胃癌SGC-7901細胞株側群細胞分選及生物學特性的初步研究.pdf

1、目的:分選人胃癌SGC-7901細胞株中的側群(side population，SP)細胞并初步研究其相關生物學特性。
　　方法:以人胃癌細胞株SGC-7901為研究對象，通過熒光染料Hoechst33342進行細胞染色，對照組同時加入維拉帕米做拮抗對照，應用流式細胞儀檢測并分選SP細胞和nonSP細胞。CCK-8法觀察兩組細胞的體外增殖活性;無血清并添加生長因子的培養(yǎng)基培養(yǎng)以觀察兩組細胞的自我更新能力;兩組細胞常規(guī)培養(yǎng)1周后復測

2、SP細胞比例以觀察不對稱分裂能力;體外耐藥實驗觀察兩組細胞對化療藥物5-FU的耐藥性;western-blot檢測ABCG2蛋白和bcl-2蛋白表達情況;熒光定量PCR檢測干細胞相關基因Musashi-1 mRNA和CD44mRNA在兩組細胞中的表達差異;異種移植實驗觀察兩組細胞在裸鼠體內的成瘤能力。
　　結果:胃癌SGC-7901細胞株中SP細胞的比例大致在2.3±0.78％左右，相對于nonSP細胞，SP細胞具有較強的體外增殖

3、活性(P＜0.05);在無血清培養(yǎng)基中能形成明顯的腫瘤球;具有較強的不對稱分裂能力;對5-FU的耐藥存活率明顯高于nonSP細胞(P＜0.05);高表達耐藥蛋白ABCG2和抗凋亡蛋白bcl-2;SP細胞中干細胞相關基因Musashi-1 mRNA和CD44mRNA的相對表達量明顯高于nonSP細胞(P＜0.05);在裸鼠皮下種植2×103個SP細胞可以產生腫瘤，而皮下種植2×104個nonSP細胞也未能見到腫瘤形成。
　　結論:人