西洛他唑及氟伐他汀對(duì)大鼠右心室肌瞬間外向鉀電流及L型鈣離子通道的影響.pdf

1、背景：Brugada綜合征(Brugada syndrom，BrS)是一種心電活動(dòng)紊亂的遺傳性疾病，好發(fā)于心臟結(jié)構(gòu)正常的男性青年人，是年輕人群發(fā)生心源性猝死的主要原因之一。常以暈厥甚至猝死為首發(fā)癥狀，且發(fā)作無(wú)前兆;它在亞洲地區(qū)的發(fā)生率明顯高于歐洲，故又稱(chēng)為“東南亞突發(fā)性原因不明夜間猝死綜合癥”。因此，如何有效的預(yù)防并進(jìn)一步治療BrS快速室性心律失常、心室顫動(dòng)（室顫）甚至心臟猝死等惡性事件的發(fā)生迫在眉睫。目前，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，瞬間外向鉀電流

2、(transient outward potassium current，Ito)介導(dǎo)的2相折返是BrS心律失常發(fā)生的主要機(jī)制。另外，L-型鈣電流(ICa,L)也是其重要的離子基礎(chǔ)。植入型心律轉(zhuǎn)復(fù)除顫器（implantable cardioverter-defibrillator, ICD）是目前唯一公認(rèn)的能預(yù)防BrS患者發(fā)生室性心動(dòng)過(guò)速、室顫甚至猝死的有效手段。但I(xiàn)CD存在除顫閾值升高、誤放電、價(jià)格昂貴等缺陷。所以，藥物治療BrS仍成

3、為研究方向，尤其是具有心臟高選擇性并能特異性阻斷Ito的藥物。西洛他唑是一種磷酸二酯酶Ⅲ抑制劑，通常作為一種抗血小板聚集藥物，臨床上常用于慢性動(dòng)脈閉塞。近年來(lái)，多項(xiàng)研究表明，西洛他唑還具有調(diào)脂、抑制血管內(nèi)膜增生、預(yù)防PCI后血栓形成及再狹窄、抗心律失常等多方面效應(yīng)。關(guān)于兩洛他唑預(yù)防BrS快速心律失常發(fā)生的離子通道機(jī)制的研究結(jié)果存在爭(zhēng)議。他汀類(lèi)藥物廣泛的應(yīng)用于心血管病，它具有多效性作用，除了調(diào)脂作用外，還具有改善血管內(nèi)皮功能、穩(wěn)定并逆轉(zhuǎn)動(dòng)

4、脈粥樣硬化斑塊、抗心律失常等作用，近年來(lái)其非調(diào)脂作用越來(lái)越多的受到臨床醫(yī)生的關(guān)注。本研究應(yīng)用膜片鉗全細(xì)胞記錄技術(shù)，研究不同濃度的西洛他唑及氟伐他汀對(duì)大鼠右心室肌細(xì)胞Ito及ICa,L的影響。
　　 目的：觀察西洛他唑、氟伐他汀對(duì)大鼠右心室肌細(xì)胞Ito及ICa,L的影響，探討兩洛他唑抑制BrS室性心律失常發(fā)生的離子通道機(jī)制，并初步了解氟伐他汀是否能預(yù)防BrS室性心律失常發(fā)生。
　　 方法：⑴細(xì)胞離子通道的急性藥理實(shí)驗(yàn)即灌流

5、實(shí)驗(yàn):細(xì)胞經(jīng)正常細(xì)胞外液灌流5 min，記錄正常狀態(tài)下離子通道電流為對(duì)照組，再予以西洛他唑灌流液2min，記錄灌流藥物后離子通道電流；⑵慢性藥理實(shí)驗(yàn)即口服藥物實(shí)驗(yàn)。其中，灌流實(shí)驗(yàn)中分為四組:1μmol/L西洛他唑組、2μmol/L西洛他唑組、5μmol/L西洛他唑組、50μmol/L西洛他唑組，觀察每組給藥前及給藥后Ito電流密度差異，并觀察四組間用藥前后Ito電流密度變化的差異;口服西洛他唑?qū)嶒?yàn)分為兩組:空白組（CON組）及實(shí)驗(yàn)組（C

6、ILO組），其中實(shí)驗(yàn)組給予大鼠10mg/kg/d西洛他唑，共喂養(yǎng)4周，觀察兩組間ICa,L電流密度的差異?？诜ニ?shí)驗(yàn)分為兩組:對(duì)照組（CON1組）及實(shí)驗(yàn)組（FVT組），其中實(shí)驗(yàn)組給予大鼠8mg/kg/d氟伐他汀，共喂養(yǎng)4周，觀察兩組間Ito電流密度的差異。
　　 結(jié)果：①灌流實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1μmol/L西洛他唑灌流液前后Ito電流密度變化:在大部分指令電壓下，細(xì)胞灌流藥物后Ito電流密度均低于灌流前，其中自指令電壓0mV到最大

7、+60mV差異存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；2μmol/L西洛他唑灌流液前后Ito電流密度變化:在大部分指令電壓，細(xì)胞灌流藥物后Ito電流密度均低于灌流前，其中自指令電壓+30mV到最大+60mV差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；5μmol/L西洛他唑灌流液前后Ito電流密度變化:在大部分指令電壓下，細(xì)胞灌流藥物后Ito電流密度均低于灌流前，其中自指令電壓0mV到最大+60mV差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；50μmol/L西洛他唑灌流液前后Ito電流密度變化:在大部分指

8、令電壓下，細(xì)胞灌流藥物后Ito電流密度均低于灌流前，其中自指令電壓+20mV到最大+60mV差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；四組間西洛他唑灌流液灌流后Ito電流密度濺少率比較:在各指令電壓下時(shí)，采用單因素方差分析比較四組不同濃度西洛他唑灌流液灌流細(xì)胞后Ito電流密度濺少率，四組間無(wú)區(qū)別，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。另外，在+60 mV下各濃度西洛他唑使Ito電流密度下降幅度均在60％左右。②口服藥物實(shí)驗(yàn)結(jié)果(1)口服西洛他唑前后ICa,L電流

9、密度的變化:在自指電壓-50mV到最大+60mV，CILO組ICa，L電流密度較CON組無(wú)明顯變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。(2)口服氟伐他汀緩釋片前后細(xì)胞Ito電流密度的變化:在自指令電壓-50mV到最大+60mV，F(xiàn)VT組較對(duì)照組Ito電流密度無(wú)明顯變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：⑴1μmol/L、2μmol/L、5μmol/L、50μmol/L西洛他唑灌流液直接作用于大鼠右心室肌細(xì)胞，均能明