生物科學(xué)畢業(yè)論文曼氏無(wú)針烏賊不同地理群體的營(yíng)養(yǎng)成分分析

1、<p><b>　　本科畢業(yè)論文</b></p><p><b>　?。?0 屆）</b></p><p>　　曼氏無(wú)針烏賊不同地理群體的營(yíng)養(yǎng)成分分析</p><p>　　所在學(xué)院 </p><p>　　專(zhuān)業(yè)班級(jí)

2、生物科學(xué) </p><p>　　學(xué)生姓名 學(xué)號(hào) </p><p>　　指導(dǎo)教師 職稱(chēng) </p><p>　　完成日期 年 月 </p><p><b>　　目錄</b>

3、;</p><p>　　摘要錯(cuò)誤!未定義書(shū)簽。</p><p>　　Abstract錯(cuò)誤!未定義書(shū)簽。</p><p><b>　　引言1</b></p><p><b>　　1材料與方法3</b></p><p><b>　　1.1 樣品3</b&

4、gt;</p><p>　　1.2 實(shí)驗(yàn)原理3</p><p>　　1.2.1水分的測(cè)定3</p><p>　　1.2.2總灰分的測(cè)定3</p><p>　　1.2.3脂肪含量的測(cè)定3</p><p>　　1.2.4蛋白質(zhì)含量的測(cè)定3</p><p>　　1.2.5蛋白質(zhì)的氨基酸及微量

5、元素測(cè)定5</p><p>　　1.3 試劑及儀器5</p><p><b>　　1.3.1試劑5</b></p><p><b>　　1.3.2儀器6</b></p><p>　　1.4 方法步驟7</p><p>　　1.4.1 水分的測(cè)定7</p>

6、;<p>　　1.4.2 灰分的測(cè)定8</p><p>　　1.4.3 粗脂肪的測(cè)定8</p><p>　　1.4.4 粗蛋白的測(cè)定9</p><p>　　1.4.5蛋白質(zhì)的氨基酸及微量元素測(cè)定10</p><p>　　1.5 本章小結(jié)10</p><p>　　2 結(jié)果與分析11</p&

7、gt;<p>　　2.1 檢測(cè)環(huán)境參數(shù)11</p><p>　　2.2 檢測(cè)結(jié)果11</p><p>　　2.2.1水分含量11</p><p>　　2.2.2 灰分含量12</p><p>　　2.2.3 脂肪含量 12</p><p>　　2.2.4 蛋白質(zhì)含量13</p>

8、<p>　　2.2.5 氨基酸、微量元素及脂肪酸等的含量 14</p><p>　　2.3 結(jié)果與分析 16</p><p>　　2.3.1水分 16</p><p>　　2.3.2氨基酸 16</p><p>　　2.3.3微量元素 16</p><p>　　2.3.4灰分 17&l

9、t;/p><p>　　2.3.5粗脂肪 17</p><p>　　2.3.6粗蛋白 17</p><p>　　2.4討論 17</p><p>　　2.4.1三地地理環(huán)境差異 18</p><p>　　2.4.2光照和餌料對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分的影響 18</p><p><b>

10、　　2.5小結(jié) 18</b></p><p><b>　　參考文獻(xiàn) 20</b></p><p><b>　　致謝 21</b></p><p><b>　　摘要</b></p><p>　　[摘要]本實(shí)驗(yàn)通過(guò)干燥法、550℃高溫灼燒法、索氏提取法、凱氏定

11、氮法和儀器分析法。對(duì)不同地理群體的曼氏無(wú)針烏賊（Sepiella maindroni）肌肉中的水分、灰分、粗蛋白、粗脂肪及部分微量元素等進(jìn)行了分析。結(jié)果表明：曼氏無(wú)針烏賊肌肉含水量最高，其中廈門(mén)最高，溫州次之，舟山最低，分別為83.8%，77.73%，77.2%；灰分含量舟山最高，溫州次之，廈門(mén)最低，分別為1.77%，1.57%，1.51%；粗脂肪含量舟山最高，廈門(mén)次之，溫州最低，分別為3.95%，3.71%，3.56%；蛋白質(zhì)含量溫州

12、最高，廈門(mén)次之，舟山最低，分別為11.86%，11.54%，11.42%；曼氏無(wú)針烏賊肌肉蛋白質(zhì)中含有17 種氨基酸，谷氨酸（GLU），天冬氨酸（Asp）和亮氨酸（LEU)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高，其中，谷氨酸和天冬氨酸含量溫州最高，廈門(mén)次之，舟山最低，分別為16.0732%，15.9832%，15.6599%和12.0659%，12.0265%，11.9833%；亮氨酸含量溫州最高，舟山次之，廈門(mén)最低，分別為6.9322%，6.7932%，6.

