葡萄二倍體與四倍體品種間雜交胚挽救的研究.pdf

1、以葡萄二倍體品種和四倍體品種為親本，配制7個雜交組合，利用胚挽救技術(shù)進(jìn)行培育三倍體葡萄新種質(zhì)的研究。雜交組合分別為‘無核白×巨峰’、‘克瑞森×巨峰’、‘火焰無核×巨峰’、‘Sweet Scarlet×巨峰’、‘摩爾多瓦×巨峰’、‘巨峰×摩爾多瓦’和‘巨峰×意大利’。在離體條件下，先進(jìn)行胚發(fā)育培養(yǎng)8周，然后轉(zhuǎn)接至萌發(fā)培養(yǎng)基萌發(fā)成苗，待新葉長出4～5片時，在培養(yǎng)室強(qiáng)光條件下進(jìn)行煉苗，之后移栽至溫室。本試驗對影響胚挽救的取樣時期、不同萌發(fā)培養(yǎng)

2、基及生長調(diào)節(jié)劑、胚珠處理方式、低溫處理果實和培養(yǎng)環(huán)境等因素進(jìn)行了探討，并利用流式細(xì)胞儀對二倍體葡萄×四倍體巨峰葡萄和四倍體巨峰×摩爾多瓦組合的雜種幼苗進(jìn)行了倍性分析。主要研究成果如下:
　　1.無核葡萄胚挽救過程中，幼胚最佳取樣時期因母本基因型不同而異，‘火焰無核×巨峰’組合在授粉后40 d、‘Sweet Scarlet×巨峰’組合和‘無核白×巨峰’組合在授粉后35d取樣進(jìn)行胚挽救成苗率較高。
　　2.適宜的生長調(diào)節(jié)劑種類及

3、濃度可促進(jìn)胚的發(fā)育和萌發(fā)，在幼胚萌發(fā)培養(yǎng)基中添加0.2 mg/L IAA可顯著提高胚珠萌發(fā)率，而添加BA和IBA未對胚萌發(fā)產(chǎn)生顯著影響。
　　3.胚珠進(jìn)行一定時間的低溫處理，可以有效解除種子休眠，且促進(jìn)胚的發(fā)育與萌發(fā)成苗，接種前將果穗置于4℃低溫條件下處理30 d能顯著提高胚的萌發(fā)率，接種后低溫處理抑制胚的萌發(fā)。
　　4.葡萄珠被對胚的發(fā)育和萌發(fā)成苗具有一定阻礙作用，直接剝?nèi)÷闩呙劝l(fā)較快，且能顯著提高雜交胚的成苗率;而橫切胚

4、珠時，‘火焰無核×巨峰’組合出現(xiàn)多胚苗，將多胚苗連續(xù)繼代3次，大部分可以萌發(fā)出新芽，成為正常幼苗。
　　5.水解酪蛋白對細(xì)胞生長表現(xiàn)為促進(jìn)作用，發(fā)育培養(yǎng)基中添加500 mg/L水解酪蛋白，可以顯著提高雜種植株的成苗率。
　　6.采用胚挽救技術(shù)獲得了雜種幼苗61株，通過流式細(xì)胞儀對雜種后代進(jìn)行早期倍性分析，得到四倍體幼苗1株、三倍體幼苗31株和二倍體29株。
　　7.將‘Sweet Scarlet×巨峰’、‘火焰無核×巨