知母藥材多維色譜指紋圖譜研究.pdf

1、在中藥現(xiàn)代化的進(jìn)程中，中藥指紋圖譜技術(shù)能比較全面地反映藥材地內(nèi)在質(zhì)量，用代表中藥藥效學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)的化合物群所表征的指紋圖譜來綜合評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量，符合中醫(yī)理論和中藥化學(xué)成分，已經(jīng)成為國(guó)際認(rèn)可的控制中藥或天然藥物質(zhì)量的最有效的手段，成為國(guó)家相關(guān)部門促進(jìn)中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)現(xiàn)代化大力推行的技術(shù)之一。中藥指紋圖譜研究工作目前是國(guó)內(nèi)中藥現(xiàn)代化研究的熱點(diǎn)之一。 本課題根據(jù)指紋圖譜研究的現(xiàn)狀，特別是針對(duì)指紋圖譜特別是多維指紋圖譜以及指紋圖譜評(píng)價(jià)存在的問題

2、，以知母藥材作為研究對(duì)象，進(jìn)行了知母藥材多維指紋圖譜的研究以及指紋圖譜評(píng)價(jià)方法的比較研究，收集了多個(gè)不同產(chǎn)地或批號(hào)的藥材，考察確立知母藥材的前處理?xiàng)l件和高效液相色譜法/二極管陣列檢測(cè)器/蒸發(fā)光散射檢測(cè)器聯(lián)用(HPLC/DAD/ELSD)的色譜條件，建立了知母藥材中雙苯吡酮類和知母皂苷類物質(zhì)等的含量測(cè)定方法，采用兩張色譜圖表征不同成分，紫外檢測(cè)方法測(cè)定藥材中的雙苯吡酮類成分，ELSD檢測(cè)方法測(cè)定其中基本無紫外吸收的皂苷類成分，首次實(shí)現(xiàn)HP

3、LC/DAD/ELSD聯(lián)用一個(gè)系統(tǒng)對(duì)知母藥材中兩類不同具有不同檢測(cè)性質(zhì)共6個(gè)成分的含量測(cè)定，建立的前處理方法簡(jiǎn)單有效。 多維指紋圖譜可以很好的解決由于單一模式進(jìn)行中藥指紋圖譜的研究的局限性。通過優(yōu)化的適用于三種檢測(cè)系統(tǒng)的通用色譜條件，利用HPLC-DAD-ELSD和高效液相色譜法/二極管陣列檢測(cè)器/質(zhì)譜檢測(cè)器(HPLC/DAD/MSD)兩種聯(lián)用方式建立了知母藥材DAD、ELSD以及MSD檢測(cè)的多維指紋圖譜，分別應(yīng)用三種圖譜對(duì)藥材

4、進(jìn)行了相似度的評(píng)價(jià)，同時(shí)對(duì)質(zhì)譜檢測(cè)的總離子流圖進(jìn)行了提取離子，獲得的提取離子流指紋圖譜具有更好的特征性，最后綜合所得的多維光譜色譜信息，建立了藥材多維指紋圖譜特征。針對(duì)獲得的多維指紋圖譜具有多個(gè)評(píng)價(jià)指標(biāo)的缺點(diǎn)，首次提出了多維融合指紋圖譜的概念，同時(shí)通過應(yīng)用活性物質(zhì)的校正因子作為權(quán)重因子的方法進(jìn)行了知母多維指紋圖譜的融合研究，得到了藥材的權(quán)重相似度，使三個(gè)評(píng)價(jià)指標(biāo)轉(zhuǎn)化為一個(gè)指標(biāo)，能夠直觀地進(jìn)行藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)。 針對(duì)對(duì)相似度應(yīng)用于中

5、藥質(zhì)量評(píng)價(jià)的缺點(diǎn)作了研究。采用模式識(shí)別的方法進(jìn)行知母DAD檢測(cè)和ELSD檢測(cè)指紋圖譜的評(píng)價(jià)研究，采用與知母藥材性質(zhì)較為相近的知母提取物和藥材同時(shí)進(jìn)行研究，對(duì)相似度評(píng)價(jià)結(jié)果、聚類分析以及主成分分析等評(píng)價(jià)結(jié)果的優(yōu)劣作出了比較，得到的結(jié)果證實(shí)了相似度評(píng)價(jià)結(jié)果具有一定的局限性，而主成分分析方法可以準(zhǔn)確對(duì)藥材的真?zhèn)蝺?yōu)劣進(jìn)行判別。 針對(duì)目前中藥中化學(xué)成分多數(shù)未知的情況，本課題利用已有的兩類成分共6個(gè)對(duì)照品通過應(yīng)用液相/多級(jí)質(zhì)譜(LC-MSn