13、7799%；其他的主要氨基酸為賴(lài)氨酸(LYS),異亮氨酸</p><p>　　[關(guān)鍵詞] 曼氏無(wú)針烏賊；肌肉；營(yíng)養(yǎng)成分。錯(cuò)誤!未找到引用源。</p><p><b>　　Abstract</b></p><p>　　[Absract] This paper determinate the contents of water, ash, cr

14、ude protein, crude fat and some trace elements of muscle from Sepiella maindroni in different areas by 550℃ high temperature ignition method, solex method, Kjeldahl method, and instrumental analysis respectively. The stu

15、dy indicated that water content of the muscle of the cuttlefish in Xiamen was the highest 83.8%, followed by Wenzhou 77.73%, Zhoushan 77.2%; ash content in Zhoushan was the highest 1.77% , followed by Xiamen 1.57%, W<

16、/p><p>　　[Key words] Sepiella maindroni；Muscle；Nutritional components</p><p><b>　　引言</b></p><p>　　曼氏無(wú)針烏賊(Sepiella maindroni de Rochebruns)、 屬軟體動(dòng)物門(mén)(Mollusca)、頭足綱(Cephalopod

17、a)、烏賊目(Sepioidea)、烏賊科(Sepiidae)動(dòng)物，為中型烏賊。個(gè)體較金烏賊小，一般胴體長(zhǎng)15cm。眼部橢圓形，后部端圓，長(zhǎng)度為寬度的2 倍。眼部后面有一脈孔，常流出近紅色的腥臭腺體。肉鰭前段狹窄，向后部漸寬，位于胸部?jī)蓚?cè)全緣，末端分離。腕5 對(duì)，4 對(duì)長(zhǎng)度相近，第4 對(duì)腕較其他腕長(zhǎng)。各腕吸盤(pán)大小也相近。其膠制環(huán)外緣具尖錐形小齒。觸腕一般超過(guò)胭長(zhǎng)，穗狹小。眼背白花斑明顯。石灰質(zhì)內(nèi)骨長(zhǎng)橢圓形，長(zhǎng)度約為寬度的3倍，角質(zhì)緣發(fā)達(dá)

18、，后端無(wú)骨針[1]。曼氏無(wú)針烏賊廣泛分布于中國(guó)沿海、俄羅斯遠(yuǎn)東海、日本瀨戶(hù)內(nèi)海和朝鮮西南沿海等海區(qū)，是我國(guó)東海漁場(chǎng)傳統(tǒng)的“四大海產(chǎn)”之一。曼氏無(wú)針烏賊的可食部分約占總體的92%。其肉潔白如玉，具有鮮、嫩、脆的特點(diǎn)，營(yíng)養(yǎng)豐富每百克肉含蛋白質(zhì)13g、脂肪0.7 g 以及豐富的鈣、磷、鐵。除鮮食外，還可加工制成罐頭食品或干制品。烏賊的干制品南方叫螟蚨鲞，北方叫墨魚(yú)干，雄性生殖腺干品叫烏魚(yú)穗，雌性纏卵腺干品叫烏魚(yú)蛋，均</p>&

19、lt;p>　　浙江省歷史上年曼氏無(wú)針烏賊最高產(chǎn)量達(dá)6 萬(wàn)噸，占全國(guó)海洋捕撈總產(chǎn)量的9.3%。但自20 世紀(jì)70 年代中期以來(lái)，由于過(guò)度捕撈和環(huán)境條件的惡化，我國(guó)曼氏無(wú)針烏賊的資源遭到極大的破壞，野生曼氏無(wú)針烏賊資源越來(lái)越稀缺，到目前為止已趨于枯竭[10]。近年來(lái)，曼氏無(wú)針烏賊在市場(chǎng)上供不應(yīng)求，其市場(chǎng)價(jià)格也一路攀升，前景看好。為迅速恢復(fù)我國(guó)的曼氏無(wú)針烏賊資源, 以人工增殖和養(yǎng)殖為手段的資源修復(fù)工作已迅速在我國(guó)部分省市展開(kāi)。然而，曼氏

20、無(wú)針烏賊的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值非常高，因?yàn)槠涔庹諘r(shí)間[11]，餌料供應(yīng)，溫度，水質(zhì)等等都不相同[12]，在不同地理區(qū)域的烏賊是不同的，我們對(duì)其主要的食用部分肌肉進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分分析，來(lái)研究其肌肉的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成，通過(guò)比較舟山、溫州、廈門(mén)三地的烏賊來(lái)獲得信息，為烏賊的人工養(yǎng)殖和保護(hù)開(kāi)發(fā)與利用提供科學(xué)依據(jù)。本文擬采用生化測(cè)定方法, 對(duì)我國(guó)舟山、溫州、廈門(mén)三地的曼氏無(wú)針烏賊肌肉中的營(yíng)養(yǎng)成分構(gòu)成進(jìn)行研究, 希望通過(guò)研究比較更清楚全面地了解曼氏無(wú)針烏賊肌肉的營(yíng)養(yǎng)成分構(gòu)

21、成,以及比較三地烏賊的差異來(lái)確定最具有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和經(jīng)濟(jì)效益的品種，從而為大規(guī)模飼養(yǎng)提供選種依據(jù)。</p><p><b>　　1材料與方法</b></p><p><b>　　1.1樣品</b></p><p>　　檢測(cè)樣品曼氏無(wú)針烏賊的肌肉，采自舟山、溫州、廈門(mén)三地，樣品帶回實(shí)驗(yàn)室后，取其肌肉備實(shí)驗(yàn)分析用。</p&g

