多殺菌素生產(chǎn)菌株選育和培養(yǎng)條件優(yōu)化研究.pdf

1、多殺菌素作為一種新型的生物農(nóng)藥，具有殺蟲譜廣、作用方式獨(dú)特、殺蟲活性高、半衰期短、殘留低、無抗藥性、對(duì)環(huán)境友好等優(yōu)良的特性，故越來越受到人們的重視，在農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)中具有廣泛的應(yīng)用，此產(chǎn)品的生產(chǎn)具有良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。多殺菌素的兩種活性成分spinosyn A和spinosyn D，是刺糖多孢菌經(jīng)過有氧發(fā)酵產(chǎn)生的。目前，篩選多殺菌素高產(chǎn)菌株和優(yōu)化發(fā)酵條件仍是提高多殺菌素產(chǎn)量的主要手段。本文通過篩選多殺菌素生產(chǎn)菌株和優(yōu)化發(fā)酵條件，多殺菌

2、素產(chǎn)量提高了190.47％。
　　 本文以刺糖多孢菌突變株U-4213為出發(fā)菌株，通過He-Ne激光誘變和紫外誘變，篩選出一株正突變株ZW-6，產(chǎn)量達(dá)到了286.4mg/L，較出發(fā)菌株(產(chǎn)量為175mg/L)提高了63.66％，且遺傳性狀穩(wěn)定。
　　 以突變株ZW-6為出發(fā)菌株，首先對(duì)種子培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化，最終經(jīng)過綜合考慮，確定培養(yǎng)基成分不變，采用孢子液接入量為200μ1及二級(jí)培養(yǎng)的種子培養(yǎng)方式。經(jīng)過一系列的

3、單因素實(shí)驗(yàn)、正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)對(duì)發(fā)酵培養(yǎng)基組分進(jìn)行了優(yōu)化，最終確定各因素的影響程度順序分別為：葡萄糖＞豆油＞正丁醇＞牛肉膏＞脫脂奶粉＞MgSO4·7H2O＞K2HPO4＞麥芽糖＞NaCl，最佳發(fā)酵培養(yǎng)基配方組合是：葡萄糖65g/L，麥芽糖8g/L，牛肉膏2.5g/L，脫脂奶粉20g/L，豆油10g/L，MgSO4·7H2O0.3g/L，NaCl0.1g/L，K2HPO40.1g/L，正丁醇0.7g/L，棉籽蛋白25g/L，玉米漿干粉15g/L