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1、浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文CD97siRNA轉(zhuǎn)染對(duì)胃癌細(xì)胞株MKN45生物學(xué)特性的影響及其分子機(jī)制的初步研究姓名:龔道軍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):普通外科學(xué)指導(dǎo)教師:陳力20090501浙江大學(xué)博士學(xué)位論文中文摘要重要作用。然而,CD97對(duì)胃癌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響及其內(nèi)在機(jī)制仍然有待于闡明。第一章CD97siRNA轉(zhuǎn)染對(duì)人胃癌細(xì)胞株MKN45增殖、凋亡、遷移及侵襲能力的影響目的:設(shè)計(jì)合成有效的CD97siRNA,體外轉(zhuǎn)染胃癌細(xì)胞株,觀察C
2、D97表達(dá)變化及其對(duì)體內(nèi)、外胃癌細(xì)胞增殖、凋亡、遷移及侵襲能力的影響。方法:1采用人胃癌細(xì)胞株MKN45,針對(duì)CD97基因設(shè)計(jì)siRNA,采用化學(xué)法合成,篩選出最有效的CD97siRNA。2CD97siRNA轉(zhuǎn)染胃癌細(xì)胞48小時(shí)后,用RTPCR檢測(cè)CD97基因在mRNA水平表達(dá)的變化,72小時(shí)后用Westernblot和免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)CD97基因在蛋白水平表達(dá)的變化,并用MTT法和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)胃癌細(xì)胞增殖、凋亡的變化,用細(xì)胞遷移
3、和侵襲試驗(yàn)檢測(cè)胃癌細(xì)胞遷移和侵襲能力的變化。315只裸鼠隨機(jī)分為3組,每組5只,分別接種轉(zhuǎn)染siRNACD97細(xì)胞(抑制組),接種轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照siRNACD97細(xì)胞(陰性對(duì)照組),接種未轉(zhuǎn)染細(xì)胞(正常對(duì)照組)。接種4周后,觀察各組成瘤情況,比較成瘤率。結(jié)果:1CD97一siRNA轉(zhuǎn)染48小時(shí)后,RTPCR方法檢測(cè)結(jié)果表明CD97在mRNA水平表達(dá)下降7012%;72小時(shí)后,Westernblot方法檢測(cè)結(jié)果表明CD97在蛋白水平的表達(dá)下
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