鵝絨藤葉斑病病原菌鑒定及生物學(xué)特性研究.pdf

1、鵝絨藤（Cynanchum chinense R.Br.）為蘿蘑科(Asclepiadacea)鵝絨藤屬（Cynanchum）多年生草本植物，多生長(zhǎng)在沿海、荒郊野嶺等非農(nóng)用耕地上。該屬植物全草大部分可入藥，其植物汁液的提取物具有抗腫瘤等多種功效，是一種很有開發(fā)價(jià)值的野生藥用植物資源。筆者對(duì)大連地區(qū)海濱灘涂生長(zhǎng)的鵝絨藤進(jìn)行了實(shí)地考察，發(fā)現(xiàn)自然生境下鵝絨藤真菌病害多有發(fā)生，但有關(guān)病害種類鑒定等研究國(guó)內(nèi)外鮮有報(bào)道。本文對(duì)遼寧省大連地區(qū)鵝絨藤發(fā)

2、生的病蟲害種類進(jìn)行了初步調(diào)查，并對(duì)其葉斑病進(jìn)行了病原菌鑒定及生物學(xué)特性研究，旨為鵝絨藤生產(chǎn)栽培中的病害防治提供理論依據(jù)。
　　(1)鵝絨藤在自然生境下多發(fā)生葉斑病，該病害在6月顯癥，8-9月病情加重。2011年調(diào)查其病情指數(shù)為63.3、發(fā)病率96.7％;2012年調(diào)查數(shù)據(jù)顯示病情指數(shù)上升至69.1、發(fā)病率100％。此外還發(fā)現(xiàn)鵝絨藤有白腐病發(fā)生。發(fā)現(xiàn)了兩種昆蟲:夾竹桃蚜(Aphis nerii)和紅脊長(zhǎng)蝽（Tropidothorax

3、 elegans Distant），其中夾竹桃蚜蟲口密度較大、危害較重。
　　(2)從鵝絨藤葉斑病感病葉片中分離出了4株真菌，其中菌株UN-P1單斑分離率較高為68.18％，菌株UN-P2分離率為6.82％。經(jīng)致病性試驗(yàn)證明菌株UN-P1與菌株UN-P2無(wú)論是單獨(dú)侵染或混合侵染，均可導(dǎo)致接種葉片發(fā)病，由此認(rèn)為，鵝絨藤葉斑病致病菌是菌株UN-P1和菌株UN-P2。采用真菌通用引物ITS1和ITS4對(duì)菌株UN-P1和菌株UN-P2兩株

4、病原菌DNA進(jìn)行rDNA-ITS測(cè)序、系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建及同源性比對(duì)，證明了菌株UN-P1為立枯絲核菌(Rhizoctonia solani)、菌株UN-P2為球黑孢（Nigrosporasphaerica），與形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果一致。
　　(3)兩株病原菌的生物學(xué)特性:①菌株UN-P1菌絲在15℃-30℃下均能生長(zhǎng)，最適生長(zhǎng)溫度均為24℃、致死溫度為63℃，最適pH為7，最適濕度為50％，培養(yǎng)48-108小時(shí)為菌絲速長(zhǎng)期，全黑暗環(huán)境有利

5、于菌絲生長(zhǎng);最適碳源為蔗糖、氮源為尿素、無(wú)機(jī)鹽為NaH2PO4、生長(zhǎng)因子為維生素B1。②菌株UN-P2菌絲在5℃-35℃下能生長(zhǎng)，最適生長(zhǎng)溫度為24℃、致死溫度為68℃，最適pH為8，最適濕度為90％，培養(yǎng)48-108小時(shí)為菌絲速長(zhǎng)期，全黑暗環(huán)境有利于菌絲生長(zhǎng)。最適碳源為D-果糖、氮源為酵母膏、無(wú)機(jī)鹽為K2HPO4、生長(zhǎng)因子為萘乙酸。菌株UN-P2在15-35℃時(shí)產(chǎn)孢，最適產(chǎn)孢溫度為24℃，全光照環(huán)境利于產(chǎn)孢，培養(yǎng)第4天時(shí)菌絲生長(zhǎng)速率變