伊布利特對(duì)兔左室中層細(xì)胞瞬間外向鉀電流活性的影響.pdf

1、目的：心臟病的死亡率在我國躍居前列，室速、室顫等嚴(yán)重的心律失常是心血管疾病死亡的根本原因。CAST(心律失常抑制試驗(yàn))和SWORD(口服d-索他洛爾試驗(yàn))等提示：抗心律失常藥物的研究方向已轉(zhuǎn)到了鉀通道阻滯劑尤其是能同時(shí)阻滯一種以上離子通道的鉀離子阻滯劑上。伊布利特作為一種新型Ⅲ型抗心律失常藥于1995年12月獲FDA批準(zhǔn)，1996年在美國上市。多數(shù)認(rèn)為伊布利特是對(duì)新近發(fā)生的心房顫動(dòng)和心房撲動(dòng)的首選轉(zhuǎn)復(fù)藥物。其對(duì)室性心律失常的動(dòng)物試驗(yàn)表明

2、：伊布利特能抑制室速和室顫的發(fā)生，可使除顫的閾值降低，對(duì)心室顫動(dòng)有較好的防治作用。臨床上對(duì)冠脈疾病患者的電生理研究發(fā)現(xiàn)，使用伊布利特后心室肌的有效不應(yīng)期(ERP)，QT間期和心室單相動(dòng)作電位(APD)均延長，且呈劑量依賴性。研究發(fā)現(xiàn)心室壁中層的心肌細(xì)胞，即M細(xì)胞具有獨(dú)特的電生理特性：如動(dòng)作電位呈典型的“峰和圓頂”狀，且呈明顯的慢頻率依賴性，這些特點(diǎn)決定了M細(xì)胞在折返性心律失常發(fā)生中起重要作用。瞬間外向鉀電流(Ito)是參與心肌復(fù)極的重要

3、離子流，它參與了動(dòng)作電位復(fù)極化的1相和2相，形成動(dòng)作電位1相切跡，并和L型鈣通道共同形成動(dòng)作電位平臺(tái)期。以往的研究證實(shí)了伊布利特對(duì)復(fù)極時(shí)鉀外向電流(Ikr)的抑制作用，但對(duì)于瞬間外向鉀電流的作用未見報(bào)道。本課題利用膜片鉗技術(shù)，旨在探討伊布利特對(duì)左心室肌M細(xì)胞瞬間外向鉀電流活性的變化，從而探討伊布利特的抗室性心律失常機(jī)制。 材料與方法： 1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物新西蘭大白兔60只，體重1.5～2.0kg。20只作為正常對(duì)照組，20只作

4、為伊布利特10-5mol/L組，20只作為伊布利特10-6mol/L組。 2.細(xì)胞分離利用酶解(膠原酶，Sigma公司)的方法分離心室肌細(xì)胞，定位方法：緊鄰心外膜側(cè)1～1.5mm為外膜層細(xì)胞(Epi)，心外膜下2～3mm取心肌中層細(xì)胞(Mcells)。 3.藥物富馬酸伊布利特由北京紅惠生物制藥有限公司提供，實(shí)驗(yàn)時(shí)在Ito灌流液中加入伊布利特使其最終濃度達(dá)到10-5mol/L、10-6mol/L。 4.電流記錄應(yīng)用

5、膜片鉗全細(xì)胞的記錄方法，記錄正常對(duì)照組、伊布利特10-5mol/L組和10-6mol/L組細(xì)胞Ito活性的變化。電流記錄的刺激程序由pulse+pulsefit8.53軟件控制，通道信號(hào)由EPC-9膜片鉗放大器放大，通過Ag-AgcL電極絲和填充電極內(nèi)液的微電極導(dǎo)入細(xì)胞，產(chǎn)生的電流信號(hào)經(jīng)EPC-9轉(zhuǎn)換，為pulse+pulsefit8.53軟件采集、分析。 5.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS11.0軟件包作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)

6、準(zhǔn)差(-x±s)表示，首先進(jìn)行組間均衡性檢驗(yàn)，兩組計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，成組資料間比較采用方差分析，以P＜0.05為有顯著性差異的標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)論： 1.本研究結(jié)果顯示：10-5mol/L、10-6mol/L伊布利特組各電壓下Ito電流密度不同程度的下降，激活電壓右移，電流-電壓曲線均下移，失活迅速，失活曲線、半數(shù)失活電壓明顯左移，失活后再恢復(fù)減慢，顯示瞬間外向鉀通道在用藥后受到抑制，延長1相復(fù)極，從而引起動(dòng)作電位復(fù)極時(shí)程的延

7、長。 2.伊布利特對(duì)心肌細(xì)胞Ito的抑制作用呈濃度依賴性，高濃度組伊布利特的抑制作用明顯強(qiáng)于低濃度組。 3.快速心律失常的發(fā)生機(jī)制90％以上為折返激動(dòng)所致，近年來發(fā)現(xiàn)心室肌細(xì)胞電生理活動(dòng)的不均一性，在折返性室性心律失常的發(fā)生和維持中起著重要的作用。Ito離子流的跨壁復(fù)極分布差異和梯度是心肌電生理活動(dòng)不均一性的突出表現(xiàn)，是導(dǎo)致2相全或無復(fù)極、動(dòng)作電位平臺(tái)期不一致改變和2相折返的最重要的離子流之一。伊布利特抑制Ito，使復(fù)極