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文檔簡介
1、背景與目的:腫瘤的血管發(fā)生與腫瘤的生長關系密切。在腫瘤血管發(fā)生的分子機制的研究中,DLL4的作用日益受到關注。研究認為,腫瘤血管內皮細胞高表達DLL4,DLL4可能在血管的生長過程中調節(jié)著血管內皮細胞的分化增殖,從而達到控制血管生長的作用。本實驗擬檢測血管內皮細胞是否表達DLL4以及DLL4的兩個下游基因HEY1和HEY2。研究DLL4對血管內皮細胞增殖的影響,探索DLL4在腫瘤血管發(fā)生和生長中的作用。 材料與方法:培養(yǎng)人微血管
2、內皮細胞(HMEC),MTT法檢測HMEC細胞增殖,提取HMEC細胞總RNA,用RT—PCR的方法檢測HMEC細胞DLL4mRNA、HEY1mRNA、HEY2mRNA的表達,采用RNA干擾方法觀察HMEC細胞DLL4 mRNA表達,對結果進行統計學分析。 結果:RT-PCR結果顯示,HMEC細胞表達DLL4 mRNA、HEY1 mRNA和HEY2mRNA;DLL4 RNA干擾結果顯示,100nmol/L siRNA DLL4-d
3、uplex組和200nmol/LsiRNA DLL4-duplex組HMEC細胞DLL4 mRNA的表達明顯下調,MTT的結果顯示100nmol/L siRNA DLL4-duplex組和200nmol/L siRNA DLL4-duplex組的HMEC細胞的吸光度明顯增加,即抑制DLL4能促進HMEC細胞的增殖,表明DLL4抑制HMEC細胞增殖。 結論:HMEC細胞表達DLL4 mRNA、HEY1 mRNA和HEY2 mRNA
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