菊花活性成分測定與指紋圖譜研究.pdf

1、菊花(Chrysanthemum morifoltum Ramat)是一種常用中藥。但是菊花的種類不同，其作用也不同；為區(qū)別菊花的種屬和全面控制菊花藥材的入藥質(zhì)量標準，本課題運用毛細管電泳電化學檢測法研究菊花中的活性成份，運用高效液相色譜法建立菊花藥材的指紋圖譜，為不同品種菊花的區(qū)分提供了依據(jù)，并研究了不同種類菊花的抗氧化能力。 首先，糖是生命有機體的重要代謝成份，且糖類物質(zhì)是菊花中較穩(wěn)定，且較有特征性的化合物，因此首先運用毛細

2、管電泳電化學檢測法對不同品種菊花中的甘露醇及糖類進行了研究。實驗選取100mmol/L的NaOH溶液為運行液，用200μm銅電極作工作電極，在0.65V(vs.SCE)的電極電位下，七種被測組分-甘露醇、蔗糖、半乳糖、葡萄糖、鼠李糖、甘露糖、果糖得到了較好的分離，并進行定量測定。采用夾角余弦和相關(guān)系數(shù)的方法計算菊花和野菊花指紋圖譜的相似度，結(jié)果表明，菊花樣品相似度的區(qū)分與實際樣品分類相符合。 其次，在研究糖類化合物及其品種區(qū)分的

3、基礎(chǔ)上，對菊花中主要黃酮類活性成分進行定性和含量研究，為菊花入藥選材提供依據(jù)。運用毛細管電泳電化學檢測法測定菊花中黃酮類活性成分的含量。實驗選取pH9.2、濃度為50mmol/L的硼砂體系為運行緩沖液，分離電壓16kV，300μm的碳圓盤電極在0.95V(vs.SCE)下，被測五種組份柯因、黃芩苷、綠原酸、木犀草素和槲皮素得到了較好的分離，并實現(xiàn)了定量測定。該方法在10<'-4>～10<'-6>g/mL范圍內(nèi)建立良好的線性關(guān)系，五標樣遷

4、移時間和峰面積RSD(n=7)分別在1.5％～3.5％，1.9～3.6％之間，檢出限(S/N=3)和平均回收率(n=3)分別在9×10<'-7>～2.5×10<'-6>g/mL，97.3％-～104.1％之間。 再次，高效液相色譜法在建立指紋圖譜時具有精確性，穩(wěn)定性，重現(xiàn)性好等優(yōu)點，采用該方法，建立了12個菊花樣品的指紋圖譜，色譜柱為Nov-pak C<,18>，以0.1％磷酸水溶液-甲醇體系為流動相，流速0.6mL/min，進

5、行梯度洗脫，檢測波長為254nm。運用夾角余弦和相關(guān)系數(shù)法計算菊花樣品的相似度，并運用MATLAB程序?qū)ο嚓P(guān)系數(shù)法計算結(jié)果進行聚類分析，結(jié)果與實際樣品種屬區(qū)分一致，為菊花的質(zhì)量控制和種屬的區(qū)分提供依據(jù)。 最后，采用毛細管電泳電化學檢測方法，研究硫酸銅一維生素C反應(yīng)體系(pH7.4)中生成的羥基自由基。以對羥基苯甲酸為自由基捕捉劑，對目標產(chǎn)物3,4-二羥基苯甲酸進行定量測定，從而得知羥基自由基的濃度。以直徑為300μm的碳圓盤電極