靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3預定位法檢測肝細胞癌的MRI研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學2012級碩士學位論文靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖一3預定位法檢測肝細胞癌的MRI研究MRMolecularImagingStudiesofGlypican3targetingPretargetingTechnologyforHepatocellularCarcinoma課題來源：學導專培培所廣東省自然科學基金位申請人師姓名業(yè)名稱養(yǎng)類型養(yǎng)層次在學院答辯委員會主席答辯委員會委員李維粵吳元魁副教授影像醫(yī)學與核醫(yī)學專業(yè)型碩士研究生第一臨

2、床醫(yī)學院李勇教授馮衍秋教授郭燕教授鄭可國教授黃穗喬教授2015年5月9日廣州摘要L5多肽具有相同的靶向性能但其分子量小、價格低廉且無免疫源性。在成像方式方面，為了提高對比增強作用，引入生物素親和素系統(tǒng)(biotinavidinsystem，BAS)。此系統(tǒng)具有高親和性及高特異性，并易于結合多種標記物而不影響其功能。對比起直接靶向法，BAS能明顯地提高靶向組織的對比劑攝取量。因此，本文應用L5多肽作為靶向GPC3蛋白的配體，將與聚乙二醇(

3、polyethyleneglycol，PEG)結合的超小超順磁性氧化鐵(ultrasmallsuperparamagneticironoxide，USPIO)作為對比劑，并應用生物素親和素預定位系統(tǒng)，進行HCC磁共振分子成像。研究內容及方法：1采用直接免疫熒光檢測L5多肽與肝癌細胞的結合情況：通過收集對數(shù)生長期HepG2肝癌細胞和人正常肝細胞HL7702并計數(shù)，以每孔5x10s分別接種在六孔板，各設3個復孑L，37℃培養(yǎng)過夜；用無血清培

4、養(yǎng)基配制01mg／mlL5FAM溶液，然后去除六孔板內培養(yǎng)液，PBS液洗滌，加入2mlL5FAM溶液至每個孔中，37℃恒溫培養(yǎng)箱避光孵育2h；用PBS液洗滌，去除未結合熒光多肽，加入4％多聚甲醛室溫固定細胞，用PBS洗滌，然后滴加熒光抗淬滅劑，然后置于倒置熒光顯微鏡觀察，并用FAM溶液作對照進行實驗。2L5多肽與肝細胞癌的結合抑制實驗檢測結合的特異性：選擇HepG2作為研究對象，先將濃度為lmg／ml的未標記FAM的L5多肽加入培養(yǎng)板六