22、t;<p><b>　　1.2實(shí)驗(yàn)原理</b></p><p>　　1.2.1水分的測(cè)定</p><p>　　直接干燥法是基于曼氏無(wú)針烏賊肌肉中的水分受熱以后，產(chǎn)生的蒸汽壓高于空氣在電熱干燥箱中的分壓，使三個(gè)不同地里群體烏賊肌肉中的水分蒸發(fā)出來(lái)，同時(shí)，由于不斷的加熱和排走水蒸汽，而達(dá)到完全干燥的目的，曼氏無(wú)針烏賊肌肉干燥的速度取決于這個(gè)壓差的大小。<

23、;/p><p>　　1.2.2總灰分的測(cè)定</p><p>　　把一定量的樣品經(jīng)炭化后放入高溫爐內(nèi)灼燒，使有機(jī)物質(zhì)被氧化分解，以二氧化碳、氮的氧化物及水等形式逸出，而無(wú)機(jī)物質(zhì)以硫酸鹽、磷酸鹽、碳酸鹽、氯化物等無(wú)機(jī)鹽和金屬氧化物的形式殘留下來(lái)，這些殘留物即為灰分，稱(chēng)量殘留物的重量即可計(jì)算出樣品中總灰分的含量。</p><p>　　1.2.3脂肪含量的測(cè)定</p>

24、;<p>　　游離脂肪一般都能直接被乙醚、石油醚等有機(jī)溶劑抽提，而結(jié)合態(tài)脂肪不能直接被乙醚、石油醚提取，需要在一定條件下進(jìn)行水解等處理，使之轉(zhuǎn)換成游離脂肪后方能提取，故索氏抽提法測(cè)得的只是游離態(tài)脂肪，而結(jié)合態(tài)脂肪測(cè)不出來(lái)。將經(jīng)前處理而分散且干燥的樣品用無(wú)水乙醚或者石油醚等溶劑回流提取，使樣品中的脂肪進(jìn)入溶劑中，回收溶劑后所得到的殘留物，即為脂肪（或粗脂肪）。</p><p>　　1.2.4蛋白質(zhì)含量

25、的測(cè)定</p><p>　　樣品與濃硫酸和催化劑一同加熱消化，使蛋白質(zhì)分解，其中碳和氫被氧化成二氧化碳和水，而樣品中的有機(jī)氮轉(zhuǎn)換成氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨。然后加堿蒸餾，使氨逸出用硼酸吸收后再以標(biāo)準(zhǔn)鹽酸或硫酸滴定。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量可計(jì)算出蛋白質(zhì)的含量。</p><p>　　樣品消化：消化反應(yīng)方程式： </p><p>　　2NH2(CH2)2COOH+13H2SO4

26、=(NH4)2S04 + 6C02+12S02+16H20</p><p>　　濃硫酸具有脫水性，使有機(jī)物脫水后被炭化為碳、氫、氮。濃硫酸又有氧化性，將有機(jī)物炭化后的碳化為二氧化碳，硫酸則被還原成二氧化硫：</p><p>　　2 H2SO4+C=2S02+2H20+CO2↑</p><p>　　二氧化硫使氮還原為氨，本身則被氧化為三氧化硫，氨隨之與硫酸作用生成硫

27、酸銨留在酸性溶液中：</p><p>　　K2SO4﹢2NH3 = (NH4)2SO4</p><p>　　在消化反應(yīng)中，為了加速蛋白質(zhì)的分解，縮短消化時(shí)間，常加入下列物質(zhì)：</p><p>　　(1)硫酸鉀 加入硫酸鉀可以提高溶液的沸點(diǎn)而加快有機(jī)物分解，它與硫酸作用生成硫酸氫鉀可提高反應(yīng)溫度，一般純硫酸的沸點(diǎn)在340℃左右，而添加硫酸鉀后，可使溫度提高至

28、400℃以上，原因主要在于隨著消化過(guò)程中硫酸不斷地被分解、水分不斷逸出而使硫酸硫酸鉀濃度增大，故沸點(diǎn)升高，其反應(yīng)式如下：</p><p>　　K2SO4+ H2SO4=2KHSO4</p><p>　　2KHSO4=K2SO4+H2O↑十+SO 3</p><p>　　但硫酸鉀加入量不能太大，否則消化體系溫度過(guò)高，又會(huì)引起已生成的銨鹽發(fā)生熱分解放出氨而造成損失：&l

29、t;/p><p>　　(NH4)2SO4=NH3↑十(NH4)HSO4</p><p>　　2(NH4)HSO4→2NH3↑+2SO3↑十2H2O</p><p>　　除硫酸鉀外，也可以加入硫酸鈉、氯化鉀等鹽類(lèi)來(lái)提高沸點(diǎn)，但效果不如硫酸鉀。</p><p>　　(2)硫酸銅CuS04 硫酸銅起催化劑的作用。凱氏定氮法中可用的催化劑種類(lèi)很多，除硫

30、酸銅外，還有氧化汞、汞、硒粉、二氧化鈦等，但考慮到效果、價(jià)格及環(huán)境污染等多種因素，應(yīng)用最廣泛的是硫酸銅、使用時(shí)常加入少量過(guò)氧化氫、次氯酸鉀等作為氧化劑以加速有機(jī)物氧化，硫酸銅的作用機(jī)理如下所示：</p><p>　　2Cu SO4→Cu SO4+ SO2↑+O2</p><p>　　C+2CuSO4→Cu2 SO4+S02↑ +CO2↑</p><p>　　Cu2S

