喘息患兒血清25-羥維生素D3水平測(cè)定及臨床意義.pdf

1、目的：
　　 通過(guò)對(duì)急性發(fā)作期哮喘患兒和毛細(xì)支氣管炎患兒血清25-羥維生素D3水平的測(cè)定，探討血清25-羥維生素D3水平與兒童哮喘急性發(fā)作和毛細(xì)支氣管炎的關(guān)系，為小兒喘息性疾病的治療提供新的理論和臨床依據(jù)。
　　 對(duì)象和方法
　　 一、研究對(duì)象
　　 1.哮喘組：2009年12月～2010年3月在中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院小兒呼吸內(nèi)科病房住院患兒18例，符合中華兒科學(xué)會(huì)呼吸學(xué)組兒童支氣管哮喘防治常規(guī)提出的兒

2、童哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)，年齡10個(gè)月～5歲，平均3.12歲，其中男12例，女6例。
　　 2.毛細(xì)支氣管炎組：同期在我院小兒呼吸內(nèi)科住院患兒24例，年齡2月～3歲，平均9.98月，符合第六版《兒科學(xué)》毛細(xì)支氣管炎臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中男17例，女7例，母親無(wú)吸煙史，足月兒，除外呼吸道異物、呼吸道發(fā)育異常以及支氣管淋巴結(jié)結(jié)核等所致的喘息，并除外過(guò)敏性疾病病史和相關(guān)家族史。
　　 3.對(duì)照組： 來(lái)自于同期本院小兒骨外科住院兒童20例，既

3、往無(wú)支氣管哮喘、過(guò)敏性疾病病史和相關(guān)家族史，近4周無(wú)感染史，無(wú)活動(dòng)性佝僂病史，年齡8.5月～5歲，平均2.44歲，其中男10例，女10例。
　　 二、主要儀器與試劑
　　 1.儀器：離心機(jī)、-70℃冰箱、全自動(dòng)洗板機(jī)、全自動(dòng)酶標(biāo)儀、酶聯(lián)免疫試劑盒
　　 2.試劑：25-羥維生素D3酶聯(lián)免疫試劑盒（購(gòu)自大連寶晶生物技術(shù)有限公司）
　　 三、方法
　　 （一）病史采集
　　 患兒入院時(shí)詳細(xì)詢問(wèn)

4、個(gè)人過(guò)敏史，家族過(guò)敏史，既往喘息史，有無(wú)感冒喘息史。
　　 （二）標(biāo)本采集
　　 患兒入院時(shí)進(jìn)行治療前抽取空腹靜脈血1ml，離心1000r/min×3分鐘，收集血清后置-70℃冰箱凍，健康對(duì)照組采集標(biāo)本與其相同。
　　 （三）操作步驟
　　 1.取出酶標(biāo)板，依照次序?qū)?yīng)分別加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品于空白微孔中
　　 2.分別標(biāo)記樣品編號(hào)，加入100ul樣品于空白微孔中
　　 3.在標(biāo)準(zhǔn)品孔和

5、樣品孔中加入50ul的酶標(biāo)記溶液
　　 4.36±2℃孵育反應(yīng)60分鐘
　　 5.洗板機(jī)清洗5次，每次靜置10-20秒
　　 6.每孔加入底物A、B液各50u1
　　 7.36±2℃下避光孵育反應(yīng)15分鐘
　　 8.每孔加入50ul終止液，終止反應(yīng)。
　　 （四）結(jié)果判斷
　　 （1）儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔德OD值
　　 （2）B=標(biāo)準(zhǔn)品OD值，BO=標(biāo)

6、準(zhǔn)品0點(diǎn)的OD值
　　 （3）B/BO％值為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，在對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
　　 （4）在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找對(duì)應(yīng)的濃度范圍。
　　 四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
　　 采用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，結(jié)果用均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，應(yīng)用t檢驗(yàn)，P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié) 果
　　 一、哮喘急性發(fā)作期患兒血清25-羥維生素D3水平與對(duì)照組的比較
　　 哮喘患兒急性發(fā)作期血

7、清25-羥維生素D3水平明顯低于對(duì)照組，兩者比較有顯著性差異，t值為2.924，P<0.006。
　　 二、毛細(xì)支氣管炎患兒血清25-羥維生素D3水平與對(duì)照組的比較
　　 毛細(xì)支氣管炎患兒血清25-羥維生素D3水平明顯低于對(duì)照組，兩者比較有顯著性差異，t值為2.694，P<0.01
　　 三、哮喘及毛細(xì)支氣管炎患兒血清25-羥維生素D3降低者所占比率
　　 25-羥維生素D3血清正常值為11ng/ml～6

8、0ng/ml。哮喘組18例，25-羥維生素D3降低6例，占33.34％；毛細(xì)支氣管炎組24例，25-羥維生素D3降低8例，占33.34％。
　　 四、哮喘急性發(fā)作期與毛細(xì)支氣管炎患兒血清25-羥維生素D3水平的比較
　　 哮喘急性發(fā)作期與毛細(xì)支氣管炎患兒血清25-羥維生素D3水平相比沒(méi)有差異，t值為-0.297，P>0.5，兩者比較沒(méi)有顯著性差異。
　　 結(jié) 論
　　 1、哮喘患兒急性發(fā)作期血清25-OH