組成進行了研究:最佳發(fā)酵培養(yǎng)基組成基質原料比為8:2,水活度為0.7,最佳產酶時間為48h.添加誘導物基本上沒有作用.復合促進劑中吐溫-80和植酸同時存在時米曲霉3042的激活作用大幅度提高.添加復合促進劑后,固態(tài)發(fā)酵米曲霉

2、產氨基?；傅拿富钸_到最高值的時間為35-40h,可以比不加促進劑的時間縮短了5-10h;且拆分N-乙酰-DL-色氨酸的酶活也提高171.94％.對米曲氨基?；傅募兓芯?嘗試了硫酸銨鹽析分級沉淀、疏水層析、凝膠電泳等一系列粗分級和細分級的純化方法,并對米曲氨在酰化酶的酶學性質進行了探討.用硫酸銨分級沉淀,40％飽和度去除大部分雜蛋白,60％飽和度時沉淀下來的大部分是所需要的酶,鹽析純化倍數可達6倍.粗酶液經疏水層析柱后,純化倍數可達

3、28倍.SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)測定氨基酰化酶亞基分子量,凝膠電泳2條帶,第一條帶的分子量為55,200Da第二條帶的分子最為31,000Da.研究了氨基?；傅亩喾N包埋方法,嘗試了合成樹脂共價交聯法固定化米曲氨基?；?用不覆膜,單次覆膜和兩次覆膜的固定化酶進行批次拆分實驗比較,兩次覆膜改性海藻酸鈣凝膠包埋固定化氨基?；感Ч詈?能反應20個批次.合成樹脂柔性鏈共價交聯固定化酶的實驗,柔性鏈越長固定化效果越好.