31、O+2H2SO4→2CuSO4+2H2O+SO2↑</p><p>　　此反應(yīng)不斷進(jìn)行，待有機(jī)物全部被消化完后，不再有硫酸亞銅生成，溶液呈現(xiàn)清澈的藍(lán)綠色。故硫酸銅除起催化劑的作用外，還可指示消化終點(diǎn)的到達(dá)，以及下一步蒸餾時(shí)作為堿性反應(yīng)的指示劑。</p><p>　　(1)蒸餾：在消化完全的樣品溶液中加入濃氫氧化鈉使呈堿性，加熱蒸餾即可釋放出氨氣反應(yīng)方程式如下：</p><

32、;p>　　2NaOH+(NH4) SO4=2NH3↑+ Na2SO4+2H2O</p><p>　　(2)吸收與滴定：加熱蒸餾所放出氨可甩硼酸溶液進(jìn)行吸收，待吸收完全后，再用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，因硼酸呈微弱酸性，用酸滴定不影響指示劑的變色反應(yīng)，但它有吸收氨的作用，吸收及滴定反應(yīng)方程式如下：</p><p>　　2NH3+4H3BO3=(NH4) 2B4O7+5H2O</p>

33、<p>　　(NH4) 2B4O7+5H2O+2HCl=2NH4C1+4H3BO3</p><p>　　蒸餾釋放出來(lái)的氨，也可以采用硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液吸收，然后再用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液反滴定吸收液中過(guò)剩的硫酸或鹽酸，計(jì)算出總氮量。</p><p>　　1.2.5蛋白質(zhì)的氨基酸及微量元素測(cè)定</p><p>　　氨基酸和微量元素鉀、 鈣、 納、 鎂、磷、鐵、

34、銅、鋅、錳、硒的測(cè)定委托上海譜尼測(cè)試技術(shù)有限公司(Pony Testing International Group www.ponytesting.com)和浙江大學(xué)飼料研究所測(cè)定。</p><p>　　參照標(biāo)準(zhǔn) GB/T 5009.124-2003 GB/T 5009.93-2003 </p><p>　　GB/T 5009.91-2003

35、 GB/T 5009.90-2003 GB/T 5009.13-2003 GB/T 5009.87-2003</p><p><b>　　1.3試劑及儀器</b></p><p><b>　　1.3.1試劑</b></p><p>　　(1)1：4鹽酸溶液</p

36、><p>　　(2)0.5％三氯化鐵溶液和等量藍(lán)墨水的混合液</p><p>　　(3)6mol/L硝酸</p><p>　　(4)36％過(guò)氧化氫</p><p>　　(5)辛醇或純植物油</p><p>　　(6)無(wú)水乙醚或石油醚</p><p>　　(7)海砂(同水分測(cè)定)</p>

37、<p><b>　　(8)濃硫酸，</b></p><p><b>　　(9)硫酸銅，</b></p><p><b>　　(10)硫酸鉀，</b></p><p>　　(11)40％氫氧化鈉溶液</p><p>　　(12)4%硼酸吸收液：稱(chēng)取29g硼酸溶解于50

38、0ml熱水中，搖勻備用。</p><p>　　(13)甲基紅—溴甲酚綠混合指示劑：5份0.2%溴甲酚綠95%乙醇溶液與1份0.2%甲基紅乙醇溶液混合均勻。</p><p>　　(14)0.1000mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液</p><p><b>　　1.3.2儀器</b></p><p>　　恒溫烘箱 稱(chēng)量瓶 干燥冷卻器

39、分析天平 高溫爐 坩堝 坩堝鉗 水浴恒溫箱 研缽 </p><p>　　凱氏燒瓶(500m1) 索氏抽提器 </p><p>　　凱氏定氮蒸餾裝置，如圖所示</p><p><b>　　1.4. 方法步驟</b></p><p>　　1.4.1水分的測(cè)定</p><p>　　(1)水分測(cè)定

40、采用105℃常壓恒溫 直接干燥法</p><p>　　(2)測(cè)定時(shí)，精確稱(chēng)取曼氏無(wú)針烏賊肌肉樣品19.3353 g，23.2297 g ，16.3461 g 置于已干燥、冷卻并稱(chēng)至恒重的有蓋稱(chēng)量瓶中，移入105℃常壓烘箱中，開(kāi)蓋烘2~4小時(shí)后取出，加蓋置干燥冷卻器內(nèi)冷卻0.5小時(shí)后稱(chēng)重。再烘1小時(shí)左右，又冷卻0.5小時(shí)后稱(chēng)重。重復(fù)此操作，直至前后兩次質(zhì)量差不超過(guò)2mg即算恒重。</p><

41、p>　　(3)測(cè)定結(jié)果按下式計(jì)算：</p><p>　　水分（%）=（m1-m2）/(m1-m3)×100</p><p>　　式中 m1——干燥前樣品與稱(chēng)量瓶質(zhì)量，g</p><p>　　m2——干燥后樣品與稱(chēng)量瓶質(zhì)量，g；</p><p>　　m3——稱(chēng)量瓶質(zhì)量，g。</p><p>　　1.4.2

