多殺菌素高產(chǎn)菌株的選育及其發(fā)酵工藝研究.pdf

1、通過(guò)對(duì)多殺菌素產(chǎn)生菌刺糖多孢菌(SaccharopolysporaSpinosa)C121菌株進(jìn)行分離復(fù)壯，獲得一株遺傳性能較穩(wěn)定的菌株C121-11，以C121-11為出發(fā)菌株，制備原生質(zhì)體，并進(jìn)行紫外線(xiàn)誘變育種，獲得比出發(fā)菌株C121-11效價(jià)(376μg/ml)提高35.64％的菌株P(guān)U131，以PU131為出發(fā)菌株，進(jìn)行氮離子注入誘變，獲得比PU131效價(jià)(510μg/ml)提高34.51％的菌株N229，以N229為出發(fā)菌株，

2、進(jìn)行了60Co-γ射線(xiàn)誘變，獲得比N229效價(jià)(686μg/ml)提高23.91％的菌株Co329。菌株Co329的發(fā)酵效價(jià)(850μg/ml)比原出發(fā)菌株C121-11提高126.06％。傳代試驗(yàn)表明PU131、N229和Co329三個(gè)菌株傳代都比較穩(wěn)定。 以Co329菌株為試驗(yàn)菌株進(jìn)行發(fā)酵配方篩選，探索了不同碳源、不同氮源、無(wú)機(jī)鹽以及微量元素等對(duì)多殺菌素生物合成的影響，經(jīng)八因子十六水平的均勻設(shè)計(jì)以及正交設(shè)計(jì)的篩選試驗(yàn)，對(duì)培養(yǎng)

3、基進(jìn)行了優(yōu)化。優(yōu)選發(fā)酵配方為：葡萄糖5.6％、可溶性淀粉3.2％、豆油0.1％、棉籽餅粉2.0％、豆餅粉0.2％、玉米漿1.0％、酵母粉0.2％、CaCO30.5％、MgSO40.02％、NaCl0.02％、ZnCl20.01％、pH7.0。 另外，進(jìn)行了種齡、接種量、搖瓶裝量、pH、搖床轉(zhuǎn)速以及溫度等培養(yǎng)條件的優(yōu)化試驗(yàn)，篩選出適合Co329菌株產(chǎn)素的最佳發(fā)酵條件如下：種齡2d、接種量10％、50ml/500ml、搖床轉(zhuǎn)速210