糖基化磷脂酰肌醇特異性磷脂酶D在神經(jīng)膠質(zhì)瘤發(fā)生與侵襲中的作用.pdf

1、中南大學(xué)碩士學(xué)位論文糖基化磷脂酰肌醇特異性磷脂酶D在神經(jīng)膠質(zhì)瘤發(fā)生與侵襲中的作用姓名：段瓊申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：唐建華20090501碩士學(xué)位論文中文摘要達(dá)到13156，而其它組細(xì)胞GPIPLD活性較低，分別為5730和5926。(3)GPIPLD穩(wěn)定轉(zhuǎn)染U251細(xì)胞后，細(xì)胞釋放uPAR明顯增加。pcDNA3I()／GPI—PLD／U251較pcDNA31()／U251、U251細(xì)胞組培養(yǎng)基上清uPAR濃

2、度顯著提高，增高水平達(dá)4倍，而pcDNA31()／U251和U251細(xì)胞組見無明顯差異。3GPI—PLD轉(zhuǎn)染前后U251細(xì)胞生物學(xué)特性的改變。(1)M11’法顯示pcDNA31()／GPI—PLD／U251、pcDNA31()／U251、U251細(xì)胞組吸光度的平均水平分別為039240104、063140187和062140194；其中，pcDNA31()／GPIPLD／U251組比pcDNA31()／U251和U251組吸光度值明顯下

3、降，差異有顯著性(PO01)，pcDNA31()／U251和U251組無明顯差異。表明GPIPLD基因過表達(dá)能抑制U251細(xì)胞的增殖。(2)細(xì)胞流式術(shù)顯示pcDNA31()／GPIPLD／U251、pcDNA31()／U251、U251細(xì)胞組S期細(xì)胞數(shù)分別為933％、1646％、171％；但細(xì)胞凋亡率沒有明顯差別。(3)體外侵襲實(shí)驗(yàn)24h后，每個樣本分別計數(shù)5個視野。結(jié)果顯示pcDNA31()／GPI—PLD／U251、pcDNA31(

4、)／U251、U251三組細(xì)胞侵襲性顯著不同(P001)。pcDNA31()／GPIPLD／U251細(xì)胞侵襲性明顯低于pcDNA31()／U251、U251，提示GPIPLD能分解GPI錨，導(dǎo)致uPAR從細(xì)胞表面脫落，抑制其定位與uPA降解基質(zhì)的功能和uPARuPA介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而降低U251細(xì)胞的體外侵襲性。結(jié)論：1神經(jīng)膠質(zhì)瘤患者腦脊液中GPIPLD酶活性以及uPAR的濃度均較正常人降低，差異具有顯著性。2成功將GPIPLD基因轉(zhuǎn)