42、灰分的測(cè)定</p><p><b>　　(1)瓷坩堝的準(zhǔn)備</b></p><p>　　將坩堝用鹽酸(1：4)煮1～2小時(shí)，洗凈晾干后，用三氯化鐵與藍(lán)墨水的混合液在坩堝外壁及蓋上寫(xiě)上編號(hào)，置于規(guī)定溫度(500～550℃)的高溫爐中灼燒1小時(shí)，移至爐口冷卻到200℃左右后，再移入干燥器中，冷卻至室溫后，準(zhǔn)確稱(chēng)重，再放入高溫爐內(nèi)灼燒30分鐘，取出冷卻稱(chēng)重，直至恒重(兩次稱(chēng)

43、量之差不超過(guò)0．5mg)。準(zhǔn)確記錄坩堝重量。</p><p><b>　　(2)樣品預(yù)處理</b></p><p><b>　　(3)炭化</b></p><p>　　在試樣放入高溫爐灼燒前進(jìn)行炭化處理，防止在灼燒時(shí)，因溫度高試樣中的水分急劇蒸發(fā)使試樣飛揚(yáng)；防止糖、蛋白質(zhì)、淀粉等易發(fā)泡膨脹的物質(zhì)在高溫下發(fā)泡膨脹而溢出坩堝；

44、不經(jīng)炭化而直接灰化，碳粒易被包住，灰化不完全。炭化操作一般在電爐上進(jìn)行。把坩堝置于電爐上，半蓋坩堝蓋，小心加熱使試樣在通氣情況下逐漸炭化，直至無(wú)黑煙產(chǎn)生，再進(jìn)行炭化。</p><p><b>　　(4)灰化</b></p><p>　　炭化后，把坩堝移入已達(dá)規(guī)定溫度(500～550℃)的高溫爐爐口處，稍停留片刻，再慢慢移入爐膛內(nèi)，坩堝蓋斜倚在坩堝口,關(guān)閉爐門(mén)，灼燒1小

45、時(shí)，至灰中無(wú)碳粒存在。打開(kāi)爐門(mén)，將坩堝移至爐口處冷卻至200℃左右，移入干燥器中冷卻至室溫，準(zhǔn)確稱(chēng)重，再灼燒、冷卻、稱(chēng)重，直至達(dá)到恒重。</p><p><b>　　(5)結(jié)果計(jì)算</b></p><p>　　灰分（%）= m3—m1／m2－m1×100%</p><p>　　式中 m1——空坩堝質(zhì)量，g；</p>

46、<p>　　m2——樣品加空坩堝質(zhì)量，g；</p><p>　　m3——?dú)埢壹永污釄遒|(zhì)量，g。</p><p>　　1.4.3粗脂肪的測(cè)定</p><p>　　(1) 樣品處理： </p><p>　　精密稱(chēng)取干燥并研細(xì)的樣品，無(wú)損地移入濾紙筒內(nèi)。</p><p><b>　　(2) 抽提</

47、b></p><p>　　將濾紙筒放入索氏抽提器內(nèi)，連接已干燥至恒重的脂肪接受瓶，由冷凝管上端加入無(wú)水乙醚或石油醚，加量為接受瓶的2／3體積，于水浴上(溫度保持在80℃左右)加熱使乙醚或石油醚不斷的回流提取，提取時(shí)間為6～12小時(shí)，至抽提完全為止。</p><p>　　(3)回收溶劑、烘干、稱(chēng)重索氏提取器 取下接受瓶，回收乙醚或石油醚，待接受瓶?jī)?nèi)乙醚剩1～2ml時(shí)，在水浴上蒸干

48、，再于105℃的恒溫箱中干燥2小時(shí)，取出放干燥器內(nèi)冷卻30分鐘，稱(chēng)重，并重復(fù)操作至恒重。</p><p>　　(4)結(jié)果計(jì)算 </p><p>　　脂肪（%） =( m2-m1)／m×100%</p><p>　　式中： m2——接受瓶和脂肪的質(zhì)量，g；</p><p>　　m1——接受瓶的質(zhì)量，g；</p>&

49、lt;p>　　m——樣品的質(zhì)量(如為測(cè)定水分后的樣品，以測(cè)定水分前的質(zhì)量計(jì))，g。</p><p>　　1.4.4粗蛋白的測(cè)定</p><p><b>　　(1)蒸餾操作</b></p><p>　　將自來(lái)水經(jīng)（1）注入到蒸餾瓶夾層（2）中，使水面稍低于蒸餾瓶頸部的轉(zhuǎn)彎處。把裝有標(biāo)準(zhǔn)酸溶液的接收瓶（5）置于冷凝器（6）的下放，冷凝器的尖端

50、插入酸液面以下，接收瓶?jī)?nèi)須先事先加入指示劑。先將樣品由漏斗（4）注入蒸餾瓶（3）中，并以少量的蒸餾水沖洗漏斗。再把氫氧化鈉溶液由漏斗（4）注入蒸餾瓶（3）中，并以少量的蒸餾水沖洗漏斗，然后用少量蒸餾水將漏斗封閉。最后加熱，將蒸餾瓶夾層（2）內(nèi)的水煮沸。從蒸餾瓶（3）內(nèi)的水溶液沸騰開(kāi)始計(jì)算時(shí)間，大約10分鐘即可蒸餾完畢。移開(kāi)接收瓶后，再移去火源，以防倒吸。</p><p><b>　　(2)蒸餾瓶的洗滌&

