間充質干細胞分離、擴增及定向成骨分化的蛋白質組學分析.pdf

1、目的：探討用蛋白質組學方法分析人骨髓間充質干細胞(Msc)定向成骨細胞誘導分化中細胞蛋白表達譜的改變。 方法：從人骨髓細胞中分離獲得MSC，經細胞表型及多向分化能力測定鑒定MSC的純度和功能后，采用定向成骨細胞分化誘導培養(yǎng)體系，于分化后14天分別提取未分化細胞及分化后細胞的總蛋白，雙向電泳分析，確定蛋白差異點，經酶切后行蛋白肽質量指紋譜(Peptide Mass Fingerprinting)鑒定差異蛋白表達。 結果：白

2、骨髓中成功分離獲得間充質干細胞，細胞形態(tài)均一，為典型的紡錘狀，大約14d有超過80％的細胞融合。細胞表型分析為SH-3、4(CD73)、SH-2(CD105)、間質細胞標志CD166陽性，造血細胞表面標志CD34、CD45陰性，純度在90％以上。細胞周期分析表明，只有3.2％的細胞處于活躍的增殖分裂期即S期，90％的細胞處于靜息期即G<,0>-G<,1>期。細胞在特定誘導條件下可分化為多種問質細胞，如向脂肪分化，細胞內有脂滴的形成；向成