髓源性抑制細胞(MDSC)在潰瘍性結(jié)腸炎中的表達變化和生物學作用的初步研究.pdf

1、第一部分：炎癥性腸病患者體內(nèi)髓源性抑制細胞的表達及其臨床意義
　　目的:分析炎癥性腸?。↖BD）患者外周血中髓源性抑制細胞（MDSC）的表達變化，并初步探討MDSC與UC和CD患者活動性的關(guān)系。
　　方法:收集69例蘇州地區(qū)IBD患者（克羅恩病33例，活動期16例，緩解期17例；潰瘍性結(jié)腸炎36例，其中活動期21例，緩解期15例）和36例健康者外周血標本，流式細胞儀檢測兩類IBD患者及不同病程階段中CD14+HLA-DR-/

2、lowMDSC細胞表達率。
　　結(jié)果:
　　1.正常對照組中外周血單核樣MDSC占單核細胞比例為（10.7±7.4，％），CD組為（43.7±23.0，%）；UC組為（49.1±27.2，%），CD組和UC組均明顯高于正常對照組（P<0.01），而CD組和UC組比較無明顯差異（P>0.05）。
　　2.CD緩解期患者外周血單核樣MDSC細胞占單核細胞比例為（28.1±16.2，%），活動期患者為（60.3±16.8，%

3、），CD活動期患者明顯高于緩解期患者（P<0.01）。
　　3. UC緩解期患者外周血單核樣MDSC占單核細胞比例為（20.8±7.9，%）；活動期患者為（65.9±16.1，%），活動期明顯高于緩解期（P<0.01），UC緩解期患者與正常對照組相比無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。
　　結(jié)論: IBD患者外周血單核樣MDSC明顯升高，且與IBD活動度密切相關(guān)，生物學作用需要進一步探討。
　　第二部分：潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型

4、體內(nèi)MDSC的表達及其意義
　　目的:利用潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型，分析髓源性抑制細胞(MDSC)表達與 IBD的關(guān)系。
　　方法:按照經(jīng)典Cooper方法采用葡聚糖硫酸鈉(dextran sulfate sodium, DSS)誘導出BALB/c小鼠慢性潰瘍性結(jié)腸炎的模型(DSS-UC模型)，大體觀察各組小鼠疾病活動指數(shù)(disease activity index, DAI)，常規(guī)病理切片評估結(jié)腸組織病理學評分(histop

5、athological score, HPS)。在成功造出小鼠慢性潰瘍性結(jié)腸炎的模型(DSS-UC模型)后，通過流式細胞術(shù)分析比較模型小鼠和正常小鼠骨髓、脾臟和外周血CD11b+Gr1+雙陽性MDSC表達情況，初步探討MDSC在UC小鼠模型中的表達特征。免疫組化(IH)測定小鼠遠端結(jié)腸組織IL-12、IL-4、IL-1β、TNF-α、IL-6的表達，初步探討UC病理進程與這些炎癥細胞因子之間的關(guān)聯(lián)。
　　結(jié)果:正常組小鼠DAId7

6、評分為(0.23±0.51)、HPS評分為(0.17±0.41)，模型組小鼠DAId7評分為(6.33±1.03)、HPS評分為(7.82±1.23)，模型組DAI和HPS評分較正常組明顯增高(P<0.05)。正常小鼠骨髓中 MDSC細胞所占比例為（58.20±1.57，%），UC模型中 MDSC細胞所占比例為（74.86±4.065，%），UC模型骨髓中MDSC細胞顯著高于正常小鼠（P<0.001）。正常小鼠脾臟中MDSC細胞所占比例

7、為（2.81±0.132，%），UC模型中MDSC細胞所占比例為（7.85+0.708，%），UC模型脾臟中MDSC細胞顯著高于正常小鼠（P<0.001）。正常小鼠外周血中MDSC細胞所占比例為（5.42±0.836，%），UC模型中MDSC細胞所占比例為（12.46±1.88，%），UC模型外周血中MDSC細胞與正常小鼠相比，UC模型血液中 MDSC細胞顯著高于正常小鼠（P=0.009）。模型小鼠病變部位 IL-1β、IL-6、IL-

8、12和TNF-α等炎癥因子的表達均較正常小鼠為強。
　　結(jié)論: UC模型小鼠體內(nèi)MDSC和病變部位炎性因子均較對照組升高，提示病變活動期進程中MDSC可能通過調(diào)控炎性因子參與免疫病變過程。
　　第三部分：黃芪多糖調(diào)節(jié)MDSC在潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型中治療效應(yīng)的實驗研究
　　目的:初步研究黃芪多糖在潰瘍性結(jié)腸炎治療中的作用，探討是否通過影響MDSC發(fā)揮作用。
　　方法:通過建立DSS誘導的潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型，研究黃

9、芪多糖對MDSC的影響，探討黃芪多糖（APS）在治療UC中的效果。分析干預(yù)前后，對UC小鼠體內(nèi)MDSC數(shù)量的影響。并從病理組織學討論黃芪多糖對UC小鼠腸黏膜修復(fù)的影響，評價黃芪多糖對潰瘍性結(jié)腸炎的治療效應(yīng)。
　　結(jié)果:APS對UC模型小鼠干預(yù)后，小鼠骨髓中、脾臟中、外周血中MDSC細胞的表達均明顯下降，表明APS對MDSC細胞有明顯地抑制作用。推測黃芪多糖對IBD的治療是部分依賴MDSC來實現(xiàn)的。
　　結(jié)論:黃芪多糖在IBD