51、lt;/b></p><p>　　當(dāng)把火源移去后，蒸餾瓶（3）內(nèi)的廢液立刻六到蒸餾瓶的夾層（2）內(nèi)并經(jīng)排水管（7）排出。再把裝有蒸餾水的三角瓶置于冷凝器（6）下方，并將冷凝器的簡(jiǎn)短插入水的液面以下，再加熱至沸，然后移去火源，三角瓶中的蒸餾水流到蒸餾瓶（3）內(nèi)，再倒流至蒸餾瓶的夾層（2），由排水管（7）排出。按上述方法將一起洗滌2~3次。 </p><p><b>　　(3)

52、消化</b></p><p>　　稱(chēng)取曼氏無(wú)針烏賊肌肉樣品12.0926 g于100mL凱氏燒瓶中，加入0.5 g CuSO4、10 g K2SO4及20 mL H2SO4，搖勻進(jìn)行消化操作，小火加熱至完全炭化后加大火進(jìn)行消化，溶液呈藍(lán)綠色為終點(diǎn)，冷卻后用蒸餾水定容至100 ml。</p><p><b>　　(4)吸收和蒸餾</b></p>

53、<p>　　取消化稀釋液5 ml于反應(yīng)管內(nèi)，經(jīng)漏斗再加入5 mL40%Naoh溶液至強(qiáng)堿性，加少量蒸餾水洗漏兜次，夾好漏斗夾用水密封，蒸餾水冷凝管預(yù)先插入盛用10 ml 4%硼酸吸收液中，蒸餾至混合液變綠色。</p><p>　　注：蒸餾大約10 min即可，將冷凝管提高液面，并用蒸餾水洗滌冷凝管尖端后停止蒸餾。</p><p><b>　　(5)滴定</b&g

54、t;</p><p>　　用0.1000 mol/l HCL滴定至微紅色為終點(diǎn)，同時(shí)作空白對(duì)照。</p><p><b>　　(6)結(jié)果計(jì)算</b></p><p><b>　　蛋白質(zhì)（％）：</b></p><p>　　C×(Vl - V2) ×(M氮/1000)/(m

55、5;V3/100)×F×100</p><p>　　式中： C——鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/L</p><p>　　Vl——滴定樣品吸收液時(shí)消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，ml</p><p>　　V2——滴定空白吸收液時(shí)消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，ml</p><p>　　V3——用于蒸餾的消化稀釋液體積，ml</p>

56、<p><b>　　m——樣品質(zhì)量，g</b></p><p>　　M氮——氮的摩爾質(zhì)量，14.01g/mol</p><p>　　F——氮換算為蛋白質(zhì)的系數(shù)，6.23。</p><p>　　1.4.5氨基酸及微量元素測(cè)定</p><p>　　氨基酸、脂肪酸和微量元素，鉀、鈣、納、鎂、磷、鐵、銅、鋅、錳 、硒

57、的測(cè)定委托上海譜尼測(cè)試技術(shù)有限公司(Pony Testing International Group www.ponytesting.com)和浙江大學(xué)飼料研究所測(cè)定。</p><p><b>　　1.5本章小結(jié) </b></p><p>　　水分測(cè)定采用105 ℃烘干法； 粗灰分的測(cè)定采用高溫灰化法；粗脂肪的測(cè)定采用索氏抽提法；凱氏定氮法測(cè)定粗蛋白(國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB50

58、0915285)；氨基酸測(cè)定采用氨基酸自動(dòng)分析儀；脂肪酸采用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀測(cè)定；原子吸收光譜法測(cè)定常量和微量元素含量。通過(guò)以上方法可以測(cè)出實(shí)驗(yàn)所需數(shù)據(jù)，從而得出結(jié)論。</p><p>　　2.結(jié)果與分析錯(cuò)誤!未找到引用源。</p><p>　　2.1 檢測(cè)環(huán)境參數(shù)</p><p>　　以上檢測(cè)環(huán)境均在室溫20℃ 濕度30﹪RH的環(huán)境下進(jìn)行的檢測(cè)。</p

59、><p><b>　　2.2 檢測(cè)結(jié)果：</b></p><p>　　2.2.1水分測(cè)定數(shù)據(jù)：</p><p><b>　　表2.1 水分測(cè)定</b></p><p>　　Tab.2.1 Water determing</p><p>　　2.2.2 灰分?jǐn)?shù)據(jù) </p>

60、;<p><b>　　表2.2 灰分測(cè)定</b></p><p>　　Tab.2.2 Dust determing</p><p>　　2.2.3 粗脂肪測(cè)定數(shù)據(jù)：</p><p>　　表2.3 粗脂肪測(cè)定</p><p>　　Tab.2.3 Fat determing</p><p&g

61、t;　　2.2.4 蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)：</p><p>　　表2.4 蛋白質(zhì)測(cè)定</p><p>　　Tab.2.1 Protein determing</p><p>　　2.2.5 氨基酸，微量元素及脂肪酸數(shù)據(jù)</p><p>　　表2.5 氨基酸測(cè)定</p><p>　　Tab.2.5 Amino acid deter

62、ming</p><p>　　表2.6 維生素等測(cè)定</p><p>　　Tab.2.6 Vitamin etc.determing</p><p>　　表2.7 微量元素測(cè)定</p><p>　　Tab.2.7 Microelement determing</p><p>　　表2.7 脂肪酸測(cè)定</p>

