玉屏風散藥材、血清指紋圖譜及部分成分藥動學研究.pdf

1、玉屏風散是中醫(yī)“扶正固本”的經(jīng)典代表名方，在近代臨床醫(yī)療中被廣泛應用于與免疫功能失調(diào)有關的多種疾病的治療，但由于該方成分復雜，原標準尚未建立含量測定方法，僅憑借其中某一種或少數(shù)幾種化學成分定性或定量的傳統(tǒng)中藥質(zhì)量評價方法降低了鑒別的準確性和專屬性，而指紋圖譜分析方法的出現(xiàn)為玉屏風散及其各單方藥材的質(zhì)量提供了可靠的保證。中藥指紋圖譜通常是指借助于現(xiàn)代分析及檢測技術來表達植物藥(主要是次生代謝產(chǎn)物)化學信息特征的指紋圖譜。它是一種十分可行的

2、質(zhì)量控制模式，運用整體性與模糊性的基本屬性，即物種特征的唯一性和同種個體間的相似性，為中藥材和中成藥提供綜合的、宏觀的和可量化的質(zhì)量評價[1,2]。它包括色譜指紋圖譜、光譜指紋圖譜、高效毛細管電泳指紋圖譜、核磁共振指紋圖譜、質(zhì)譜指紋圖譜的、X-射線衍射指紋圖譜和DNA指紋圖譜等，其中又以HPLC色譜法研究的指紋圖譜居多，它以其應用的廣泛性、優(yōu)良的分離能力和檢測的精確性成為控制中藥質(zhì)量最主要的檢測方法。本實驗按照《中國藥典》(2005年版

3、)規(guī)定及《中藥注射劑指紋圖譜研究的技術要求（暫行）》中的相關規(guī)定，優(yōu)化高效液相色譜的分離條件，建立了玉屏風散全方藥材湯劑的HPLC指紋圖譜，同時建立了血清指紋圖譜以及部分成分的藥代動力學。本研究內(nèi)容包括以下兩個部分：
　　 ㈠玉屏風散藥材湯劑的HPLC指紋圖譜的建立。本實驗初步對玉屏風散藥材進行了指紋圖譜研究，建立了玉屏風散藥材的高效液相色譜指紋圖譜的研究方法。實驗比較了甲醇-水、乙腈-水、甲醇-0.2％磷酸水和乙腈-0.2％磷

4、酸等流動相體系及不同波長對玉屏風全方藥材湯劑的分離效果的影響，并采用梯度洗脫對色譜條件進行優(yōu)化，以升麻苷、5-O-甲基維斯阿米醇苷、芒柄花素為指標，制定了全方藥材湯劑的HPLC指紋圖譜。確定了8個峰為指紋圖譜的共有峰，以升麻苷的峰為參照峰，計算其它色譜峰的相對保留時間和相對峰面積以及各指紋圖譜之間的相似度，作為技術參數(shù)評價指紋圖譜。結(jié)果，實驗所收集的10批不同批號和產(chǎn)地的藥材的相似度差異很大，在某種程度上反映了各藥材中有效成分含量的差異

5、。
　　 ㈡血清HPLC指紋圖譜的建立及部分成分的藥代動力學研究。在建立穩(wěn)定有效的玉屏風散藥材HPLC指紋圖譜的色譜條件的基礎上，本部分實驗分別比較了蛋白沉淀法和液液萃取法處理血清樣品后，建立了玉屏風散湯劑大鼠灌胃后不同時間點的血清HPLC指紋圖譜。通過藥材指紋圖譜、空白血清指紋圖譜及血清樣品指紋圖譜三者的比較，確定不同時間點的入血成分和含量變化趨勢，旨在說明藥材進入體內(nèi)后的整體變化，基于此部分實驗結(jié)果，具體且有針對性地對其中某