昆蟲病原真菌分離鑒定及其對(duì)兩種藥材害蟲防治潛力評(píng)價(jià).pdf

1、化橘紅（Citrus grandis'Tomentosa’）和白木香(Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg)是兩種珍貴的藥用植物，近年來隨著種植面積的擴(kuò)大，在其生產(chǎn)過程中蟲害問題不斷突出，曲牙土天牛(Dorysthenes hydropicus)與黃野螟(Heortia vitessoides)分別成為化橘紅與白木香的重要害蟲，已經(jīng)嚴(yán)重影響了藥材的生產(chǎn)。隨著生產(chǎn)綠色藥材理念的推廣，在藥材害蟲的防治過程中，除了使用化

2、學(xué)農(nóng)藥外，越來越重視通過提高栽培管理水平，保護(hù)生產(chǎn)基地環(huán)境，招引和培植天敵等手段來實(shí)現(xiàn)對(duì)中藥材害蟲的綜合防治。昆蟲病原真菌是一類重要的害蟲天敵，具有巨大的應(yīng)用潛力，目前已經(jīng)在衛(wèi)生、林業(yè)及農(nóng)業(yè)害蟲的防治上獲得一些成功，而在藥材生產(chǎn)中的應(yīng)用還鮮有報(bào)道。本研究從藥材基地分離得到了昆蟲病原真菌，并用綠僵菌Metarhizium對(duì)曲牙土天牛和黃野螟進(jìn)行了毒力測(cè)定，為進(jìn)一步利用綠僵菌防治藥材害蟲提供科學(xué)依據(jù)，也為綠色藥材的生產(chǎn)提供一些新的研究思路。

3、具體研究結(jié)果如下：
　　 1、昆蟲病原真菌的分離鑒定
　　 利用黃粉蟲Tenebrio molitor誘集法從廣東化州綠色生命有限公司的藥材GAP基地土壤中誘集到18株昆蟲病原真菌，依據(jù)形態(tài)與ITS序列特征，全部鑒定為金龜子綠僵菌小孢變種Metarhizium.anisopliaevar.anisopliae;從山東臨沂市平邑縣的金銀花基地采到12份因昆蟲病原真菌感染致死的鱗翅目幼蟲，從蟲體上分離獲得12株病原真菌，通過

4、形態(tài)與分子鑒定，全部確認(rèn)為萊氏野村菌Nomurearileyi。
　　 2、綠僵菌對(duì)化橘紅害蟲曲牙土天牛幼蟲的毒力測(cè)定
　　 利用35株綠僵菌分生孢子制成的孢子土對(duì)曲牙土天牛(Dorysthenes hydropicus)1齡幼蟲進(jìn)行毒力預(yù)測(cè)定，選擇其中7株做進(jìn)一步的毒力測(cè)定，每株菌設(shè)1×108孢子·g-1、1×107孢子·g-1、1×106孢子·g-13個(gè)孢子濃度，發(fā)現(xiàn)6株綠僵菌對(duì)曲牙土天牛幼蟲有較高毒力，最高僵蟲率為

5、74.3％～94.3%。
　　 3、高毒力菌株的產(chǎn)孢能力評(píng)價(jià)
　　 以SDY培養(yǎng)液為液體培養(yǎng)基、大米為固體培養(yǎng)基，采用液固雙相發(fā)酵法對(duì)6株毒力較高的綠僵菌進(jìn)行發(fā)酵，對(duì)它們的產(chǎn)孢能力進(jìn)行初步評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示不同菌株之間產(chǎn)孢量有較大差異，產(chǎn)孢量大小排序依次是1＞4＞22-3-2＞31＞15-2＞27-2，每克干物料的產(chǎn)孢數(shù)量分別為23.5億、22.1億、16.8億、15.7億、11.4億、10.8億，產(chǎn)孢量最大的1號(hào)菌株，其產(chǎn)

6、孢量是最小菌株27-2的2.2倍。
　　 4、綠僵菌對(duì)白木香害蟲黃野螟幼蟲的毒力測(cè)定
　　 在利用35株綠僵菌的孢子液對(duì)黃野螟5齡幼蟲進(jìn)行毒力預(yù)測(cè)定的基礎(chǔ)上，選取10株菌，分別設(shè)1×109孢子·ml-1、1×108孢子·ml-1、1×107孢子·ml-13個(gè)濃度的孢子液對(duì)黃野螟老熟幼蟲進(jìn)行毒力測(cè)定，結(jié)果有9株菌出現(xiàn)僵蟲，孢子濃度1×109孢子·ml-1的10號(hào)菌引起的僵蟲率最高，為38%，；選取18株菌，制成1×109孢

7、子·g-1、1×108孢子·g-1、1×107孢子·g-13個(gè)濃度的孢子土對(duì)黃野螟老熟幼蟲進(jìn)行毒力測(cè)定，16株菌能夠引起黃野螟幼蟲感染，孢子濃度為1×109孢子·g-1的GB1-P菌株引起的僵蟲率最高，為49%;選取15株綠僵菌的分生孢子制成油劑，設(shè)1×1010孢子·ml-1、1×109孢子·ml-11×108孢子·ml-13個(gè)孢子濃度對(duì)黃野螟5齡幼蟲進(jìn)行毒力測(cè)定，14株菌引起僵蟲，11號(hào)菌株僵蟲率最高，隨孢子濃度降低僵蟲率依次為53%