香菇優(yōu)良菌株選育.pdf

1、香菇產(chǎn)業(yè)是我國(guó)食用菌產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì)的重要支柱之一，在調(diào)整農(nóng)村經(jīng)濟(jì)結(jié)構(gòu)與產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)，促進(jìn)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。我國(guó)是香菇生產(chǎn)大國(guó)，但不是香菇生產(chǎn)強(qiáng)國(guó)，育種工作不能滿足產(chǎn)業(yè)發(fā)展的需求。因此，育種工作迫在眉睫。本文利用YJ-01等23個(gè)香菇品種，通過原生質(zhì)體誘變與單孢雜交進(jìn)行選育，以期得到高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的香菇菌株。主要研究結(jié)果如下:
　　1.確定了香菇菌株YJ-01原生質(zhì)體制備的最適條件:以0.5mol/L MgSO4作為穩(wěn)滲劑，在pH=5.

2、0的條件下，利用混合酶（1％蝸牛酶+1％纖維素酶），在27.9℃條件下酶解5d齡菌絲體2h，原生質(zhì)體產(chǎn)量最高。
　　2.確定了香菇菌株YJ-01原生質(zhì)體再生的最適條件:以0.5mol/L蔗糖作為穩(wěn)滲劑，在pH=5.5的條件下，利用混合酶（1％蝸牛酶+1％纖維素酶），在27.8℃條件下酶解6.5d齡菌絲體2.9h，原生質(zhì)體再生率最高。
　　3.通過原生質(zhì)體紫外誘變獲得547株再生菌株。
　　(1)利用不同栽培料進(jìn)行篩選，

3、得到17株優(yōu)良再生菌株。其中，菌株Y209最適于蘋果木屑上生長(zhǎng)，菌絲生長(zhǎng)指數(shù)(79.88)是YJ-01的3.56倍;菌株Y72最適生長(zhǎng)于沙柳木屑，生長(zhǎng)指數(shù)(70.63)是YJ-01的3.67倍;菌株Y369最適宜生長(zhǎng)于楊桐木屑，培養(yǎng)43d后的連接料量(338.24g)，是YJ-01的2.76倍。
　　(2)對(duì)17株優(yōu)良再生菌株進(jìn)行連續(xù)傳代培養(yǎng)與液體出菇檢測(cè)。結(jié)果表明:菌株Y150的菌絲生長(zhǎng)性能最穩(wěn)定;菌株Y440，Y365，Y31

4、4，Y243和Y283能夠在液體培養(yǎng)基中形成原基。
　　(3)對(duì)17株優(yōu)良再生菌株進(jìn)行酯酶同工酶與RAPD鑒定。結(jié)果表明:菌株Y263，Y440，Y314，Y454，Y381，Y317，Y211，Y150和Y463為變異菌株。其中，菌株Y440和Y314表現(xiàn)最為突出。
　　4.收集香菇品種23個(gè)，對(duì)18個(gè)品種進(jìn)行單孢分離得到1166株單核菌株。通過7個(gè)雜交方案，經(jīng)單孢雜交得到雜交菌株1367株。
　　(1)對(duì)9608-

5、1和808-1的雜交的238株雜交經(jīng)菌絲生長(zhǎng)性能篩選，得到18株優(yōu)良菌株(B80D111,B80D20,B46D111,B10D175,B6D178,B80D51,B70D21,B6D125,B60D111,B81D111,B60D99,B10D167,B9D176,B76D20,B6D149,B27D21,B81D99和B46D20)。其中，B60D111在楊桐木屑上表現(xiàn)最優(yōu)，培養(yǎng)43d后的連接料量為261.54g，分別是9608-1

6、的1.29倍、808-1的1.60倍。B70D184在PDA平板上表現(xiàn)最優(yōu)，生長(zhǎng)指數(shù)(32.73)分別是808-1和9608-1的2.42倍和3.32倍。
　　(2)對(duì)18株優(yōu)良菌株進(jìn)行連續(xù)傳代培養(yǎng)與液體出菇性能鑒定。結(jié)果顯示:菌株B6D178的菌絲生長(zhǎng)性能最穩(wěn)定。菌株B10D167和B10D175能夠在液體培養(yǎng)基中形成原基。
　　(3)對(duì)18株優(yōu)良菌株進(jìn)行酯酶同工酶與RAPD鑒定。結(jié)果顯示:菌株B60D99，B6D149，

7、B60D111，B27D21，B10D175，B10D167，B80D111，B80D51和B70D20與親本條帶具有明顯差異。通過綜合比較，確定菌株B10D175為優(yōu)良雜交菌株
　　(4)對(duì)其余1129株雜交菌株進(jìn)行耐高溫篩選。結(jié)果表明:高溫處理后，有133株雜交菌株能恢復(fù)生長(zhǎng)，其中F149B92，F(xiàn)'47B90和A59D97等20株雜交菌株能在35℃下生長(zhǎng);26株雜交菌株在高溫處理后，經(jīng)過6d25℃恢復(fù)，長(zhǎng)勢(shì)依舊較好，其中F1