S6跨膜結(jié)構(gòu)域的Y652氨基酸殘基突變增強(qiáng)辣椒素阻斷人類HERG鉀通道的作用.pdf

1、目的：研究辣椒素對野生型及突變型HERG離子通道的阻斷作用，并試圖探尋發(fā)生在S6結(jié)構(gòu)域的突變位點(diǎn)是否是辣椒素與HERG結(jié)合的重要作用位點(diǎn)。 方法：采用雙電極電壓鉗技術(shù)測定表達(dá)在非洲爪蟾卵母細(xì)胞上的HERG離子通道電流（野生型，Y652A型，F(xiàn)656A型）。 結(jié)果：辣椒素以濃度依賴性的方式阻斷野生型HERG鉀通道電流，其半最大效應(yīng)濃度IC50為17.45μM。辣椒素的阻斷作用不改變野生型HERG通道50％最大激活時(shí)的電位，

2、但使穩(wěn)態(tài)失活曲線向負(fù)值漂移。辣椒素可阻斷關(guān)閉和開放兩種狀態(tài)的HERG通道。然而，同野生型HERG通道的阻斷相比，Y652氨基酸殘基突變?yōu)楸彼岷笃渥钄嘧饔妹黠@增強(qiáng)，其IC50為5.68μM，而F656A突變與野生型的阻斷效應(yīng)之間沒有明顯的差別。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)，使用25μM辣椒素后，Y652A型通道的穩(wěn)態(tài)激活向正向漂移5mV，而失活參數(shù)向負(fù)值增大的方向漂移-29mV。 結(jié)論：辣椒素結(jié)合并阻斷關(guān)閉及開放狀態(tài)的HERG通道，位于S6結(jié)構(gòu)域