紅花對(duì)兔耳增生性瘢痕TGFβ1及CTGF表達(dá)的影響.pdf

1、目的：增生性瘢痕（HS）發(fā)病機(jī)制不明，臨床治療困難。目前眾多實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)活血化瘀類中藥有促進(jìn)瘢痕軟化的作用。紅花為活血化瘀類中藥的重要代表性藥物。本實(shí)驗(yàn)旨在通過紅花注射治療瘢痕后，觀察其有無促進(jìn)瘢痕軟化的作用及其對(duì)瘢痕轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGFβ1）、結(jié)締組織生長因子（CTGF）表達(dá)的影響，探討紅花是否具有抑制HS的作用及其可能的分子生物學(xué)機(jī)制。 方法：27只新西蘭大白兔兔耳腹側(cè)建立HS模型，每耳2塊。術(shù)后第45天開始對(duì)HS行注射治療

2、，1次/周，連續(xù)注射4次。每只兔的耳部HS按注射藥物的不同設(shè)為陽性對(duì)照組（未進(jìn)行注射）、生理鹽水組、低濃度紅花（125g/L）組、高濃度紅花（500g/L）組；每只兔右耳正常皮膚設(shè)為正常皮膚組。術(shù)后第45天、注射后第2、4、6周，分別用SEQUIA512彩色多譜勒超聲診斷儀13HZ高頻探頭檢測(cè)HS及皮膚厚度，硬度計(jì)測(cè)量HS及皮膚硬度[3]。注射后第2、4、6周分別隨機(jī)切取8只兔耳HS及皮膚，采用HE及Mallory法染色，觀察并計(jì)數(shù)表皮

3、細(xì)胞層次、真皮成纖維細(xì)胞密度、膠原纖維排列及致密度；免疫組織化學(xué)方法（SP）檢測(cè)每塊組織TGFβ1及CTGF蛋白的表達(dá)（TGFβ1及CTGF蛋白面密度及平均光密度）；逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）方法檢測(cè)每塊組織TGFβ1-mRNA，CTGF-mRNA的表達(dá)。 結(jié)果：（1）注射后第2、4、6周，各組HS厚度及硬度均逐漸下降，第4、6周高濃度紅花組HS厚度及硬度均為同期各HS組中最低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其余各

4、HS組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（2）HF及Mallory法染色顯示，注射后第2、4、6周各組HS表皮細(xì)胞層次逐漸減少，真皮成纖維細(xì)胞密度下降，第4、6周高濃度紅花組表皮細(xì)胞層次、真皮成纖維細(xì)胞密度均為同期各HS組中最低（P<0.05）；高濃度紅花組注射后第2、4、6周真皮膠原纖維排列逐漸規(guī)則、致密度逐漸下降，陽性對(duì)照組、生理鹽水組、低濃度紅花組真皮膠原纖維排列及致密度無明顯變化。（3）免疫組織化學(xué)方法（SP）顯示：注射后第2、4、6周，各H

5、S組TGFβ1及CTGF蛋白面密度及平均光密度均呈下降趨勢(shì)，其中高濃度紅花組上述4項(xiàng)檢測(cè)值均較同時(shí)段其它HS組低（P<0.05）；低濃度紅花組TGFβ1蛋白平均光密度，CTGF蛋白面密度及平均光密度在3個(gè)時(shí)段均較陽性對(duì)照及生理鹽水組低（P<0.05）。（4）RT-PCR顯示：注射后第2、4、6周，兩種濃度紅花組TGFβ1-mRNA及CTGF-mRNA的表達(dá)均逐漸降低，尤以高濃度紅花組明顯，各時(shí)段高濃度紅花組較其它HS組低（P<0.05）

6、；低濃度紅花組TGFβ1-mRNA的表達(dá)在注射后第4、6周，CTGF-mRNA的表達(dá)在注射后第2、4、6周均較陽性對(duì)照及生理鹽水低（P<0.05）。 結(jié)論：（1）高濃度紅花局部注射，可促進(jìn)兔耳HS軟化、變薄、表皮細(xì)胞層次減少、真皮成纖維細(xì)胞密度降低，膠原纖維排列整齊，致密度下降，低濃度紅花此作用不明顯。（2）高、低濃度紅花均能抑制兔耳HS的TGFβ1和CTGF的表達(dá)，高濃度紅花的作用較低濃度紅花強(qiáng)。 （3）兔耳HS模型的