丹參藥材指紋圖譜及其水溶性成分的定量研究.pdf

1、隨著中藥事業(yè)及相關(guān)學(xué)科的發(fā)展,中藥質(zhì)量控制正從簡(jiǎn)單的單個(gè)成分含量測(cè)定轉(zhuǎn)向以先進(jìn)技術(shù)為手段,多組分、多指標(biāo)含量的測(cè)定.建立在現(xiàn)代分析技術(shù)基礎(chǔ)之上的指紋圖譜技術(shù)己成為中藥材及中藥制劑質(zhì)量控制的主要發(fā)展方向.高效液相色譜.紫外檢測(cè)器法作為建立中藥指紋圖譜的常用方法,雖可控制藥物質(zhì)量,但仍存在靈敏度不夠高,無(wú)法解決共淋洗峰(相同保留時(shí)間被洗脫的峰)等問(wèn)題. 高效液相色譜.庫(kù)侖陣列電化學(xué)檢測(cè)器(HPLC-CEAD)法可彌補(bǔ)這些不足,且其用

2、于構(gòu)建中藥材丹參的指紋圖譜目前尚未見(jiàn)報(bào)道. 本文采用HPLC-CEAD法首先對(duì)產(chǎn)于河北的丹參藥材中四種水溶性成分(丹參素、原兒茶酸、原兒茶醛和丹酚酸B)進(jìn)行定量檢測(cè).選用Hypersil C<,18>(5μm,250×4.6mm)色譜柱；流動(dòng)相由A(50mM醋酸鈉-0.1﹪三氟乙酸,pH2.5)、B(乙腈)兩相組成,采用梯度洗脫:0～15min,6﹪B:15～45min,6～22﹪B；0.8mL/min； 檢測(cè)電勢(shì)為10

3、0mV,150mV,200mV和250mV.結(jié)果顯示,標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)線(xiàn)性關(guān)系良好,回收率均高于97﹪,日內(nèi)、日間測(cè)得結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均低于6.6﹪.證明該方法用于丹參多種水溶性成分的同時(shí)測(cè)定精密度高,重復(fù)性好. 其次采用HPLC-CEAD法對(duì)山東、河北等產(chǎn)地的丹參藥材指紋圖譜進(jìn)行研究,并且分析比較不同產(chǎn)地丹參藥材的指紋圖譜.供試品溶液制備采用加熱回流的方法,以70﹪甲醇為溶劑,回流2h提取丹參藥材中的主要成分.所用色譜柱同

4、上；流動(dòng)相由A(50mM醋酸鈉-0.1﹪三氟乙酸,pH 2.7)、B(乙腈)兩相組成,采用梯度洗脫:0～15min,6﹪B；15～45min,6～20﹪B:45～60min,20～53﹪B:60～120min,53﹪B；0.8mL/min；工作電勢(shì)為-600mV,100mV,250mV和500mV.方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果顯示,精密度、穩(wěn)定性及重復(fù)性實(shí)驗(yàn)中各物質(zhì)相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積的RSD值均低于3.0﹪,參考國(guó)家藥品監(jiān)督管理局制定的《中藥注