神經(jīng)肽Y對海人藻酸致癇大鼠的癇性發(fā)作持續(xù)時間及海馬結(jié)構(gòu)內(nèi)FOS蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、 神經(jīng)膚Y 對海人藻酸致痛大鼠的痛性發(fā)作持續(xù)時間 及海馬結(jié)構(gòu)內(nèi) F O S 蛋白 表達(dá)的影響研究生 金善導(dǎo) 師 遲兆富 教授前 言神經(jīng)膚 Y ( N e u r o p e p t i d e Y , N P Y ) 是一種含有3 6 個氨基酸殘基的多膚，由于它以酪氨酸殘基作為氨基端，以酪氨酞胺作為竣基端，每個分子又含有5 個酪氨酸殘基，所以將其命名為神經(jīng)膚酪氨酸，簡稱N P Y [ 1 ] o N P Y 作為神經(jīng)遞質(zhì)

2、/ 神經(jīng)調(diào)質(zhì)廣泛的分布在中樞及外周神經(jīng)系統(tǒng)中，是哺乳動物神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi) 含量最多的膚類之一[ 3 , 4 , 5 7 o N P Y 具有多方面的 生物學(xué)作用， 在中 樞它調(diào)節(jié)著垂體激素的釋放，協(xié)調(diào)自 律功能，并且對行為的調(diào)節(jié)也發(fā)揮著重要的作用，N P Y 能明顯的增進(jìn)攝食欲，還與學(xué)習(xí)和記憶密切相關(guān)，此外研究表明N P Y 還參與人類多種疾病的發(fā)生( 如H u n t i n g t o n ` s 綜合 征、 早 老性 癡呆、

3、癱痛等) [ 5 , 7 , 8 , 1 0 , 3 7 1 . N P Y 在中 樞神經(jīng)系統(tǒng)中主要分布在大腦皮層、海馬、丘腦、下丘腦及腦干等處[ 3 3 1 ， 尤以 海馬內(nèi) 濃度最高[ 3 , 4 , 6 1 ， 而海馬特別是腹側(cè)海馬是癲痛的敏感腦區(qū)，所以N P Y 與癱癰的關(guān)系近幾年來受到廣泛的 關(guān)注。國外學(xué)者在多 種邊緣系統(tǒng) 驚厥和點燃模型中 都觀察 到 了 癰 性 發(fā) 作 后 N P Y m R N A 及 N

4、 P Y 免 疫 反 應(yīng) 性 ( N P Yi m m u n o r e a c t i v i t y , N P Y - I R ) 的 變 化 [ 2 2 , 2 3 , 1 5 , 1 7 , 1 9 , 2 0 , 3 8 , 2 9 , 3 9 , 4 2 1 ， 并 且通過對諸多 癲癰實驗動物模型和人類顏葉癲癰患者的 研究中發(fā)現(xiàn)N P Y 具有抗癱癰作用[ 3 0 , 3 1 , 4 0 , 4

5、 1 , 4 3 , 4 4 , 4 5 , 5 0 1 . F + o s 蛋白 作為即早才︺ . ‘ 衛(wèi) ， . ， ‘ . r‘ . .|‘ 卜前稀釋成1 0 % 的生理鹽水溶液。3 , S A B C c - F O S 免疫組化染色試劑盒( 即 用型) :包括S :正常山羊血清; A : 兔抗。 - F o s 蛋白; B: 生物素化山羊抗兔I g G ;C : S A B C : 鏈霉親和素一 生物素一 過氧

6、化物酶復(fù)合物。 武漢博士德生物工程有限公司提供;4 、二氨基聯(lián)苯胺( D A B ) 顯色試劑盒:包括:顯色劑A : D A BX 2 0 倍 濃縮液: 顯色 劑 B : H 2 0 2 X 2 0 倍濃 縮液; 顯 色劑 C : X 2 0 T B S濃縮緩沖液。武漢博士德生物工程有限公司提供;5 、多聚賴氨酸、 A P E S ( 3 - A m i n o p r o p y l . t r i e t h o x y

7、 s i l a n e ) :美國 S i g m a 公司產(chǎn)品，武漢博士德生物工程有限公司提供。多聚賴氨酸用前以 蒸 餾水1 : 1 0 稀釋; A P E S 用前以 丙酮1 : 5 0 稀釋。二、方法:( 一) 動物分組:1 、首先將動物隨機(jī)分為5 個實驗組及1 個對照組，每組6 只大鼠。 5 個實驗組腦室內(nèi)分別注射以下不同 濃度的N P Y 1 0 川:1 , 5 n m o l / 1 0 川( A 組) 、 3 n m

8、 o l 八0 川( B 組) 、 6 n m o l / 1 0 川( C 組) 、1 2 n m o l / 1 0 川( D 組) 、2 4 n m o l / 1 0 川( E 組) 。 對照組腦室內(nèi) 注射等量生理鹽水。5 分鐘后腹腔內(nèi)注射K A 致痛，測定病性發(fā)作持續(xù)時間， 觀察不同劑量的 N P Y 對大鼠 癰性發(fā)作持續(xù)時間的影響，后分別與對照組比較，找出與對照組差異最顯著的一組。2 、 另取1 8 只大鼠，隨機(jī)分為 N P