雙眼形覺剝奪對大鼠視皮層神經(jīng)元電生理學(xué)和形態(tài)學(xué)特性的影響.pdf

1、目的:該課題擬通過視皮層腦片膜片鉗全細胞記錄法,結(jié)合細胞內(nèi)標記技術(shù),觀察不同發(fā)育階段雙眼形覺剝奪大鼠視皮層神經(jīng)元興奮性突觸后電流(EPSCs)變化及突觸傳遞長時程增強現(xiàn)象(LTP),研究形覺剝奪對發(fā)育過程中視皮層神經(jīng)元突觸電生理學(xué)和形態(tài)學(xué)特性的影響,探索哺乳動物視覺發(fā)育可塑性的細胞水平機制,為臨床相關(guān)視功能障礙的治療提供新的思路.方法:健康Wistar大鼠61只,分為正常組和雙眼形覺剝奪組:正常組中3周齡(20-22天齡)13只,4周齡

2、(27-29天齡)9只,5周齡(34-36天齡)10只;雙眼形覺剝奪組3周齡(20-22天齡)12只,4周齡(27-29天齡)9只,5周齡(34-36天齡)8只.形覺剝奪組于13天時縫合雙眼.制作腦片后利用盲法尋找細胞,獲得膜片鉗全細胞記錄,通過視皮層的雙極刺激電極給予0.07Hz的突觸前測試刺激,記錄視皮層神經(jīng)元的PSCs.然后給予1Hz的低頻刺激60~90個,每個脈沖伴隨突觸后去極化至-20mV以誘發(fā)LTP.電生理記錄結(jié)束后對所記細

3、胞進行免疫組化染色.結(jié)論:1、大鼠視皮層多突觸反應(yīng)型神經(jīng)元隨發(fā)育有逐漸升高的趨勢,而雙眼形覺剝奪后大鼠視皮層無反應(yīng)型神經(jīng)元較正常大鼠顯著增多,提示靜息突觸的激活可能是視皮層神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)回路構(gòu)建的一個重要基礎(chǔ).2、視皮層神經(jīng)元電生理學(xué)特性和形態(tài)學(xué)特性緊密相關(guān).形覺剝奪后大鼠視皮層神經(jīng)元形態(tài)學(xué)的幼稚狀態(tài)與功能上的不成熟是一致的.3、雙眼形覺剝奪后大鼠視皮層神經(jīng)元LTP誘出率顯著下降,提示形覺刺激是視皮層神經(jīng)元突觸正常發(fā)育的重要條件.4、雙眼形覺