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1、中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院中國人民解放軍總醫(yī)院碩士學位論文小鼠肌肉衛(wèi)星細胞的原代培養(yǎng)和鑒定姓名:汪茜申請學位級別:碩士專業(yè):神經(jīng)病學指導教師:蒲傳強20070529軍醫(yī)進修學院碩士學位論文小鼠肌肉衛(wèi)星細胞的原代培養(yǎng)和鑒定中文摘要目的建立可靠的小鼠肌內(nèi)衛(wèi)星細胞原代≯善養(yǎng)方法及鑒定技術。方法取新生小鼠后肢肌獲得細胞懸液,經(jīng)Percol1分離,結合差速貼壁法提純肌肉衛(wèi)星細胞。倒置顯微鏡觀察,繪制細胞生長曲線,采用結蛋白,a一肌動蛋白免疫細胞化
2、學方法鑒定肌肉衛(wèi)星細胞。結果原代骨骼肌衛(wèi)星細胞在開始分化前呈圓形,通過細胞分離、提純后純度為80%以上在F10培養(yǎng)液內(nèi)肌肉衛(wèi)星細胞生長良好,1天后細胞逐漸貼壁生長,細胞較小,分布均勻,多呈圓形;3—6天增長旺盛;到7—10天可生長至單層成片約50%一70%;1214天后肌肉衛(wèi)星細胞增殖減緩1015天的衛(wèi)星細胞結蛋白,肌動蛋白染色清晰結論使用Percoll分離,差速貼壁法的培養(yǎng)可獲得純度較高的肌肉衛(wèi)星細胞,而結蛋白,肌動蛋白免疫細胞化學染
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