人心肌肌鈣蛋白I（cTnI）的提取純化與鑒定以及單克隆抗體的研制.pdf

1、目前在工業(yè)化的國家,心血管病的發(fā)病率和死亡率均很高,若能對此類疾病患者進(jìn)行早期診斷和及時(shí)治療,定能挽救很多人的生命,其中早期診斷是關(guān)鍵.病情的診斷包括臨床表現(xiàn),心電圖的變化和實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的檢測,而實(shí)驗(yàn)室檢查尤其重要.實(shí)驗(yàn)室檢查是否有利于早期診斷主要取決于兩方面因素:一是有無特異的心肌損傷標(biāo)志物,二是有無較快得出結(jié)果的檢測方法.目前研究認(rèn)為心肌損傷的特異生化標(biāo)志物主要有心肌肌鈣蛋白T(cTnT),心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTnI)和肌紅蛋白(Mb)

2、等,它們對于缺血性心臟病與心肌損傷具有重要的診斷價(jià)值,有取代心肌酶學(xué)指標(biāo)的趨勢.在這些生化指標(biāo)中,心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTnI)尤為突出,它是心臟特異性蛋白之一,作為心肌損傷的一種特異、靈敏的血清標(biāo)志物.本研究采用生物化學(xué)的方法和手段,從猝死者心肌中提取純化cTnI抗原,共獲得純化cTnI抗原13.1mg,經(jīng)鑒定其純度和免疫學(xué)活性均達(dá)到后續(xù)實(shí)驗(yàn)的要求.在此基礎(chǔ)上我們用自行研制的cTnI作為抗原,免疫BALB/c小鼠,根據(jù)經(jīng)典的單克隆抗體制備