63、<p>　　Tab.2.7 Fatty acid determing</p><p><b>　　2.3 結(jié)果分析 </b></p><p>　　根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)在這三個(gè)地區(qū)的曼氏無(wú)針烏賊的營(yíng)養(yǎng)成分含量略微有些差異，但是基本物質(zhì)組成完全相同，都具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。曼氏無(wú)針烏賊肌肉中，水分含量最高，舟山77.2%，廈門(mén)83.8%，溫州77.73%，可以發(fā)

64、現(xiàn)廈門(mén)地區(qū)的烏賊肌肉含水量相對(duì)其他兩種高出6%左右；灰分含量與粗脂肪含量分別為舟山1.77%，廈門(mén)1.57%，溫州1.51%和舟山3.95.2%，廈門(mén)3.71%，溫州3.56%，三地相差都不大，廈門(mén)與溫州相差更小，舟山略高；蛋白質(zhì)含量分別為舟山11.42%，廈門(mén)11.54%，溫州11.86%，三地相差都不大，溫州略高，其他兩地相差不大；氨基酸總量以及各種氨基酸的含量也很接近；但是能量相差很大，舟山145.23千卡，廈門(mén)137.59千卡，

65、溫州439.32千卡，溫州烏賊的能量最高，與另外兩地的差距很大；碳水化合物，膽固醇，維生素A，維生素C，維生素E，硫胺素，核黃素尼克酸，α-E，(β-γ)E，不孢和脂肪酸，卵磷脂都相差不大。</p><p><b>　　2.3.1水分</b></p><p>　　曼氏無(wú)針烏賊肌肉的主要成分是水，其含量分別為舟山77.2%，廈門(mén)83.8%，溫州77.73%。</p

66、><p><b>　　2.3.2氨基酸</b></p><p>　　曼氏無(wú)針烏賊肌肉蛋白質(zhì)中含有18 種編碼氨基酸，其中，谷氨酸（GLU），天冬氨酸（Asp）和亮氨酸（LEU)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高，分別占舟山15.6599 %、11.9833%和6.7932%；溫州16.0732 %、12.0659 %和6.9322%；廈門(mén)15.9832 %、12.0265 %和6.7799%

67、。其他的主要氨基酸為賴(lài)氨酸(LYS),，異亮氨酸(ILR) ，甘氨酸（GLY），含量分別為舟山3.8232 %、3.2656%和2.8932%；溫州3.8932 %、3.2732 %和2.9532%；廈門(mén)3.9032%、3.3032%和2.9465%。氨基酸總的含量為 舟山63.3878%、溫州63.8992%、廈門(mén)63.9727%。</p><p><b>　　2.3.3微量元素</b>&

68、lt;/p><p>　　微量元素中磷、碘、硒、鎂的含量相對(duì)較高，含量分別為舟山 1482.6mg∕kg、316.5mg∕kg、275.6mg∕kg、210.2mg∕kg；溫州1476.5mg∕kg、304.5mg∕kg、243.2mg∕kg、201.2mg∕kg；廈門(mén)1480.2mg∕kg、300.2mg∕kg、252.3mg∕kg、200.3mg∕kg；其中鉛的含量最低都是 0.1mg∕kg。</p>

69、<p><b>　　2.3.4灰分</b></p><p>　　舟山曼氏無(wú)針烏賊肌肉灰分含量為1.77%，廈門(mén)為1.51%，溫州為1.57%。</p><p><b>　　2.3.5粗脂肪</b></p><p>　　舟山曼氏無(wú)針烏賊肌肉粗脂肪含量為3.95%，廈門(mén)為3.71%，溫州為3.56%。</p&

70、gt;<p><b>　　2.3.6粗蛋白</b></p><p>　　舟山曼氏無(wú)針烏賊肌肉蛋白質(zhì)含量為11.42%，廈門(mén)為11.54%，溫州為11.86%。</p><p><b>　　2.4討論</b></p><p>　　2.4.1三地地理環(huán)境差異</p><p>　　舟山地處長(zhǎng)

71、江口南側(cè)。地理位置介于東經(jīng)121o30′～123o25′，北緯29o32′～31o04′之間，東西長(zhǎng)182千米，南北寬169千米。舟山群島四面環(huán)海，屬北亞熱帶南緣季風(fēng)海洋型氣候，冬暖夏涼，溫和濕潤(rùn)，光照充足。年平均氣溫16℃左右，最熱8月，平均氣溫25.8—28.0℃；最冷1月，平均氣溫5.2-5.9℃。常年降水量927一1620毫米。年平均日照1941～2257小時(shí)，太陽(yáng)輻射總量為 4126～4598焦?fàn)?平方米，無(wú)霜期251～303

72、天，適宜各種生物群落繁衍、生長(zhǎng)，給漁農(nóng)業(yè)生產(chǎn)提供了相當(dāng)有利的條件。</p><p>　　廈門(mén)位于東經(jīng)118o04′04〃、北緯24o26′46〃， 屬亞熱帶氣候，溫和多雨，年平均氣溫在21℃左右，夏無(wú)酷暑，冬無(wú)嚴(yán)寒。年平均降雨量在1200毫米左右，每年5至8月份雨量最多，風(fēng)力一般3至4級(jí)，常向主導(dǎo)風(fēng)力為東北風(fēng)。由于太平洋溫差氣流的關(guān)系，每年平均受4至5次臺(tái)風(fēng)的影響，且多集中在7至9月份。</p>&

73、lt;p>　　溫州地處中國(guó)大陸環(huán)太平洋岸線(xiàn)(約18000公里)的中段，浙江省東南部。全境介于北緯27o.03'－28o36'、東經(jīng)119o37'－121o18'之間。東瀕東海，溫州屬中亞熱帶季風(fēng)氣候區(qū)，影響本地區(qū)氣候的主要因素包括較強(qiáng)的太陽(yáng)輻射，海洋水體的調(diào)節(jié)，加上冬季冷空氣因西北群山阻擋而減輕了侵襲強(qiáng)度，夏季暖濕氣流活動(dòng)因地形抬升而多云雨，形成溫州氣候溫暖，雨量充沛，光照豐富，四季分明的氣候特點(diǎn)。

74、</p><p>　　2.4.2餌料和光照對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分的影響</p><p>　　投喂不同餌料對(duì)曼氏無(wú)針烏賊幼體的粗蛋白、粗脂肪、水分、總灰分影響顯著。餌</p><p>　　料中活脊尾白蝦的粗蛋白含量最高(77.49%),冰鮮雜魚(yú)和配合餌料僅為52.42%和43.81%?？赡苁且虮r雜魚(yú)和配合餌料中蛋白含量過(guò)低,因而限制了兩組烏賊幼體的生長(zhǎng)；也可能是這兩種餌料中氨基

75、酸不平衡。生長(zhǎng)最好的活脊尾白蝦組幼體的粗脂肪和總灰分含量最低, 分別為2.91% 和1.31%,說(shuō)明生長(zhǎng)良好的烏賊體內(nèi)脂肪和灰分含量應(yīng)該不高。烏賊體內(nèi)總灰分與餌料中總灰分呈正相關(guān)關(guān)系,濕配合餌料組幼體的總灰分達(dá)到1.90%,高于其他兩組的1.31% 和1.68%,該組的配合餌料中總灰分最高(11.42%), 這與前面推測(cè)該組生長(zhǎng)不好的原因一致。雖然濕配合餌料的水分含量很低，僅為10.01%, 但投喂?jié)衽浜橡D料組烏賊的水分含量反而高于其它

76、兩組, 這說(shuō)明餌料中水分含量的高低不影響烏賊體水分的含量[13]。</p><p>　　在光照顏色相同、光照強(qiáng)度不同的條件下,光照強(qiáng)度對(duì)曼氏無(wú)針烏賊有不同的影響[14]。</p><p><b>　　2.5本章小結(jié)</b></p><p>　　三個(gè)地區(qū)的曼氏無(wú)針烏賊的營(yíng)養(yǎng)成分含量略微有些差異，但是基本物質(zhì)組成完全相同，都具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。曼氏

77、無(wú)針烏賊肌肉的主要成分是水，其次是粗蛋白、粗脂肪和灰分，還有一些微量元素。其中氨基酸的測(cè)定顯示，曼氏無(wú)針烏賊肌肉蛋白質(zhì)中含有18 種編碼氨基酸，其中，谷氨酸（GLU），天冬氨酸（Asp）和亮氨酸（LEU)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高，其他的主要氨基酸次之，為賴(lài)氨酸(LYS),，異亮氨酸(ILR) ，甘氨酸（GLY）。微量元素中磷、碘、硒、鎂的含量相對(duì)較高，鉛最低。碳水化合物，膽固醇，維生素A，維生素C，維生素E，硫胺素，核黃素尼克酸，α-E，(β-γ

78、)E，不孢和脂肪酸，卵磷脂的含量都相差不大。</p><p><b>　　參考文獻(xiàn)</b></p><p>　　?？姑?，吳常文等.曼氏無(wú)針烏賊野生及養(yǎng)殖群體的生化特征及其形成機(jī)制的研究[J].海洋與湖 澤 2008，39(3):145-151</p><p>　　董正之.頭足類(lèi)研究. 中國(guó)海洋科學(xué)研究及開(kāi)發(fā). 曾呈奎, 周海鷗, 李本川主編

79、[M].青島: 青島出版社,1993,23-36</p><p>　　符方堯，蔣霞敏等.曼氏無(wú)針烏賊的藥用價(jià)值及其人工養(yǎng)殖[J].致富指南,2005,32(12):26-27</p><p>　　宋超霞，王春琳，邵銀文，王津偉，樊曉旭.野生與養(yǎng)殖曼氏無(wú)針烏賊肌肉的營(yíng)養(yǎng)成分和評(píng)價(jià)[J]科學(xué)養(yǎng)魚(yú),2009,301-303</p><p>　　陳曉娥.曼氏無(wú)針烏賊墨的主要

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82、H I;Skiftesvik AB;Kuhn P The relationship between ultraviolet and polarized light and growth rate in the early larval stages of turbot (Scophtalmus maximus),Atlantic cod (Gadusmorhua) and Atlantic herring (Clupeaharengus

83、) reared in intensive culture conditions 2006(1/4) </p><p>　　Isolation via enrichment and characterization of ten polymorphic microsatellite loci in the cuttlefish, Sepiella maindroni de Rochebruns.Acta Ocea